TrueBlot——特殊二抗

联科生物

2015/04/23 22:57

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Goat IgG TrueBlotTM
Mouse IgG TrueBlotTM
Rabbit IgG TrueBlotTM

介绍：

TrueBlotTM系列二抗为美国ROCKLAND公司的优质二抗。因为TrueBlotTM系列二抗能够高亲合力的结合带有天然二硫键结构的IgG(Goat, mouse或Rabbit)，因此其仅检测非还原型的IgG。
免疫沉淀后的免疫印迹过程中必然涉及到免疫沉淀用一抗(多为IgG)的变性，因此如果使用传统的二抗(非还原和还原型的IgG均能检测到)会在印迹膜上出现杂带的干扰，也就是说，由于传统的二抗能与还原型的IgG结合，在印迹膜上显示出~55kDa的重链条带和~23kDa的轻链条带，这些均为非特异性条带，对免疫印迹结果的分析带来很大干扰。
如果使用TrueBlotTM系列二抗则可避免上述情况，特异地检测出免疫沉淀而得的抗原(如下图）。

用3ug Rabbit anti-Human Stat1抗体从0.5ml(1x107个 /ml) Jurkat细胞中免疫沉淀出Stat1蛋白，然后电泳、转膜，并用Rabbit TrueBlotTM和传统的HRP标记二抗对免疫印迹膜进行检测。道1：用Rabbit IgG TrueBlotTM检测；道2：用传统的HRP标记anti-Rabbit IgG二抗进行检测。结果可见：用传统的HRP标记二抗检测(道2)时会出现轻链和重链条带，而用Rabbit IgG TrueBlotTM检测时则没有(道1)，表明TrueBlotTM检测天然的抗体，而不检测变性的轻链和重链，使得免疫沉淀后的免疫印迹结果非常清晰和特异。

特点：

1、完全排除变性的免疫沉淀用一抗的干扰，结果清晰、准确；
2、使用简单，仅将传统的二抗替换成TrueBlotTM系列二抗即可。

注意要点：
1、需对免疫沉淀物进行彻底还原；
2、免疫印迹时需用牛奶作为封闭液，而不能用BSA(牛血清白蛋白)，因为后者的封闭作用不强；
3、当用Rabbit IgG TrueBlotTM对免疫印迹膜进行检测时，要先用anti-Ig微球来进行免疫沉淀步骤，而不能使用蛋白A或蛋白G微球，因为后者与Rabbit IgG有很强的亲合力，会引起污染。

产品：18-8816-33

编号名称组分规格价格(元）供应商免疫沉淀后免疫印迹用 13-8817-80 Mouse TrueBlot®: Anti-Mouse Ig Biotin 25μg 966Rockland13-8817-82 Mouse TrueBlot®: Anti-Mouse Ig Biotin 100μg 2,366Rockland18-8816-31 Rabbit IgG TrueBlotTM HRP anti-rabbit IgG 25 miniblots 1,330Rockland 18-8816-33 Rabbit IgG TrueBlotTM HRP anti-rabbit IgG 100 miniblots 2,786 Rockland18-8814-31 Goat IgG TrueBlotTM HRP anti-goat IgG 25 miniblots 1,330Rockland18-8814-33 Goat IgG TrueBlotTM HRP anti-goat IgG 100 miniblots 2,646Rockland18-8815-31 Sheep TrueBlot®: HRP Anti-Sheep IgG 25 miniblots 1,330Rockland18-8815-33 Sheep TrueBlot®: HRP Anti-Sheep IgG 100 miniblots 2,646Rockland免疫沉淀微球 00-8811-25 TrueBlot? anti-Mouse Ig IP Beads 2.5ml 2,366Rockland00-8800-25 TrueBlotTM anti-Rabbit Ig IP Beads 2.5ml 2,366Rockland00-8844-25 TrueBlot? anti-Goat Ig IP Beads 2.5ml 2,646Rockland免疫沉淀及其后免疫印迹检测试剂盒 88-7788-31 Mouse TrueBlot? Set HRP anti-mouse IgG 25 miniblots 3,626Rockland Anti-mouse Ig IP Beads 2.5ml 　88-1688-31 Rabbit TrueBlot? Set HRP anti-rabbit IgG 25 miniblots 3,066Rockland Anti-Rabbit Ig IP Beads 2.5ml 　88-1488-31 Goat IgG TrueBlot? Set HRP anti-goat IgG 25 miniblots 3,990Rockland Anti-Goat Ig IP Beads 2.5ml 　

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