人黑色素瘤细胞，M14细胞

人黑色素瘤细胞，M14细胞 M14 贴壁上皮细胞

（1）细胞背景

人黑色素瘤细胞；贴壁生长；可用于黑色素瘤的研究。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人黑色素瘤细胞，M14细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人黑色素瘤细胞，M14细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A84701 间(二)氮苯 ，英文名或英文缩写： Pyrimidine ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A84702 3-氨基-1,2-丙二醇 ，英文名或英文缩写： 3-Amino-1,2-propanediol ，级别： CP ，规格： 5克

A84703 2-羟基苯甲醇 ，英文名或英文缩写： Salicyl alcohol ，级别： 3N ，规格： 25克

A84704 重水 ，英文名或英文缩写： Deuterium oxide ，级别： AR，99.9% ，规格： 100毫克

A84705 檞片素 ，英文名或英文缩写： Luteolin ，级别： AR，98% ，规格： 500毫克

A84706 二乙基偶氮二羧酸酯 ，英文名或英文缩写： DEAD ，级别： AR，98% ，规格： 1克

A84707 二甲膦酸 ，英文名或英文缩写： Dimethylphosphinic acid ，级别： AR，98% ，规格： 500毫克

A84708 二乙酰基甲烷 ，英文名或英文缩写： 2,4-Pentanedione ，级别： BR ，规格： 2克

A84709 无水硫化钾 ，英文名或英文缩写： Potassium Sulfide ，级别： BR ，规格： 10克

A84710 1-甲基-4-异丙基环已酮-[3] ，英文名或英文缩写： Menthone ，级别： BR ，规格： 25克

A84711 3-羟基-(3β)-乌索12-烯-28-酸 ，英文名或英文缩写： Ursolic acid ，级别： BR，85% ，规格： 5克

A84712 (9S)-6'-甲氧基辛可宁-9-醇 ，英文名或英文缩写： Cinchonidine ，级别： CP ，规格： 25克

A84713 α-氰基-4-羟基肉桂酸 ，英文名或英文缩写： ACCA ，级别： AR，99% ，规格： 100克

A84714 1-(2’-噻吩甲酰)-3,3,3-三氟丙酮 ，英文名或英文缩写： TTA ，级别： BR ，规格： 5克

A84715 12-氨基十二烷酸 ，英文名或英文缩写： 12-Aminolauric acid ，级别： AR，99% ，规格： 25克

A84716 邻氨基苯硫酚 ，英文名或英文缩写： 2-Aminothiophenol ，级别： BR，97% ，规格： 100克

A84717 2-羧甲基-3-异丙烯基脯氨酸 ，英文名或英文缩写： Kainic acid monohydrate ，级别： BR，90% ，规格： 500克

A84718 氨乙基哌嗪 ，英文名或英文缩写： AEP ，级别： BR，98% ，规格： 25毫克

A84719 尿酸二氢钠 ，英文名或英文缩写： Uric acid sodium salt ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A84720 二甲基马来酸酐 ，英文名或英文缩写： 2,3-Dimethylmaleic anhydride ，级别： AR，99% ，规格： 10克

A84721 1,3,3-三甲基-2-氧杂双环[2.2.2]辛烷 ，英文名或英文缩写： Cineole ，级别： 2N ，规格： 100克

A84722 2,4-二羟-6-甲基苯甲酸 ，英文名或英文缩写： 2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid ，级别： AR，99% ，规格： 500克

A84723 3,6-二甲基-1,4-二氧杂环己烷-2,5-二酮 ，英文名或英文缩写： DL-Lactide ，级别： CP，99% ，规格： 250毫克

A84724 佐旋乳酸 ，英文名或英文缩写： L-Lactide ，级别： CP，70% ，规格： 1克

A84725 1,4-氧氮杂环已烷 ，英文名或英文缩写： Morpholine ，级别： 2N，200-300目 ，规格： 25毫克

A84726 β-萘黄酮 ，英文名或英文缩写： β-Naphthoflavone ，级别： 超纯，99% ，规格： 100毫克

A84727 (N5-2,4-环戊二烯-1-基)铁 ，英文名或英文缩写： Bis(cyclopentadienyl)tetracarbonyl Diiron ，级别： 天然，70% ，规格： 5克

A84728 5-氮杂胞嘧啶核苷 ，英文名或英文缩写： 5-Azacytidine ，级别： 超纯，99% ，规格： 25克

A84729 聚乙烯二铵 ，英文名或英文缩写： PEG-diamine ，级别： BR，90% ，规格： 10克

A84730 4-氨基苯甲酸甲酯 ，英文名或英文缩写： Methyl 4-aminobenzoate ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A84731 3,4-二甲氧基苯甲醇 ，英文名或英文缩写： Veratryl alcohol ，级别： AR，99% ，规格： 25克

A84732 聚(L-乳酸) ，英文名或英文缩写： PLA ，级别： BR，99% ，规格： 1克

A84733 N,N’-1,2-乙烷基双[N-(羧甲基)-甘氨酸]三钠盐 ，英文名或英文缩写： EDTA，3Na ，级别： GR，99.5% ，规格： 5克

A84734 1H,3H-萘并[1,8-CD]吡喃-1,3-二酮 ，英文名或英文缩写： 1,8-Naphthalic anhydride ，级别： AR，90% ，规格： 25克

A84735 β-甲基吲哚 ，英文名或英文缩写： 3-Methylindole ，级别： HPLC级 ，规格： 25克

A84736 甲基硫醇钠 ，英文名或英文缩写： Sodium thiomethoxide ，级别： 农残级 ，规格： 100克

A84737 3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 ，英文名或英文缩写： 3-AcDON ，级别： CP ，规格： 1公斤

A84738 薯蓣皂甙 ，英文名或英文缩写： Dioscin ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A84739 一水合盐酸-9-氨基吖啶 ，英文名或英文缩写： 9-Aminoacridine hydrochloride monohydrate ，级别： BR，99% ，规格： 100克

A84740 吡啶-3-乙酸盐酸盐 ，英文名或英文缩写： 3-Pyridylacetic acid hydrochloride ，级别： BR，80% ，规格： 1公斤

A84741 苄眯 ，英文名或英文缩写： Benzamidine ，人黑色素瘤细胞，M14细胞级别： BR，98% ，规格： 100克

A84742 伊色林 ，英文名或英文缩写： Eserine ，级别： BR，98% ，规格： 500克

A84743 壬酰-4-羟-3-甲氧基苄铵 ，英文名或英文缩写： Nonivamide ，级别： AR，98% ，规格： 1克

A84744 氧化苦参碱 ，英文名或英文缩写： Ammothamnine ，级别： BR，98% ，规格： 5克

A84745 2-氧代丁酸钠 ，英文名或英文缩写： Sodium 2-oxobutyrate ，级别： BR，97% ，规格： 25克

A84746 敌杀死 ，英文名或英文缩写： Deltamethrin ，级别： BR，96% ，规格： 1克

A84747 3-苯基酚 ，英文名或英文缩写： 3-Phenylphenol ，级别： BR，90% ，规格： 10克