人神经胶质瘤细胞，U251细胞

人神经胶质瘤细胞，U251细胞 U251 贴壁成纤维细胞样

（1）细胞背景

人神经胶质瘤细胞；贴壁生长；可用于胶质瘤的研究。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人神经胶质瘤细胞，U251细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人神经胶质瘤细胞，U251细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A86027 苯基琼脂糖凝胶CL-4B ，规格： 100毫克 ，保存条件： 2～8℃

A86028 苯基琼脂糖凝胶6FF(高分辨率) ，规格： 1克 ，保存条件： 2～8℃

A86029 蓝色琼脂糖凝胶6FF ，规格： 25毫克 ，保存条件： 2～8℃

A86030 红色琼脂糖凝胶6FF ，规格： 1克 ，保存条件： 2～8℃

A86031 肝素琼脂糖凝胶6FF ，规格： 5克 ，保存条件： 2～8℃

A86032 肝素琼脂糖凝胶CL-6B ，规格： 25毫克 ，保存条件： 保存：-20℃

A86033 肝素琼脂糖凝胶CL-4B ，规格： 100毫克 ，保存条件： 2～8℃

A86034 IgG琼脂糖凝胶6FF ，规格： 800u ，保存条件： 保存：-20℃

A86035 琼脂糖凝胶6FF ，规格： 1克 ，保存条件： 2～8℃

A86036 DEAE琼脂糖凝胶CL-6B ，规格： 3000U ，保存条件： 2～8℃

A86037 琼脂糖凝胶CL-6B ，规格： 5克 ，保存条件： 2～8℃

A86038 琼脂糖凝胶CL-4B ，规格： 25克 ，保存条件： 2～8℃

A86039 琼脂糖凝胶CL-2B ，规格： 1KU ，保存条件： 2～8℃

A86040 丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR ，规格： 100U ，保存条件： 2～8℃

A86041 丙烯葡聚糖凝胶S-200 HR ，规格： 250U ，保存条件： 2～8℃

A86042 丙烯葡聚糖凝胶S-300 HR ，规格： 7.5KU ，保存条件： 保存：-20℃

A86043 丙烯葡聚糖凝胶S-400 HR ，规格： 15KU ，保存条件： 2～8℃

A86044 丙烯葡聚糖凝胶S-500 HR ，规格： 15KU ，保存条件： 2～8℃

A86045 丙烯葡聚糖凝胶S-1000 SF ，规格： 75KU ，保存条件： 2～8℃

A86046 蓝色葡聚糖2000 ，规格： 1克 ，保存条件： 保存：-20℃

A86047 DEAE葡聚糖 ，规格： 5克 ，保存条件： 2～8℃

A86048 葡聚糖 ，规格： 500U ，保存条件： 2～8℃

A86049 葡聚糖T3 ，规格： 5U ，保存条件： 2～8℃

A86050 葡聚糖T4 ，规格： 25U ，保存条件： 2～8℃

A86051 葡聚糖T5 ，规格： 15KU ，保存条件： 保存：-20℃

A86052 葡聚糖T6 ，规格： 20毫克 ，保存条件： 2～8℃

A86053 葡聚糖T7 ，规格： 50毫克 ，保存条件： 2～8℃

A86054 葡聚糖T9 ，规格： 250毫克 ，保存条件： 2～8℃

A86055 葡聚糖T10 ，规格： 1000U ，保存条件： 保存：-20℃

A86056 葡聚糖T11 ，规格： 10KU ，保存条件： 2～8℃

A86057 葡聚糖T20 ，规格： 200u ，保存条件： 保存：-20℃

A86058 葡聚糖T40 ，规格： 500u ，保存条件： 2～8℃

A86059 葡聚糖T50 ，规格： 1000u ，保存条件： 2～8℃

A86060 葡聚糖T70 ，规格： 500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86061 葡聚糖T100 ，规格： 2500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86062 葡聚糖T110 ，规格： 500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86063 葡聚糖T200 ，规格： 500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86064 葡聚糖T500 ，规格： 500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86065 葡聚糖T1000 ，规格： 2000u ，保存条件： 保存：-20℃

A86066 葡聚糖T2000 ，规格： 500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86067 聚蔗糖70 ，规格： 2000u ，保存条件： 保存：-20℃

A86068 聚蔗糖400 ，规格： 10KU ，保存条件： 保存：-20℃

A86069 细胞分离液 ，规格： 500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86070 淋巴细胞分离液 ，规格： 5000u ，保存条件： 保存：-20℃

A86071 亲和硅烷 ，规格： 25000u ，人神经胶质瘤细胞，U251细胞保存条件： 保存：-20℃

A86072 疏水硅烷 ，规格： 100u ，保存条件： 保存：-20℃

A86073 氯化铯 ，规格： 500u ，保存条件： 保存：-20℃

A86074 羟基磷灰石 ，规格： 300u ，保存条件： 保存：-20℃

A86075 透析袋8DM,10MD ，规格： 1000u ，保存条件： 保存：-20℃

A86076 透析袋27DM,34MD ，规格： LC200u ，保存条件： 保存：-20℃