人胚肾细胞,293细胞 293 贴壁上皮细胞
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人胚肾细胞,293细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人胚肾细胞,293细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A82690 麦芽糖糊精 ,英文名或英文缩写: Maltodextrin ,级别: 高纯,95% ,规格: 1KU
A82691 白糊精 ,英文名或英文缩写: Dextrin ,级别: 高纯,95% ,规格: 1KU
A82692 α-环糊精 ,英文名或英文缩写: α-cyclodextrin ,级别: 超纯,99% ,规格: 1KU
A82693 环麦芽七糖 ,英文名或英文缩写: β-Cyclodextrin ,级别: 超纯,99% ,规格: 500U
A82694 羟丙基倍他环糊精 ,英文名或英文缩写: HPCD ,级别: 超纯,99% ,规格: 1毫克
A82695 磺丁基醚-β-环糊精 ,英文名或英文缩写: Sulfobutylether-β-Cyclodextrin ,级别: 高纯,98% ,规格: 500U
A82696 2,6-二甲基-β-环糊精 ,英文名或英文缩写: Methyl-β-cyclodextrin ,级别: 高纯,80% ,规格: 1KU
A82697 γ-环糊精 ,英文名或英文缩写: γ-Cyclodextrin ,级别: 高纯,98% ,规格: 250U
A82698 D-佐旋糖 ,英文名或英文缩写: D-Fructose ,级别: 4种混合,10mM/种 ,规格: 1KU
A82699 6-磷酸果糖二钠 ,英文名或英文缩写: F6P ,级别: 4种分开/套,100mM/种 ,规格: 500U
A82700 1,6-二磷酸果糖三钠盐 ,英文名或英文缩写: FDP ,级别: 超纯,99% ,规格: 1KU
A82701 D-半乳糖铵盐酸盐 ,英文名或英文缩写: D-Galactosamine HC1 ,级别: 高纯,98% ,规格: 5KU
A82702 右旋水解乳糖醛酸 ,英文名或英文缩写: D-(+)-Galacturonic acid ,级别: 高纯,98% ,规格: 2KU
A82703 一水葡萄糖 ,英文名或英文缩写: D-Glucose monohydrate ,级别: 高纯,97% ,规格: 5KU
A82704 D-葡萄糖无水物 ,英文名或英文缩写: D-Glucose anhydrous ,级别: 高纯,97% ,规格: 1克
A82705 6-磷酸葡萄糖三钠盐 ,英文名或英文缩写: G-6-P-Na3 ,级别: 超纯,98% ,规格: 10KU
A82706 6-磷酸葡萄糖二钠盐 ,英文名或英文缩写: G-6-P-Na2 ,级别: 高纯,98% ,规格: 25毫克
A82707 β-D-葡萄糖-6-磷酸钠盐 ,英文名或英文缩写: G-6-P-Na ,级别: 高纯,98% ,规格: 100毫克
A82708 1-磷酸葡萄糖二钠盐 ,英文名或英文缩写: G-1-P-Na2 ,级别: 超纯,98% ,规格: 500毫克
A82709 D-葡萄糖-6磷酸钡盐 ,英文名或英文缩写: 6-PG-Ba ,级别: 高纯,99% ,规格: 10KU
A82710 葡糖铵盐酸盐 ,英文名或英文缩写: D-Glucosamine HC1 ,级别: 高纯,98% ,规格: 10毫克
A82711 N-乙酰-葡萄糖铵 ,英文名或英文缩写: D-GlcNAc ,级别: 高纯,97% ,规格: 500毫克
A82712 纤维二糖 ,英文名或英文缩写: D-cellbiose ,级别: 超纯,98% ,规格: 25U
A82713 D-树胶醛糖 ,英文名或英文缩写: D-(?)-Arabinose ,级别: BR,100mM ,规格: 25毫克
A82714 L-树胶醛糖 ,英文名或英文缩写: L(+)Arabinose ,级别: 超纯,98% ,规格: 5KU
A82715 D-树胶糖醇 ,英文名或英文缩写: D(+)-Arabitol ,级别: 高纯,98% ,规格: 5KU
A82716 阿拉伯树脂 ,英文名或英文缩写: Gum acacia powder ,级别: 超纯,99% ,规格: 100毫克
A82717 加拿大树香脂 ,英文名或英文缩写: Canada balsam ,级别: 高纯,98% ,规格: 1克
A82718 氨基甲酸乙酯 ,英文名或英文缩写: Ethyl carbamate ,级别: 高纯,97% ,规格: 1毫克
A82719 木糖 ,英文名或英文缩写: D-Xylose ,级别: 超纯,97% ,规格: 5毫克
A82720 D(+)木酮糖 ,英文名或英文缩写: D-Xylulose ,级别: 高纯,98% ,规格: 100U
A82721 戊五醇 ,英文名或英文缩写: Xylitol ,级别: 高纯,98% ,规格: 500U
A82722 胆甾醇 ,英文名或英文缩写: Cholesterol ,级别: 高纯,98% ,规格: 100U
A82723 胆甾醇乙酸脂 ,英文名或英文缩写: Cholesteryl acetate ,级别: 高纯,98% ,规格: 200U
A82724 胆固醇氯化物 ,英文名或英文缩写: Cholesteryl chloride ,级别: 超纯,99% ,规格: 1KU
A82725 β-谷固醇 ,英文名或英文缩写: β-Sitosterol ,级别: 高纯,98% ,规格: 250U
A82726 糖元 ,英文名或英文缩写: Glycogen ,级别: 高纯,98% ,规格: 1KU
A82727 糖元二型 ,英文名或英文缩写: Glycogen from oyster ,级别: 超纯,98% ,规格: 1克
A82728 糖元三型 ,英文名或英文缩写: Glycogen from rabbit liver ,级别: 超纯,98% ,规格: 5克
A82729 糖原九型 ,英文名或英文缩写: Glycogen from bovine liver ,级别: 超纯,99% ,规格: 100毫克
A82730 可得然胶 ,英文名或英文缩写: Curdlan ,人胚肾细胞,293细胞级别: 高纯,98% ,规格: 1克
A82731 α-乳糖 ,英文名或英文缩写: α-D-Lactose monohydrate ,级别: 高纯,98% ,规格: 500U
A82732 路易斯酸 ,英文名或英文缩写: Lactobionic acid ,级别: 高纯,98% ,规格: 1.5KU
A82733 二蔗酮糖 ,英文名或英文缩写: Lactulose ,级别: ACS级,99% ,规格: 200IU
A82734 D-(+)-吡喃葡萄糖 ,英文名或英文缩写: D-Galactose ,级别: ACS级,99% ,规格: 25U
A82735 漏芦糖 ,英文名或英文缩写: D-(+)-Trehalose dihydrate ,级别: 高纯,98% ,规格: 25U