人白血病细胞，K562细胞

人白血病细胞，K562细胞 K562 悬浮淋巴母细胞

（1）细胞背景

该细胞是由Lozzio从一名53岁的慢性髓细胞性白血病急变期的女性患者的胸水中分离建立的。该细胞曾被认为来源于粒系，处于高度未分化阶段；Anderson等人作了细胞膜特性的研究后，认为该细胞是红白血病细胞系。该细胞是对自然杀伤细胞高度敏感的体外靶标，故而被广泛应用于这方面的研究。K562的原始细胞是一种具有多向分化潜能的造血系统的恶性肿瘤细胞，能自发分化为红系、粒系和单核系的可辨识的祖细胞。该细胞表达CD7（25％）。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：悬浮

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人白血病细胞，K562细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人白血病细胞，K562细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A85459 3-吲哚丙酸钾 ，规格： 5克 ，保存条件： 2～8℃

A85460 3-吲哚丁酸 ，规格： 25克 ，保存条件： 2～8℃

A85461 3-吲哚丁酸钾 ，规格： 10克 ，保存条件： RT

A85462 α-萘乙酸 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85463 α-萘乙酸钾 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85464 β-萘乙酸 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85465 多效唑 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A85466 马来酰肼 ，规格： 1克 ，保存条件： 2～8℃

A85467 马来酰肼钾盐 ，规格： 5克 ，保存条件： 2～8℃

A85468 二苯基羰酰二肼 ，规格： 25克 ，保存条件： 2～8℃

A85469 甜菜碱盐酸盐 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85470 无水甜菜碱 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85471 秋水仙铵 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A85472 吲哚美辛 ，规格： 1克 ，保存条件： RT，避光

A85473 环磷酸腺苷 ，规格： 5克 ，保存条件： RT，避光

A85474 环磷酸腺苷钠盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85475 5′-腺苷一磷酸 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85476 5-腺苷一磷酸二钠盐 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85477 5-腺苷二磷酸二钠盐 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A85478 5-腺苷三磷酸二钠盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85479 胞嘧啶 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85480 胞苷 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85481 5′- 胞苷单磷酸 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A85482 5-胞苷一磷酸二钠盐 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85483 5-胞苷二磷酸单钠盐 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85484 5-胞苷二磷酸二钠盐 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A85485 5-胞苷三磷酸二钠盐 ，规格： 1克 ，保存条件： RT

A85486 5-胞苷三磷酸三钠盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85487 5-胞苷三磷酸四钠盐溶液 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85488 5-尿苷一磷酸 ，规格： 1克 ，保存条件： RT

A85489 5-尿苷一磷酸二钠盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85490 5-尿苷二磷酸 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85491 5-尿苷二磷酸二钠盐 ，规格： 1克 ，保存条件： RT

A85492 5-尿苷三磷酸三钠盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85493 5-尿苷三磷酸四钠盐 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85494 尿苷二磷酸葡糖醛酸 ，规格： 1克 ，保存条件： RT

A85495 尿苷二磷酸葡萄糖 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85496 5-鸟苷一磷酸二钠盐 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85497 5-鸟苷二磷酸二钠盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85498 5-鸟苷三磷酸二钠盐 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85499 5-鸟苷三磷酸三钠盐 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85500 鸟苷-3'，5'-环磷酸钠盐 ，规格： 250毫克 ，保存条件： RT

A85501 5-肌苷一磷酸二钠盐 ，规格： 1克 ，保存条件： RT

A85502 5-肌苷二磷酸三钠盐 ，规格： 50克 ，保存条件： RT

A85503 5-肌苷三磷酸三钠盐 ，规格： 250克 ，保存条件： RT

A85504 三磷酸脱氧核糖核苷酸 ，规格： 50克 ，保存条件： RT

A85505 2′-脱氧腺苷 ，规格： 250克 ，保存条件： RT

A85506 2′-脱氧腺苷-5′-单磷酸 ，规格： 25克 ，人白血病细胞，K562细胞保存条件： RT

A85507 2′-脱氧腺苷-5′-单磷酸二钠 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85508 2′-脱氧腺苷-5′-二磷酸三钠盐 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85509 2′-脱氧腺苷-5′-二磷酸二钠盐 ，规格： 100克 ，保存条件： RT

A85510 2′-脱氧腺苷-5′-三磷酸二钠盐 ，规格： 1公斤 ，保存条件： RT

A85511 2′-脱氧腺苷-5′-三磷酸三钠盐 ，规格： 5克 ，保存条件： RT

A85512 2′-脱氧胞苷 ，规格： 25克 ，保存条件： RT

A85513 2′-脱氧胞苷盐酸 ，规格： 100克 ，保存条件： RT