小鼠成纤维细胞，NIH 3T3细胞

小鼠成纤维细胞，NIH 3T3细胞 NIH 3T3 贴壁成纤维细胞

（1）细胞背景

该细胞来自NIH/3T3，可作逆转录病毒的包装细胞。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 小鼠

（4）培养条件

1）培养基：DMEM（高糖）培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）小鼠成纤维细胞，NIH 3T3细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到小鼠成纤维细胞，NIH 3T3细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A82411 链脲霉素 ，英文名或英文缩写： Streptozotocin ，级别： BR，96-100% ，规格： 1克

A82412 四环素盐酸盐 ，英文名或英文缩写： Tetracycline HC1 ，级别： BR，96-100% ，规格： 100毫克

A82413 四环素碱 ，英文名或英文缩写： Tetracycline ，级别： BR，27U/mg ，规格： 1克

A82414 头孢三嗪噻肟 ，英文名或英文缩写： Ceftriaxone sodium ，级别： BR，27.5u/mg ，规格： 100毫克

A82415 头孢拉定V ，英文名或英文缩写： Cefazolin sodium salt ，级别： USP级 ，规格： 1克

A82416 二氢氯化嘌呤毒素 ，英文名或英文缩写： Puromycin dihydrochloride ，级别： 3400～20100，液体,5条带 ，规格： 100毫克

A82417 万古霉素盐酸盐 ，英文名或英文缩写： Vancomycin HC1 ，级别： 4100～66000，蓝色液体，预染，9条带 ，规格： 1克

A82418 盐酸去甲万古霉素 ，英文名或英文缩写： Norvoncomycin hydrochloride ，级别： 6200～66200，芬末，6条带 ，规格： 100毫克

A82419 盐酸大观霉素 ，英文名或英文缩写： Spectinomycin HCl ，级别： 14400～97400，芬末,6条带 ，规格： 1克

A82420 阿司匹林 ，英文名或英文缩写： Acetylsalicylic acid ，级别： 14400～97400，液体,即用型,6条带 ，规格： 10克

A82421 阿齐霉素 ，英文名或英文缩写： Azithromycin ，级别： 14400～116000,液体,7条带 ，规格： 100毫克

A82422 美康唑 ，英文名或英文缩写： Miconazole nitrate ，级别： 19000～119000,液体,6条带 ，规格： 1克

A82423 盐酸脱氧土霉素 ，英文名或英文缩写： Doxycycline HCl ，级别： 15000～150000,液体,7条带 ，规格： 100毫克

A82424 苯唑青霉素 ，英文名或英文缩写： Oxacillin sodium salt ，级别： 43000～200000，芬末,5条带 ，规格： 1克

A82425 哌氨苄青霉素钠 ，英文名或英文缩写： Piperacillin sodium salt ，级别： 53000～212000，冻干芬 ，规格： 100毫克

A82426 萘啶酸 ，英文名或英文缩写： Nalidixic acid ，级别： 67000～669000，冻干芬 ，规格： 1克

A82427 红霉素琥珀酸乙酯 ，英文名或英文缩写： Erythromycin ethyl succinate ，级别： 片段:1000，800，600，400，300，200，100 ，规格： 100毫克

A82428 阿佛曼菌素 ，英文名或英文缩写： Abamectin ，级别： 片段:6000，4000，3000，2000，1500，1000，500，200 ，规格： 1克

A82429 羧酸铵 ，英文名或英文缩写： Pyrazinecarboxamide ，级别： BR ，规格： 10克

A82430 环孢霉素A ，英文名或英文缩写： Cyclosporin A ，级别： BR，2ml/支 ，规格： 100毫克

A82431 威斯塔霉素 ，英文名或英文缩写： Ribostamycin Sulfate salt ，级别： BR，<62.5 μg/ml ，规格： 1克

A82432 氧哌嗪青霉素 ，英文名或英文缩写： Piperacillin ，级别： BR，牛心，95% ，规格： 5U

A82433 1-(4-丁氧基苯)-3-(1-哌啶基)-1-丙酮盐酸盐 ，英文名或英文缩写： Dyclonine hydrochloride ，级别： BR，猪心,95% ，规格： 50U

A82434 双丙氨膦钠 ，英文名或英文缩写： Bialaphos ，级别： BR，马心,95% ，规格： 1KU

A82435 地红霉素 ，英文名或英文缩写： LY-237216 ，级别： BR ，规格： 5KU

A82436 5-氟脲嘧啶 ，英文名或英文缩写： 5-Fluorouracil ，级别： BR ，规格： 10KU

A82437 光辉霉素 ，英文名或英文缩写： Plicamycin ，级别： BR ，规格： 100毫克

A82438 麦考酚酸 ，英文名或英文缩写： Mycophenolic acid ，级别： BR ，规格： 1克

A82439 腐草霉素 ，英文名或英文缩写： Phleomycin from Streptomyces verticillus ，级别： BR，牛颌下腺 ，规格： 10克

A82440 有效霉素 ，英文名或英文缩写： Validamycin ，级别： BR，猪肠胃 ，规格： 1毫升

A82441 氯苯咪唑 ，英文名或英文缩写： Econazole nitrate ，级别： BR ，规格： 100u

A82442 甲硝哒唑 ，英文名或英文缩写： Metronidazole ，级别： BR ，规格： 500u

A82443 氟呱酸 ，英文名或英文缩写： Norfloxacin ，级别： 混合体，95% ，规格： 100KU

A82444 蒽诺沙星 ，英文名或英文缩写： Enrofloxacin ，级别： I型，95% ，规格： 500KU

A82445 氟洛芬 ，英文名或英文缩写： Florfenicol ，级别： II型，95% ，规格： 200毫升

A82446 磺铵甲基嘧啶 ，英文名或英文缩写： Sulfamerazine ，级别： BR，95-100% ，规格： 100毫升

A82447 磺铵双甲基嘧啶 ，英文名或英文缩写： Sulfamethazine ，级别： BR ，规格： 500毫升

A82448 2-对氨基苯磺酰铵嘧啶 ，英文名或英文缩写： Sulfadiazine ，级别： 细胞培养级，95% ，规格： 25PK

A82449 N-2-嘧啶基-4-氨基苯磺酰钠 ，英文名或英文缩写： SD-Na ，级别： BR，90% ，规格： 100毫克

A82450 痢特灵 ，英文名或英文缩写： Furazolidone ，级别： BR ，规格： 1克

A82451 氟胞嘧啶 ，英文名或英文缩写： 5-Fluorocytosine ，级别： BR ，规格： 10克

A82452 马来酸罗格列酮 ，英文名或英文缩写： Rosiglitazone maleate ，级别： BR ，规格： 100毫克

A82453 新生霉素钠 ，英文名或英文缩写： Novobiocin Sodium Salt ，级别： BR，95% ，规格： 500毫克

A82454 纳他霉素 ，英文名或英文缩写： Pimaricin ，级别： BR ，规格： 100毫克

A82455 磺铵甲恶唑 ，英文名或英文缩写： SMZ ，级别： 分子生物学 ，规格： 1克

A82456 盐酸多柔比星 ，英文名或英文缩写： DOX ，小鼠成纤维细胞，NIH 3T3细胞级别： BR ，规格： 30KU

A82457 氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-甲酸钾盐 ，英文名或英文缩写： Potassium clavulanate ，级别： BR，98% ，规格： 30KU

A82458 西罗莫司 ，英文名或英文缩写： Rapamycin ，级别： BR，85% ，规格： 2KU

A82459 (+)-松萝酸 ，英文名或英文缩写： (+)-Usniacin ，级别： USP级，99% ，规格： 1KU

A82460 长春新碱硫化物 ，英文名或英文缩写： VCR ，级别： USP级，88%，920u/mg ，规格： 17.5KU