人白血病细胞,HL-60细胞 HL-60 悬浮原粒细胞
(1)细胞背景
该细胞由Collins SJ从一位患有急性早幼粒细胞性白血病的36岁白人女性的外周血中分离建立;可自发分化,或在丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放线菌素D和视黄酸的刺激下发生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。该细胞具有吞噬活性和趋化反应,癌基因myc阳性,表达补体受体和FcR(来源于ATCC)。
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:悬浮
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人白血病细胞,HL-60细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人白血病细胞,HL-60细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A85393 青霉素钠 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85394 青霉素链霉素溶液 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85395 青霉素链霉素两性霉素B溶液 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85396 青霉素链霉素新霉素溶液 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85397 盐酸土霉素 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85398 盐酸洛美沙星 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85399 卡莫司汀 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85400 莫能菌酸钠 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85401 替卡西林钠 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85402 链脲佐菌素 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85403 头孢曲松钠 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85404 头孢唑啉钠 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85405 嘌呤霉素盐酸盐 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85406 盐酸万古霉素 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85407 去甲基盐酸万古霉素 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85408 盐酸壮观霉素 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85409 乙酰水杨酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85410 咪康唑 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85411 盐酸强力霉素 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85412 苯唑西林钠 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85413 哌拉西林钠 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85414 萘啶酮酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85415 依托红霉素 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85416 双丙氨膦 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85417 5-氟尿嘧啶 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85418 光神霉素 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85419 霉酚酸 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85420 腐草霉素 ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃
A85421 井冈霉素 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85422 益康唑 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85423 恩诺沙星 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85424 氟苯尼考 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85425 磺铵甲基嘧啶 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85426 磺铵二甲基嘧啶 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85427 磺铵嘧啶 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85428 磺铵嘧啶钠 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85429 5-氟胞嘧啶 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85430 新生霉素 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85431 匹马霉素 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85432 磺铵甲噁唑 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85433 赤霉素GA3 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A85434 赤霉素GA4+7 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85435 玉米素 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85436 反玉米素 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85437 脱落酸 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85438 腺嘌呤盐酸盐 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85439 磷酸腺嘌呤 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85440 矮壮素 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85441 24-表油菜素内酯 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85442 28-表高油菜素内酯 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85443 6-苄氨基嘌呤 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85444 6-糠氨基嘌呤 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85445 6-氯嘌呤 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85446 6-巯基嘌呤一水合物 ,规格: 10克 ,保存条件: 2~8℃
A85447 嘌呤 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃
A85448 鸟嘌呤盐酸盐 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃
A85449 8-氮鸟嘌呤 ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃
A85450 氨基蝶呤 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃
A85451 氨甲蝶呤 ,规格: 25克 ,人白血病细胞,HL-60细胞保存条件: 2~8℃
A85452 N6-异戊烯基腺嘌呤 ,规格: 1克 ,保存条件: 保存:-20℃
A85453 N6-苯甲酰基腺嘌呤 ,规格: 5克 ,保存条件: 保存:-20℃
A85454 丁酰肼 ,规格: 25克 ,保存条件: 保存:-20℃
A85455 乙烯利 ,规格: 5克 ,保存条件: 保存:-20℃
A85456 3-吲哚乙酸 ,规格: 25克 ,保存条件: 保存:-20℃
A85457 3-吲哚乙酸钠 ,规格: 100克 ,保存条件: 保存:-20℃
A85458 3-吲哚丙酸 ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃