人正常皮肤细胞，HaCaT细胞

人正常皮肤细胞，HaCaT细胞 HaCaT 贴壁上皮细胞

（1）细胞背景

该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤，角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人正常皮肤细胞，HaCaT细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人正常皮肤细胞，HaCaT细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A82783 枸椽酸铁 ，英文名或英文缩写： Ferric citrate ，级别： 生物技术级，90% ，规格： 25毫克

A82784 DL-苹果酸钠 ，英文名或英文缩写： Sodium DL-ma1ate ，级别： 分析标准品 ，规格： 25毫克

A82785 DL-苹果酸钠水合物 ，英文名或英文缩写： Sodium DL-ma1ate trihydrate ，级别： 标准溶液，10ug/ml，u=6% ，规格： 100毫克

A82786 (T-4)-双(D-葡萄糖酸-κO1,κO2)-锌 ，英文名或英文缩写： Zinc gluconate ，级别： BR，98% ，规格： 5U

A82787 D-葡萄糖酸钙 ，英文名或英文缩写： Calcium D-gluconate ，级别： BR，97% ，规格： 10U

A82788 磷酸高铁二水物 ，英文名或英文缩写： Ferric phosphate dihydrate ，级别： 高纯 ，规格： 5毫克

A82789 磷酸高铁四水物 ，英文名或英文缩写： Iron(III) phosphate tetrahydrate ，级别： BR，98% ，规格： 5KU

A82790 DL-乳酸锂 ，英文名或英文缩写： DL-lactic acid lithium salt ，级别： 分析标准品 ，规格： 500克

A82791 枸橼酸钠 ，英文名或英文缩写： Sodium citrate dihydrate ，级别： 分析标准品，99% ，规格： 100克

A82792 五羟基己酸钠 ，英文名或英文缩写： Sodium D-gluconate ，级别： BR，95% ，规格： 25克

A82793 2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷 ，英文名或英文缩写： CNP-Afu ，级别： 标准溶液，100ug/ml ，规格： 100克

A82794 2，4-己二烯酸钾 ，英文名或英文缩写： Potassium sorbate ，级别： BR ，规格： 1公斤

A82795 DL-2-羟基丁二酸钙 ，英文名或英文缩写： Calcium DL-malate ，级别： BR，98% ，规格： 1克

A82796 4-甲基-7-乙酰氧基香豆素-β-D-吡喃半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： MU-Gal ，级别： BR，98% ，规格： 5克

A82797 4-甲基-7-乙酰氧基香豆素-α-D-吡喃半乳糖苷 ，英文名或英文缩写： MU-α-Gal ，级别： BR，98% ，规格： 25克

A82798 4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷 ，英文名或英文缩写： MUD ，级别： BR ，规格： 100克

A82799 四乙酰呋喃核糖 ，英文名或英文缩写： 1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose ，级别： 纯，98% ，规格： 10毫升

A82800 D-葡糖醛酸 ，英文名或英文缩写： D-Glucuronic acid ，级别： BR，98% ，规格： 500毫克

A82801 D-葡糖醛酸钠 ，英文名或英文缩写： Sodium D-glucuronate ，级别： BR，98% ，规格： 2毫克

A82802 D-葡萄糖醛酸-r-内酯 ，英文名或英文缩写： D-Glucurone ，级别： BR，98% ，规格： 1克

A82803 甜菊糖甙 ，英文名或英文缩写： Stevioside ，级别： BR，98% ，规格： 10克

A82804 焦葡萄酸钙 ，英文名或英文缩写： Calcium Pyruvate ，级别： BR，97% ，规格： 50克

A82805 乳酸镁 ，英文名或英文缩写： Magnesium L-lactate hydrate ，级别： 分析标准品，97.5% ，规格： 25毫克

A82806 乳酸钾 ，英文名或英文缩写： Potassium L-lactate ，级别： BR，96% ，规格： 1克

A82807 枸橼酸锌 ，英文名或英文缩写： Zinc citrate ，级别： 分析标准品，98% ，规格： 10克

A82808 葡萄糖酸铁(II)二水合物 ，英文名或英文缩写： Iron(II) D-gluconate dihydrate ，级别： 分析标准品，98% ，规格： 1克

A82809 葡萄糖酸镁盐 ，英文名或英文缩写： Magnesium gluconate ，级别： BR，土豆来源 ，规格： 10克

A82810 双(D-葡糖酸)铜 ，英文名或英文缩写： Copper gluconate ，级别： BR，玉米来源 ，规格： 50克

A82811 葡糖酸钾盐 ，英文名或英文缩写： Potassium gluconate ，级别： 土豆来源 ，规格： 1克

A82812 脱氢醋酸 ，英文名或英文缩写： DHA ，级别： BR ，规格： 10克

A82813 轻质碳酸镁 ，英文名或英文缩写： Magnesium carbonate hydroxide ，级别： BR ，规格： 10克

A82814 (R-)2,4-二羟基-N-(3-羟基丙基)-3,3-二甲基丁酰铵 ，英文名或英文缩写： D-Panthenol ，级别： AR，冷水不溶 ，规格： 25克

A82815 氢化麦芽糖 ，英文名或英文缩写： Maltitol ，级别： BR，冷水可溶 ，规格： 100克

A82816 寡果糖 ，英文名或英文缩写： Fructo-oligosaccharide ，级别： BR ，规格： 1公斤

A82817 低聚麦芽糖 ，英文名或英文缩写： Isomalto-oligosaccharide ，级别： AR ，规格： 1克

A82818 三氯代蔗糖 ，英文名或英文缩写： Sucralose ，级别： 高纯，98% ，规格： 10克

A82819 L-抗坏血酸棕榈酸酯 ，英文名或英文缩写： Ascorbyl palmitate ，级别： 高纯，99% ，规格： 1克

A82820 木寡糖 ，英文名或英文缩写： xylo-oligosaccharides ，级别： 高纯，98% ，规格： 100克

A82821 低聚半乳糖 ，英文名或英文缩写： Galacto-Oligosaccharides ，级别： 高纯，98% ，规格： 500克

A82822 甜醇 ，英文名或英文缩写： Dulcitol ，级别： 高纯，98% ，规格： 500毫克

A82823 赤藓醇 ，英文名或英文缩写： Erythritol ，级别： 高纯，98% ，规格： 1克

A82824 6-脱氧-L-半乳糖 ，英文名或英文缩写： L（-）Fucose ，级别： 高纯，99% ，规格： 5克

A82825 菊芬 ，英文名或英文缩写： Inulin ，级别： 生物技术级，98% ，规格： 5毫克

A82826 盐酸D-甘露糖铵 ，英文名或英文缩写： D-Mannosamine HC1 ，级别： 高纯，98% ，规格： 25毫克

A82827 D(+)-密二糖一水 ，英文名或英文缩写： Melibiose ，人正常皮肤细胞，HaCaT细胞级别： 高纯，98% ，规格： 1毫克

A82828 D(+)松三糖一水合物 ，英文名或英文缩写： D-(+)-Melezitose monohydrate ，级别： BR，97%，β型 ，规格： 5毫克

A82829 柳醇 ，英文名或英文缩写： D-(-)Salicin ，级别： BR，97%，a型 ，规格： 1克

A82830 大豆低聚糖 ，英文名或英文缩写： Stachyose hydrate ，级别： AR，99% ，规格： 1克

A82831 玉蜀黍淀芬 ，英文名或英文缩写： Corn starch ，级别： AR，99% ，规格： 10克