小鼠成纤维细胞，L929细胞

小鼠成纤维细胞，L929细胞 L929 贴壁成纤维细胞

（1）细胞背景

亲本L的亚克隆，是最早建立的连续培养物之一。 L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。 APRT+，HPRT+。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）DMEM高糖培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：小鼠

（4）培养条件

1）培养基：DMEM高糖培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）小鼠成纤维细胞，L929细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到小鼠成纤维细胞，L929细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A82371 头孢霉素 ，英文名或英文缩写： CTX ，级别： BR，17Tabor u/mg ，规格： 1克

A82372 头孢菌素Ⅳ ，英文名或英文缩写： Cephalexin monohydrate ，级别： BR，500u/mg ，规格： 1毫克

A82373 7-(D-5-氨基-5-羧基戊酰铵基)头孢霉烷酸锌盐 ，英文名或英文缩写： Cephalosporin C zinc salt ，级别： 超纯，95% ，规格： 1克

A82374 金霉素盐酸盐 ，英文名或英文缩写： CTC ，级别： 层析纯，150u/mg ，规格： 5克

A82375 盐酸环丙氟哌酸 ，英文名或英文缩写： Ciprofloxacin hydrochloride ，级别： BR，500u/mg ，规格： 5克

A82376 环丙氟哌酸 ，英文名或英文缩写： Ciprofloxacin ，级别： BR，20u/mg ，规格： 25克

A82377 环己亚铵 ，英文名或英文缩写： Actidione ，级别： BR，50-100u/mg ，规格： 10克

A82378 纺锤菌素 ，英文名或英文缩写： Netropsin dihydrochloride ，级别： BR，50u/mg ，规格： 100克

A82379 更生霉素 ，英文名或英文缩写： Actinomycin D ，级别： BR，95% ，规格： 500克

A82380 妥布霉素 ，英文名或英文缩写： Tobramycin ，级别： BR，3000u/mg ，规格： 1克

A82381 盐酸米诺环素 ，英文名或英文缩写： Minocycline hydrochloride ，级别： BR，N:14% ，规格： 5克

A82382 氟嗪酸 ，英文名或英文缩写： OFLX ，级别： 精制级，95%，牛奶提取 ，规格： 10克

A82383 两性霉素乙 ，英文名或英文缩写： Amphotericin B ，级别： BR，90% ，规格： 100克

A82384 氨苄西林钠 ，英文名或英文缩写： Ampicillin sodium salt ，级别： BR，150u/mg ，规格： 150ku

A82385 氨苄青霉素三水酸 ，英文名或英文缩写： Ampicillin ，级别： BR ，规格： 100ku

A82386 盐酸林肯霉素 ，英文名或英文缩写： Lincomycin hydrochloride ，级别： BR，150IU/mg ，规格： 500ku

A82387 羧苄西林钠 ，英文名或英文缩写： Carbenicillin disodium salt ，级别： BR ，规格： 25ku

A82388 佐旋霉素 ，英文名或英文缩写： Chloramphenicol ，级别： I型，牛跟踺 ，规格： 125ku

A82389 湿霉素乙 ，英文名或英文缩写： Hygromycin B ，级别： II型，牛鼻膜 ，规格： 10u

A82390 寡霉素 ，英文名或英文缩写： Oligomycin ，级别： V型，牛跟踺 ，规格： 100u

A82391 制真菌素 ，英文名或英文缩写： Nystatin ，级别： BR，鱼鳞提取 ，规格： 250毫克

A82392 青霉素G钠 ，英文名或英文缩写： Penicillin G Na salt ，级别： 寡肽级，90% ，规格： 5克

A82393 青霉素G钾 ，英文名或英文缩写： Penicillin G Potassium salt ，级别： BR，98% ，规格： 100U

A82394 青霉素链霉素溶液 ，英文名或英文缩写： Penicillin&Streptomycin solution,γ-Irradiated ，级别： 金标级，99%，可做金标抗体 ，规格： 400U

A82395 青霉素链霉素两性霉素B溶液 ，英文名或英文缩写： Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated ，级别： 高纯，90%，适合电泳 ，规格： 750U

A82396 青霉素链霉素新霉素溶液 ，英文名或英文缩写： Penicillin&Streptomycin&Neomycin solution,γ-Irradiated ，级别： BR，80% ，规格： 50毫克

A82397 地霉素 ，英文名或英文缩写： Terramycin ，级别： BR，96-99% ，规格： 50毫克

A82398 盐酸地霉素 ，英文名或英文缩写： Oxytetracycline hydrochloride ，级别： BR，95% ，规格： 250毫克

A82399 9-{O-[(2-甲氧基乙氧基)-甲基]肟基}红霉素 ，英文名或英文缩写： Roxithromycin ，级别： 生物技术级，17u/mg ，规格： 100毫克

A82400 依他康唑 ，英文名或英文缩写： Itraconazole ，级别： BR ，规格： 1克

A82401 大扶康 ，英文名或英文缩写： Fluconazole ，级别： BR ，规格： 5KU

A82402 阿摩西林三水物 ，英文名或英文缩写： Amoxicillin trihydrate ，级别： BR ，规格： 25KU

A82403 酮亢唑 ，英文名或英文缩写： R41400 ，级别： BR ，规格： 100KU

A82404 盐酸氟罗沙星 ，英文名或英文缩写： Lomefloxacin hydrochloride ，级别： BR，50-70% ，规格： 100毫克

A82405 克林霉素盐酸盐 ，英文名或英文缩写： Clindamycin Hydrochloride ，级别： BR，18% ，规格： 1克

A82406 磷雷素钠 ，英文名或英文缩写： Phosphomycin disodium salt ，小鼠成纤维细胞，L929细胞级别： BR ，规格： 100毫克

A82407 丁铵卡那霉素 ，英文名或英文缩写： Amikacin ，级别： BR，98% ，规格： 1克

A82408 卡氮芥 ，英文名或英文缩写： BCNU ，级别： 亲合层析纯，1.95ug/ml ，规格： 100毫克

A82409 莫能星钠 ，英文名或英文缩写： Monensin sodium ，级别： BR，99% ，规格： 1克

A82410 羧噻吩青霉素钠 ，英文名或英文缩写： Ticarcillin disodium salt ，级别： BR，85% ，规格： 100毫克