小鼠单核巨噬细胞白血病，RAW 264.7细胞

小鼠单核巨噬细胞白血病，RAW 264.7细胞 RAW 264.7 贴壁巨噬细胞

（1）细胞背景

此细胞株源自BALB/c小鼠由Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤。可产生溶菌酶；sIg-, Ia-，Thy-1.2-。为检测到病毒颗粒的分泌，XC斑点形成试验阴性。该细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖；可以经抗体依赖分裂绵羊红细胞与肿瘤靶细胞；LPS或PPD处理2天可诱导分裂红细胞，但对肿瘤靶细胞无作用。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 小鼠

（4）培养条件

1）培养基：RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）小鼠单核巨噬细胞白血病，RAW 264.7细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到小鼠单核巨噬细胞白血病，RAW 264.7细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A82967 吖啶橙 ，英文名或英文缩写： Acridine orange ，级别： AR，99% ，规格： 1克

A82968 吖啶黄素 ，英文名或英文缩写： Acriflavine ，级别： AR，99% ，规格： 100毫克

A82969 盐酸吖啶 ，英文名或英文缩写： Acridine hydrochloride ，级别： AR，99% ，规格： 1克

A82970 盐酸吖啶黄 ，英文名或英文缩写： Acriflavine hydrochloride ，级别： BR，99% ，规格： 25克

A82971 橙黄Ⅲ ，英文名或英文缩写： Methyl orange ，级别： 特纯，98% ，规格： 100克

A82972 甲基青莲 ，英文名或英文缩写： Methyl violet ，级别： BR，50% ，规格： 500克

A82973 甲基青莲6B ，英文名或英文缩写： Methyl violet 6B ，级别： BR，98% ，规格： 1克

A82974 溴甲酚红 ，英文名或英文缩写： BCP ，级别： BR，99% ，规格： 5克

A82975 溴甲酚红钠 ，英文名或英文缩写： BCP，Na ，级别： 超纯，99% ，规格： 10毫升

A82976 固深红GBC ，英文名或英文缩写： Fast Garnet GBC salt ，级别： 超纯，98% ，规格： 5克

A82977 固黑K ，英文名或英文缩写： Fast Black K Salt ，级别： 超纯，99% ，规格： 25克

A82978 黑色基B ，英文名或英文缩写： Fast Black B Salt ，级别： 高纯，98% ，规格： 100克

A82979 坚牢蓝BB盐 ，英文名或英文缩写： Fast blue BB salt ，级别： 高纯，98% ，规格： 1公斤

A82980 重氮坚牢蓝 ，英文名或英文缩写： Fast blue RR salt ，级别： BR，98% ，规格： 20毫升

A82981 萘酚蓝黑 ，英文名或英文缩写： Amino black 10B ，级别： 超纯，98% ，规格： 10毫升

A82982 苏旦IV ，英文名或英文缩写： Sudan Ⅳ ，级别： BR ，规格： 5克

A82983 三号苏丹红 ，英文名或英文缩写： Sudan Ⅲ ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A82984 溶剂橙7 ，英文名或英文缩写： Sudan Ⅱ ，级别： BR，98% ，规格： 100克

A82985 苏旦I ，英文名或英文缩写： Sudan I ，级别： BR，99% ，规格： 1公斤

A82986 苏旦黑B ，英文名或英文缩写： Sudan black B ，级别： BR，98% ，规格： 5克

A82987 溶剂红19 ，英文名或英文缩写： Sudan red 7B ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A82988 赫斯特荧光燃料33258 ，英文名或英文缩写： BBIH ，级别： BR，98% ，规格： 100克

A82989 赫斯特荧光燃料33342 ，英文名或英文缩写： Hoechst 33342 ，级别： BR，99% ，规格： 1公斤

A82990 荧光红 ，英文名或英文缩写： Fluorescein ，级别： BR，95% ，规格： 1克

A82991 萤光素钠 ，英文名或英文缩写： Fluorescein disodium salt ，级别： BR ，规格： 10克

A82992 DAPI染色液 ，英文名或英文缩写： DAPI ，级别： BR，98% ，规格： 100克

A82993 酚 ，英文名或英文缩写： Phenolphthalein ，级别： BR，95% ，规格： 10克

A82994 酚酞试纸 ，英文名或英文缩写： Phenolphthalein test paper ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A82995 酚酞-3,3’-双-(亚甲氨基二乙酸) ，英文名或英文缩写： Phenolphthalexone ，级别： BR，95% ，规格： 250克

A82996 百里香酚 ，英文名或英文缩写： Thymol ，级别： BR，95% ，规格： 30毫升

A82997 若丹明123 ，英文名或英文缩写： Rhodamine 123 ，级别： BR，95% ，规格： 1克

A82998 玫瑰红B ，英文名或英文缩写： Rhodamine B ，级别： BR，98% ，规格： 1克

A82999 TMB游离酸 ，英文名或英文缩写： TMB ，级别： BR，98% ，规格： 5毫克

A83000 TMB游离酸溶液 ，英文名或英文缩写： 3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid-1 component ，级别： BR，98% ，规格： 5克

A83001 TMB底物溶液 ，英文名或英文缩写： 3,3,5,5-Tetramethyl benzidine solution liquid membrane substrate ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A83002 TMB盐酸盐 ，英文名或英文缩写： TMB?2HC1 ，级别： BR，90% ，规格： 100克

A83003 3,3,5,5-四甲基联苯铵-US ，英文名或英文缩写： TMB-US(ultra sensitive) solution ，级别： BR，98% ，规格： 1公斤

A83004 3,3,5,5-四甲基联苯铵-Stop ，英文名或英文缩写： TMB-Stop solution ，级别： BR，98% ，规格： 10毫升

A83005 二乙酸荧光素 ，英文名或英文缩写： FDA ，级别： BR，98% ，规格： 100克

A83006 2ˊ，7ˊ-二氯荧光素 ，英文名或英文缩写： Fluorescein dichloride ，级别： BR，油溶，10% ，规格： 1公斤

A83007 3ˊ,6ˊ-二氯荧光橙红 ，英文名或英文缩写： 3',6'-Dichlorofluoran ，级别： BR，水溶，10% ，规格： 10毫升

A83008 硒试剂 ，英文名或英文缩写： DAB ，级别： BR，90% ，规格： 25克

A83009 3,3',4,4'-联苯四铵 ，英文名或英文缩写： DAB ，级别： BR，85% ，规格： 100克

A83010 DAB片剂 ，英文名或英文缩写： DAB substrate tablets ，级别： AR ，规格： 1公斤

A83011 溴化乙啶 ，英文名或英文缩写： EB ，级别： 高纯 ，规格： 10毫升

A83012 碘化丙锭 ，英文名或英文缩写： PI ，级别： AR ，规格： 10毫升

A83013 N-乙基-N-（2-羟基-3-磺丙基）-3,5-二甲氧基苯铵钠盐 ，英文名或英文缩写： DAOS ，级别： BS ，规格： 10毫升

A83014 对硝基苯磷酸二钠 ，英文名或英文缩写： 4-NPP ，级别： BS ，规格： 25克

A83015 SYBRGREENⅠ核苷酸胶体染料 ，英文名或英文缩写： SYBR Green 1 ，小鼠单核巨噬细胞白血病，RAW 264.7细胞级别： BS ，规格： 100克

A83016 宝石红蛋白染色试剂 ，英文名或英文缩写： SYPRO red protein stain ，级别： 高纯，95% ，规格： 500克

A83017 630NM蛋白染色试剂 ，英文名或英文缩写： 630 protein stain ，级别： BS ，规格： 25克