人表皮癌细胞，A-431细胞

人表皮癌细胞，A-431细胞 A-431 贴壁上皮细胞

（1）细胞背景

该细胞源自一位患有皮肤鳞状细胞癌的85岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞在免疫抑制小鼠体内可成瘤，在琼脂上培养可形成克隆；是一个超三倍体人细胞株。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人表皮癌细胞，A-431细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人表皮癌细胞，A-431细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A84348 2,4-二羟基-6-甲基-4′-硝基偶氮苯 ，英文名或英文缩写： Beryllon I ，级别： CP，44-48% ，规格： 25克

A84349 2-(8-羟基萘-3,6-二磺酸钠偶氮)-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸钠 ，英文名或英文缩写： Beryllon II ，级别： SP，99.5% ，规格： 25克

A84350 黑铅 ，英文名或英文缩写： Graphite powder ，级别： AR，71% ，规格： 25克

A84351 交替砂 ，英文名或英文缩写： Permutit ，级别： CP，14.5% ，规格： 100克

A84352 苏打石灰 ，英文名或英文缩写： Soda lime ，级别： AR，99% ，规格： 30毫升

A84353 石英玻璃 ，英文名或英文缩写： Sea sand ，级别： AR，99% ，规格： 25克

A84354 脂质体2000 ，英文名或英文缩写： Lipofectamine 2000 Transfection Reagent ，级别： AR，99% ，规格： 5克

A84355 弱金鸡钠碱 ，英文名或英文缩写： Cinchonine ，级别： AR ，规格： 25克

A84356 银试剂 ，英文名或英文缩写： Rhodanine ，级别： AR ，规格： 5克

A84357 乙二酸二乙酯 ，英文名或英文缩写： Diethyl oxalate ，级别： AR，99.8% ，规格： 25克

A84358 碘/精碘/碘粒/Iodine ，英文名或英文缩写： Iodine ，级别： AR，99% ，规格： 20毫升

A84359 朱砂 ，英文名或英文缩写： Chinese red ，级别： CP ，规格： 50毫升

A84360 膨润土 ，英文名或英文缩写： Bentonite ，级别： BR，99% ，规格： 5克

A84361 碳化硼 ，英文名或英文缩写： Boron carbide ，级别： 特纯，95% ，规格： 25克

A84362 氧化硼 ，英文名或英文缩写： Boron oxide ，级别： BR，96% ，规格： 100毫升

A84363 纤维玻璃 ，英文名或英文缩写： Glass Fiber ，级别： BR，99% ，规格： 25克

A84364 阿的平盐酸盐 ，英文名或英文缩写： Quinacrine dihydrochloride ，级别： CP ，规格： 100克

A84365 2-芴铵 ，英文名或英文缩写： 2-Aminofluorene ，级别： CP ，规格： 25克

A84366 2-嘧啶基铵 ，英文名或英文缩写： 2-Aminopyrimidine ，级别： CP，97% ，规格： 500克

A84367 2,4-二羟基-5-硝基嘧啶 ，英文名或英文缩写： 5-Nitrouracil ，级别： BR，97% ，规格： 25克

A84368 安替吡啉 ，英文名或英文缩写： Antipyrine ，级别： BR，98% ，规格： 500克

A84369 白凡士林 ，英文名或英文缩写： Vaselineoil ，级别： AR，98.5% ，规格： 25克

A84370 凡士林 ，英文名或英文缩写： Vaselineoil ，级别： AR，98% ，规格： 10克

A84371 失水甘露糖醇单油酸酯 ，英文名或英文缩写： Arlacel A ，级别： BR，97% ，规格： 10克

A84372 苯偶酰 ，英文名或英文缩写： Benzil ，级别： BR，90% ，规格： 25克

A84373 1,2-苯并菲 ，英文名或英文缩写： Chrysene ，级别： BR，97% ，规格： 100克

A84374 二苯基乙炔 ，英文名或英文缩写： Diphenylacetylene ，级别： CP ，规格： 5克

A84375 优巴拉尔 ，英文名或英文缩写： Euparal ，级别： AR，95% ，规格： 25克

A84376 茚满 ，英文名或英文缩写： Indan ，级别： AR，99.8% ，规格： 1克

A84377 氮茚 ，英文名或英文缩写： Indole ，级别： 3N，0.15-0.25㎜ ，规格： 5克

A84378 油醇 ，英文名或英文缩写： Oleyl alcohol ，级别： SP ，规格： 25克

A84379 邻羟甲基苯甲酸内酯 ，英文名或英文缩写： Phthalide ，级别： CP，98% ，规格： 100克

A84380 （-）-薄荷醇 ，英文名或英文缩写： Menthol ，级别： CP，70% ，规格： 25克

A84381 茴香樟脑 ，英文名或英文缩写： trans-Anethole ，级别： CP，98% ，规格： 10克

A84382 弗氏完全佐剂 ，英文名或英文缩写： FCA ，级别： CP，99% ，规格： 5克

A84383 弗氏不完全佐剂 ，英文名或英文缩写： FICA ，级别： CP，19-25% ，规格： 25克

A84384 (＋)-章肉碱 ，英文名或英文缩写： (+)-Octopine ，级别： CP，43-47% ，规格： 100克

A84385 二羟甲基丁酸 ，英文名或英文缩写： DMBA ，级别： AR，99% ，规格： 10克

A84386 二苯基卡巴腙 ，英文名或英文缩写： Diphenylcarbazone ，级别： CP，13.5-15.5% ，规格： 25克

A84387 3-羟基胆基酸 ，英文名或英文缩写： Lithocholic acid ，级别： 荧光纯，95% ，规格： 10克

A84388 5-溴代嘧啶 ，英文名或英文缩写： 5-Bromouracil ，级别： 电子真空涂漠 ，规格： 25克

A84389 第三丁氧基钠 ，英文名或英文缩写： NatB ，人表皮癌细胞，A-431细胞级别： BR，70% ，规格： 25克

A84390 第三丁氧基钾 ，英文名或英文缩写： KtB ，级别： BR，98% ，规格： 100克

A84391 二乙基亚磷酸酯 ，英文名或英文缩写： Diethyl phosphite ，级别： BR，50%水溶液 ，规格： 25克

A84392 1，1，1-三乙氧基丙烷 ，英文名或英文缩写： Triethyl orthopropionate ，级别： GR，99.5% ，规格： 25克

A84393 佐旋1,2-丙二醇 ，英文名或英文缩写： (R)-(-)-1,2-Propanediol ，级别： AR，99% ，规格： 25克

A84394 (S)-1,2-丙二醇 ，英文名或英文缩写： (S)-(+)-1,2-Propanediol ，级别： AR，99% ，规格： 10克