小鼠脂肪细胞,3T3 L1细胞 3T3 L1 贴壁成纤维细胞
(1)细胞背景
3T3 L1是通过克隆分离得到的3T3 (swiss小白鼠)的连续亚株。 当细胞从快速分裂到长满且接触抑制时,该细胞经过前脂肪向脂肪样逆转。 培液中,高血清含量可以促进脂肪积累.
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 小鼠
(4)培养条件
1)培养基:DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)小鼠脂肪细胞,3T3 L1细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到小鼠脂肪细胞,3T3 L1细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A82327 甘精胰岛素 ,英文名或英文缩写: Insulin Human recombinant ,级别: BR,3-20u/mg,液体 ,规格: 100毫克
A82328 玻璃酸钠 ,英文名或英文缩写: Sodium hyaluronate ,级别: BR,0.5-3u/mg,芬末 ,规格: 500u
A82329 SDS-PAGE超低分子量标准品 ,英文名或英文缩写: Super low range protein MW marker ,级别: BR ,规格: 2500u
A82330 4.1-66kDa低范围分子量MARK ,英文名或英文缩写: Low range protein MW marker ,级别: 层析纯,35u/mg ,规格: 250毫克
A82331 小分子MARK ,英文名或英文缩写: Protein little MW marker ,级别: BR,5u/mg ,规格: 1克
A82332 低分子MARK ,英文名或英文缩写: SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins ,级别: BR,2u/mg ,规格: 25克
A82333 14.4-116kDa分子量MARK ,英文名或英文缩写: 14.4-116kDa Protein Molecular weight Mark ,级别: 生物技术级,150u/mg ,规格: 100克
A82334 19-119kDa预先染色分子量MARK ,英文名或英文缩写: Prestained Protein Molecular weight Mark ,级别: BR,250u/mg ,规格: 500克
A82335 15-150kDa精确分子量MARK ,英文名或英文缩写: Precise Protein Molecular weight Mark ,级别: BR, 500000u/mg ,规格: 1公斤
A82336 次高分子MARK ,英文名或英文缩写: SDS-PAGE Molecular hight weight markers for proteins ,级别: BR,3500u/mg ,规格: 25克
A82337 中分子量标准蛋白 ,英文名或英文缩写: Middle range protein MW marker ,级别: BR,100u/mg ,规格: 100克
A82338 高分子量标准蛋白 ,英文名或英文缩写: High range protein MW marker ,级别: BR,10u/mg ,规格: 1公斤
A82339 低范围RNA Ladder ,英文名或英文缩写: RiboRuler Low range RNA Ladder ,级别: BR ,规格: 25克
A82340 高范围RNA Ladder ,英文名或英文缩写: RiboRuler High range RNA Ladder ,级别: BR,0.4u/mg,小麦,芬末 ,规格: 100克
A82341 植物血凝素 ,英文名或英文缩写: PHA ,级别: BR,0.5-3u/mg,马铃薯,芬末 ,规格: 1公斤
A82342 植物血球凝集素PHA-P ,英文名或英文缩写: PHA-P ,级别: BR,10u/mg,甘薯,液体 ,规格: 25克
A82343 细胞血素C ,英文名或英文缩写: Cytochrome C ,级别: BR,0.5u/mg ,规格: 100克
A82344 组蛋白A(小牛胸腺) ,英文名或英文缩写: Histones,dried(Calf thymus) ,级别: 重组体 ,规格: 500克
A82345 组蛋白 ,英文名或英文缩写: Histone ,级别: BR,15-25u/mg,芬末 ,规格: 100克
A82346 核酸组蛋白(小牛胸腺) ,英文名或英文缩写: Histones nucleo from calf thymus ,级别: BR,10-40u/mg,液体 ,规格: 500克
A82347 组蛋白H1(小牛胸腺) ,英文名或英文缩写: Histones H1 from calf thymus ,级别: BR,0.01-0.04u/mg ,规格: 25克
A82348 粘蛋白 ,英文名或英文缩写: Mucin ,级别: BR,200u/g ,规格: 100克
A82349 粘液素II ,英文名或英文缩写: Mucin ,级别: BR,200u/mg ,规格: 1公斤
A82350 蛋白保护剂TY ,英文名或英文缩写: Protein protectant TY ,级别: 生物技术级,200u/mg ,规格: 1克
A82351 琼脂糖蛋白A ,英文名或英文缩写: Protein A–Agarose ,级别: 重组体,100u/mg,液体 ,规格: 5克
A82352 金属硫蛋白 ,英文名或英文缩写: MT ,级别: BR,1u/mg,液体 ,规格: 25克
A82353 肌球素 ,英文名或英文缩写: Myoglobin from equine skeletal muscle ,级别: BR,2-6u/mg ,规格: 25克
A82354 琼脂糖凝胶4B蛋白A ,英文名或英文缩写: Protein A-Sepharose 4B, Fast Flow from Staphylococcus aureus ,级别: BR,97%,腐蚀品 ,规格: 100克
A82355 纤连蛋白(人血) ,英文名或英文缩写: CIG ,级别: 超纯,98% ,规格: 500克
A82356 β-乳球蛋白 ,英文名或英文缩写: β-Lactoglobulin ,级别: USP级,96%,225IU/mg ,规格: 50克
A82357 Olig(dT)15 ,英文名或英文缩写: Olig(dT)15 ,级别: 高纯,98% ,规格: 250克
A82358 PUC18质粒 ,英文名或英文缩写: PUC18质粒 ,级别: BR,50u/mg ,规格: 5克
A82359 PUC19质粒 ,英文名或英文缩写: PUC19质粒 ,级别: 超纯,98% ,规格: 25克
A82360 结合珠蛋白 ,英文名或英文缩写: Haptoglobin from pooled human plasma ,级别: 高纯,50u/mg ,规格: 100克
A82361 蛋白脱脂剂 ,英文名或英文缩写: Lipids-Remover from proteins ,级别: BR,40% ,规格: 1克
A82362 氧合血红蛋白 ,英文名或英文缩写: Oxyhemoglobin ,级别: BR,98% ,规格: 1克
A82363 蛋白稳定化试剂 ,英文名或英文缩写: Prionex ,级别: BR,5u/mg ,规格: 5克
A82364 泛素 ,英文名或英文缩写: Ub ,小鼠脂肪细胞,3T3 L1细胞级别: BR ,规格: 25克
A82365 乳白蛋白 ,英文名或英文缩写: α-Lactalbumin ,级别: BR,50u/mg ,规格: 1克
A82366 利发霉素 ,英文名或英文缩写: Rifampicin ,级别: BR,20u/mg ,规格: 5克
A82367 艾狄密新 ,英文名或英文缩写: Erythromycin ,级别: BR,10u/mg ,规格: 5克
A82368 杆菌肽锌 ,英文名或英文缩写: Bacitracin zinc ,级别: BR,200u/mg,响尾蛇毒液 ,规格: 25克
A82369 枯草菌肽 ,英文名或英文缩写: Bacitracin ,级别: BR,600-2400u/mg,蜜蜂毒液 ,规格: 100克
A82370 松胞菌素B ,英文名或英文缩写: Cytochalasin B ,级别: BR,600u/mg,猪胰 ,规格: 1公斤