人宫颈癌细胞,HeLa细胞 HeLa 贴壁上皮细胞
(1)细胞背景
HeLa是第一个来自人体组织经连续培养获得的非整倍体上皮样细胞系,它由Gey GO等在1951年从31岁女性黑人的宫颈癌组织建立。经原始组织切片重新观察,Jones等将其诊断为腺癌。已知该细胞系含有人乳头状瘤病毒HPV18序列,需在2级生物安全防护台操作。该细胞角蛋白阳性,p53表达量较低,但表达正常水平的pRB(视网膜母细胞瘤抑制因子)。
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人宫颈癌细胞,HeLa细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人宫颈癌细胞,HeLa细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A86885 四甲基氯化铵 ,规格: 1公斤 ,保存条件: RT
A86886 四甲基碘化铵 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86887 四丁基氢氧化铵 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A86888 四正丁基氯化铵 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86889 四正丁基碘化铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86890 钼酸铵 ,规格: 250克 ,保存条件: RT
A86891 磷酸烯醇丙酮酸单环己铵盐 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86892 碳酸铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86893 磷酸二氢铵 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86894 磷酸氢二铵 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86895 磷酸铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86896 氟化氢铵 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86897 柠檬酸铵 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86898 重铬酸铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86899 氟化铵 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A86900 草酸铵 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86901 硫氰酸铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86902 硫酸铝铵 ,规格: 250毫克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86903 碳酸氢铵 ,规格: 1克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86904 重硫酸铵 ,规格: 1克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86905 硼酸铵 ,规格: 5克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86906 溴化铵 ,规格: 25克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86907 铬酸铵 ,规格: 1克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86908 氟铝酸铵 ,规格: 5克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86909 氟硼酸铵 ,规格: 1克 ,保存条件: RT
A86910 氟钛酸铵 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A86911 次磷酸铵 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86912 碘化铵 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86913 磷钼酸铵 ,规格: 10毫克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86914 硫酸镍铵 ,规格: 100毫克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86915 亚硫酸铵 ,规格: 1克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86916 钨酸铵 ,规格: 1克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86917 五硼酸铵 ,规格: 5克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86918 苯甲酸铵 ,规格: 250毫克 ,保存条件: 2~8℃
A86919 柠檬酸氢二铵 ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃
A86920 柠檬酸铁铵 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A86921 草酸高铁铵 ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃
A86922 甲酸铵 ,规格: 100毫克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86923 吡咯烷二硫代甲酸铵盐 ,规格: 1克 ,保存条件: 保存:-20℃
A86924 酒石酸铵 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86925 苄基三乙基氯化铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86926 聚乙烯醇磷酸铵 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86927 氯铂酸铵 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86928 硫酸铈铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86929 过氧化氢尿素 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86930 三乙烯二铵 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A86931 硫代氨基脲 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86932 羟铵溶液 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86933 三乙铵 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86934 硫酸镁 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A86935 无水硫酸镁 ,规格: 100克 ,人宫颈癌细胞,HeLa细胞保存条件: RT
A86936 镁 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86937 钙镁试剂 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A86938 氧化镁 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86939 硼酸镁 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A86940 碱式碳酸镁 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A86941 氟化镁 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A86942 氢氧化镁 ,规格: 500克 ,保存条件: RT