人骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞 U-2 OS 贴壁上皮细胞
(1)细胞背景
该细胞系(原名2T)是由Ponten J和Saksela E在1964年从一名15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤中分离建立的。与WI-38共培养或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的补体结合试验(CF法)未检测到病毒。该细胞表达胰岛素样生长因子Ⅰ、Ⅱ(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)受体和骨肉瘤衍生生长因子(ODGF)。
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A85008 D-缬氨酸甲酯盐酸盐 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A85009 β-丙氨酸甲酯盐酸盐 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85010 L-天冬氨酸二甲酯盐酸盐 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85011 L-天冬氨酸-β-甲酯盐酸盐 ,规格: 1公斤 ,保存条件: RT
A85012 L-组氨酸甲酯二盐酸盐 ,规格: 1克 ,保存条件: RT,避光
A85013 DL-丙氨酸甲酯盐酸盐 ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A85014 DL-丝氨酸甲酯盐酸盐 ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8°C
A85015 L-半胱氨酸乙酯盐酸盐 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8°C
A85016 DL-丙氨酸乙酯盐酸盐 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8°C
A85017 D-苯甘氨酸乙酯盐酸盐 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8°C
A85018 L-精氨酸甲酯二盐酸盐 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8°C
A85019 L-酪氨酸叔丁酯 ,规格: 500克 ,保存条件: 2~8°C
A85020 N-乙酰-L-色氨酸 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85021 N-乙酰-L-丙氨酸 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85022 N-乙酰-D-色氨酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85023 N-乙酰-D-亮氨酸 ,规格: 1公斤 ,保存条件: RT
A85024 N-乙酰-L-脯氨酸 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85025 N-乙酰-D-脯氨酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85026 芴甲氧羰酰琥珀酰亚铵 ,规格: 1公斤 ,保存条件: RT
A85027 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85028 CBZ-L-缬氨酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85029 D-异亮氨酸 ,规格: 1公斤 ,保存条件: RT
A85030 β-丙氨酸乙酯盐酸盐 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85031 L-丙氨酰铵盐酸盐 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85032 D-天冬酰铵一水物 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85033 D-谷氨酰铵 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85034 L-脯氨酰铵 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85035 BOC-L-苯丙氨醇 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85036 BOC-L-丙氨醇 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85037 BOC-L-脯氨醇 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85038 L-别苏氨酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85039 肌氨酸乙酯盐酸盐 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85040 肌氨酸甲酯盐酸盐 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85041 N-乙酰-L-亮氨酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85042 N-乙酰-L-谷氨酸 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A85043 N-乙酰-L-苯丙氨酸 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85044 褪黑素 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A85045 L-亮氨醇 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85046 L-苯丙氨醇 ,规格: 100克 ,人骨肉瘤细胞,U-2 OS细胞保存条件: RT
A85047 D-苯甘氨醇 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85048 D-脯氨醇 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85049 L-蛋氨醇 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A85050 L-苏氨醇 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85051 L-缬氨醇 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85052 L-异亮氨醇 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A85053 D-色氨醇 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A85054 BOC-L-天冬酰铵 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A85055 BOC-D-天冬酰铵 ,规格: 10克 ,保存条件: RT