人神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞 SK-N-SH 贴壁上皮细胞
(1)细胞背景
该细胞是由Biedler JL建立的两株神经组织来源的细胞中的一株(另一株是SK-N-MC)。与SK-N-MC不同,该细胞倍增时间更长,表达更高水平的多巴胺-β-羟化酶;常作为细胞介导的细胞毒性分析的靶细胞。
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A85683 低聚木糖 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85684 低聚半乳糖 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85685 赤藓糖醇 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85686 L(-)岩藻糖 ,规格: 500克 ,保存条件: 2~8℃
A85687 岩藻多糖 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85688 菊糖 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85689 D-甘露糖铵盐酸盐 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85690 蜜二糖 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85691 松三糖 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85692 D-(-)水杨苷 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85693 水苏糖 ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃
A85694 玉米淀粉 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85695 DL-异柠檬酸三钠盐 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85696 焦磷酸钠 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85697 焦磷酸钾 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85698 葡糖酸内酯 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85699 甜蜜素 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85700 D-葡萄糖酸溶液 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85701 甲基-α-D-吡喃半乳糖苷 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85702 叶绿素铜钠盐 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85703 叶绿素B ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85704 叶绿素A ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85705 结晶紫 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85706 瑞氏色素 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85707 姬姆萨氏色素 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85708 苏木色精 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85709 黑色素(水溶) ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85710 黑色素(醇溶) ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85711 变色素2R ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85712 变色酸 ,规格: 1公斤 ,保存条件: RT
A85713 变色酸二钠盐 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85714 派洛宁Y ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85715 派洛宁B ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85716 地衣红 ,规格: 1克 ,保存条件: RT,避光
A85717 藏红T ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A85718 酚红 ,规格: 25克 ,保存条件: RT,避光
A85719 苯酚红钠盐 ,规格: 100克 ,保存条件: RT,避光
A85720 胭脂红 ,规格: 1克 ,保存条件: RT,避光
A85721 固红TR ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A85722 固红片剂 ,规格: 25克 ,保存条件: RT,避光
A85723 固红RC ,规格: 100克 ,保存条件: RT,避光
A85724 固红GG盐 ,规格: 1克 ,保存条件: RT,避光
A85725 碱性品红 ,规格: 500毫克 ,保存条件: RT,避光
A85726 酸性品红 ,规格: 1克 ,保存条件: RT,避光
A85727 红四氮唑 ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A85728 四氮唑紫 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85729 四氮唑蓝 ,规格: 1公斤 ,保存条件: 2~8℃
A85730 中性红 ,规格: 50克 ,保存条件: 2~8℃
A85731 甲基红 ,规格: 250克 ,人神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞保存条件: 2~8℃
A85732 甲基红钠 ,规格: 1公斤 ,保存条件: 2~8℃
A85733 刚果红 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85734 刚果红试纸 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85735 虎红 ,规格: 1公斤 ,保存条件: 2~8℃
A85736 虎红钠盐 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85737 天狼星红BB ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85738 曙红B ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85739 曙红Y(水溶) ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85740 曙红Y(醇溶) ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85741 油红O ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃