人血管内皮细胞,VE细胞 VE 贴壁上皮细胞
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人血管内皮细胞,VE细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人血管内皮细胞,VE细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A82923 溴酚兰钠 ,英文名或英文缩写: Bromophenol blue sodium salt ,级别: CP,98% ,规格: 1升
A82924 苯铵兰水溶 ,英文名或英文缩写: Aniline blue water soluble ,级别: GR,99.5% ,规格: 25毫克
A82925 甲苯铵兰O ,英文名或英文缩写: Toluidine blue O ,级别: AR,99.0% ,规格: 25毫克
A82926 甲苯铵兰 ,英文名或英文缩写: Toluidine bule ,级别: BR,98% ,规格: 100毫克
A82927 溴麝香草酚蓝 ,英文名或英文缩写: BTB ,级别: BR,98% ,规格: 1克
A82928 溴百里香酚蓝钠 ,英文名或英文缩写: Bromothymol blue sodium salt ,级别: 高纯,98% ,规格: 1克
A82929 考马斯亮兰G250 ,英文名或英文缩写: Coomassie brilliant blue G250 ,级别: BR,98% ,规格: 25克
A82930 考马斯亮兰R250 ,英文名或英文缩写: Coomassie brilliant blue R250 ,级别: 超纯,99% ,规格: 100克
A82931 3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝 ,英文名或英文缩写: MTT ,级别: 超纯,99% ,规格: 500克
A82932 台盼蓝 ,英文名或英文缩写: Trypan blue ,级别: 超纯,99% ,规格: 5克
A82933 酸性蓝147 ,英文名或英文缩写: Xylene cyanole FF ,级别: BR,99% ,规格: 25克
A82934 酸性蓝1 ,英文名或英文缩写: Xylene blue ,级别: 特纯,98% ,规格: 100克
A82935 二甲苯花黄FF ,英文名或英文缩写: Xylene cyanole FF ,级别: 高纯,98% ,规格: 500克
A82936 甲基百里香酚蓝 ,英文名或英文缩写: MTB ,级别: 高纯,99% ,规格: 350ku
A82937 百里香酚酞 ,英文名或英文缩写: Thymolphthalein ,级别: BR,80% ,规格: 1750ku
A82938 百里香酚酞络合指示剂 ,英文名或英文缩写: TPC ,级别: BR,98% ,规格: 1克
A82939 茜素氨羧络合剂 ,英文名或英文缩写: Alizarin complexon ,级别: BR,97.5% ,规格: 5克
A82940 对甲苯铵蓝钠盐 ,英文名或英文缩写: BCIP, 2Na ,级别: AR,60% ,规格: 25克
A82941 对甲苯铵蓝 ,英文名或英文缩写: BCIP ,级别: CP,98.5% ,规格: 1毫克
A82942 BCIP ,英文名或英文缩写: INT Substrate solution ,级别: CP,98% ,规格: 5毫克
A82943 阿利新蓝8GX ,英文名或英文缩写: Alcian Blue 8GX ,级别: USP级,98% ,规格: 10克
A82944 荧铵 ,英文名或英文缩写: Fluorescamine ,级别: USP级,98% ,规格: 25克
A82945 甲酚蓝 ,英文名或英文缩写: Brilliant cresyl bulue ,级别: AR,99% ,规格: 100克
A82946 灿烂绿 ,英文名或英文缩写: Brilliant green ,级别: CP,98% ,规格: 500克
A82947 酸性绿5 ,英文名或英文缩写: Light green SF yellowish ,级别: AR,40-44.5% ,规格: 5克
A82948 酸性绿O ,英文名或英文缩写: Naphthol green B ,级别: AR,98% ,规格: 25克
A82949 坚牢绿FCF ,英文名或英文缩写: Fast green FCF ,级别: BR,98% ,规格: 100克
A82950 溴甲酚蓝 ,英文名或英文缩写: Bromocresol green ,级别: BR,95% ,规格: 5克
A82951 溴甲酚蓝钠 ,英文名或英文缩写: Bromocresol green sodium salt ,级别: BR,90% ,规格: 25克
A82952 溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液 ,英文名或英文缩写: Methyl Red mixed indicator solution ,级别: BR,98 ,规格: 25克
A82953 溴甲酚绿-甲基红指示剂芬枕 ,英文名或英文缩写: Methyl Red mixed indicator powder ,级别: BR,95% ,规格: 100克
A82954 碱性绿5 ,英文名或英文缩写: Methylene green ,级别: BR,98% ,规格: 500克
A82955 甲基绿 ,英文名或英文缩写: Methyl Green ,级别: BR,98% ,规格: 25克
A82956 真那氏绿 ,英文名或英文缩写: Januˊs green B ,级别: 超纯,99% ,规格: 100克
A82957 刃天青钠 ,英文名或英文缩写: Resazurin sodium salt ,级别: 高纯,99% ,规格: 500克
A82958 天青A ,英文名或英文缩写: Azure II ,级别: 高纯,99% ,规格: 5克
A82959 天青B ,英文名或英文缩写: Azure B ,级别: 高纯,90% ,规格: 25克
A82960 Ⅱ号天青伊红 ,英文名或英文缩写: Azure II eosin ,级别: 生物技术级,98% ,规格: 100毫克
A82961 金橙G ,英文名或英文缩写: Orange G6 ,级别: 超纯,98% ,规格: 1克
A82962 四号橙 ,英文名或英文缩写: Orange IV ,人血管内皮细胞,VE细胞级别: 超纯,99% ,规格: 5克
A82963 酸性橙II ,英文名或英文缩写: Orange Ⅱ ,级别: BR,99% ,规格: 25毫克
A82964 金橙I ,英文名或英文缩写: Orange Ⅰ ,级别: BR,80% ,规格: 10毫克
A82965 金丝雀黄O ,英文名或英文缩写: Auramine O ,级别: CP,99.5% ,规格: 100毫克
A82966 俾士麦棕Y ,英文名或英文缩写: Besmarck brown Y ,级别: BR,93% ,规格: 100毫克