HEL299(红白细胞白血病细胞)?

HEL299(红白细胞白血病细胞)【概述】

复苏细胞要求快速融化的手段，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化。避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损害。

HEL299(红白细胞白血病细胞)用品】

培养液、吸管、离心管、培养瓶

HEL299(红白细胞白血病细胞)【步骤】

[1] 打开水浴锅，将温度调至37 ℃；[2] 从液氮中取出冻存的细胞株，用镊子夹住冻存管（戴防护面罩），迅速置入37 ℃的水浴锅中，不断振摇冻存管，使之尽快融化，要在1-2 min内完成复温；

[3] 完全融化后，取出冻存管，移至超净工作台，用75%酒精擦洗消毒，用无菌吸管吸取细胞悬液移至无菌离心管，加10倍的含10%胎牛血清的培养液，用吸管轻轻吹匀；

[4] 细胞悬液离心，1000rpm，5-8min，小心弃上清液。加入适量含10%胎牛血清的培养液，接种于培养瓶中，置于37℃、5% CO2、饱和湿度孵箱中培养；

[5] 次日更换培养基，以后按常规培养方法进行培养。如果复苏时细胞密度较高及时传代。细胞复苏时细胞密度以5×105个/ml。

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