luminex多因子检测样本收集方法一览

联科生物

2015/02/23 18:03

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ProcartaPlex?以更少量的样本完成对更多生物标志物的分析。由卓越的免疫试剂供应商开发，用于Luminex®平台，ProcartaPlex使您可以在25-50μL的样本（血浆、血清、细胞培养上清液以及其他体液）。实现在25-50μL的样本中同时对多达50种因子进行检测与定量。该技术在多通道“类ELISA”分析中，为每种靶标使用了经不同染色处理的捕获微球。相比于传统的三明治ELISA而言，ProcartaPlex免疫分析可以在使用样本量少而时间相同的情况下，分析多达50倍数量的因子。ProcartaPlex多通道免疫分析提供了多种试剂盒类型，涵盖六个物种（人类、小鼠、大鼠、非人灵长类、猪以及犬类），从而满足您的研究需求。

正确的样本收集整理方法，是实验成功至关重要的步骤. 目前ProcartaPlex可以检测样本类型有: 细胞上清、血清、血浆. 尽管其他生物学样本没有经过验证,但是理论上也可以检测,这些样本包括: BAL, 唾液，CSF, 组织匀浆液和尿液。

下面我们针对几种常见样本的收集、保存方法：

1、血清

全血室温（20-25 °C）凝固20-30min；
室温1,000 x g 10min；
收集上清，或者选择使用血清分离器；
可选：如果样本是高血脂样本，请先在2-8°10,000 x g 离心 10min，分离出下层血清；
多因子检测血清样本要求新鲜；如果不能在24h内检测，需要分装在-20 ℃以下，避免反复冻融。

2、血浆

根据要求选择柠檬酸或EDTA作为抗凝剂。如果选择肝素作为抗凝剂，建议每毫升血不超过10IU肝素（肝素用量过高，可能会导致部分检测指标值偏高）。
收集抗凝全血后30min内，在4oC 下10,000 x g离心10min，分离收集血浆；
可选：可选：如果样本是高血脂样本，请先在2-8°10,000 x g 离心 10min，分离出下层血浆；
多因子检测血浆样本要求新鲜；如果不能在24h内检测，需要分装在-20 ℃以下，避免反复冻融。

3、细胞培养上清

检测分泌性的成份时，最好用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

4、组织样本

如果可以，请按照参考文献推荐的方法。标本取完后液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的含有蛋白酶抑制剂的缓冲液, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。

保存过程中如果有沉淀，检测前样本应该再次离心去除沉淀，建议16,000 x g 离心5min。

以上信息部分来源与eBioscience。

阅读原文：http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015020023.html