要从肿瘤组织、脐带、皮肤、骨骼肌等各类组织中得到高活力的单细胞悬液，您找到合适的酶了吗？摸索到恰当的酶浓度了吗？酶解时间呢？得到的细胞多吗？活力高吗？......一系列问题，您都解决了吗？美天旎为您提供一整套样本制备的产品和方案，也许正是您所需要的哦。从全自动的组织处理器、组织解离试剂盒到细胞滤器、死细胞去除试剂盒等，一应俱全，不妨来了解一下：   1、gentleMACS系列组织处理器两通道、八通道的组织处理器，近40个预设程序，结合美天旎专利的C管，让您可以同时操作多个样本，几乎可以处理所有类型的组织样本，甚至新生鼠心脏组织，得到高活力的单细胞悬液。新推出的带加热模块的八通道组织处理器，温控模块的加入，使酶解过程也可以在机器上直接完成，实现了完全的自动化组织解离过程。   2、组织解离试剂盒预先滴定好浓度的酶溶液及酶解时间，即用型组织解离试剂盒让您的实验更高效、可重复性更高；同时，酶溶液已经实验验证，可以很好地保护细胞表面抗原，因此得到的单细胞活力高、表位完整，不影响下游流式等实验。现有肿瘤组织解离试剂盒、新生鼠心脏解离试剂盒、骨骼肌、皮肤、脑、神经球等近30种组织解离试剂盒，常见组织均可找到相应的解离试剂盒。   3、细胞滤器用于去除组织解离后的细胞团块和碎片；三种规格（30μm，70μm和100μm）；有排气槽的设计，因此不会出现液体俘获和溢出，适用于不同规格的试管和分选柱。    4、混悬仪——MACSmix? Tube Rotator机身小巧，充电电池设计，可以根据需要放置在冰箱或37度温箱中，使用方便。另外，还有死细胞去除试剂盒和内毒素去除试剂盒等，让您得到的单细胞悬液更适合下游实验，得到更加完美的组织解离产品。 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030025.html

要从肿瘤组织、脐带、皮肤、骨骼肌等各类组织中得到高活力的单细胞悬液，您找到合适的酶了吗？摸索到恰当的酶浓度了吗？酶解时间呢？得到的细胞多吗？活力高吗？......一系列问题，您都解决了吗？美天旎为您提供一整套样本制备的产品和方案，也许正是您所需要的哦。从全自动的组织处理器、组织解离试剂盒到细胞滤器、死细胞去除试剂盒等，一应俱全，不妨来了解一下：   1、gentleMACS系列组织处理器两通道、八通道的组织处理器，近40个预设程序，结合美天旎专利的C管，让您可以同时操作多个样本，几乎可以处理所有类型的组织样本，甚至新生鼠心脏组织，得到高活力的单细胞悬液。新推出的带加热模块的八通道组织处理器，温控模块的加入，使酶解过程也可以在机器上直接完成，实现了完全的自动化组织解离过程。   2、组织解离试剂盒预先滴定好浓度的酶溶液及酶解时间，即用型组织解离试剂盒让您的实验更高效、可重复性更高；同时，酶溶液已经实验验证，可以很好地保护细胞表面抗原，因此得到的单细胞活力高、表位完整，不影响下游流式等实验。现有肿瘤组织解离试剂盒、新生鼠心脏解离试剂盒、骨骼肌、皮肤、脑、神经球等近30种组织解离试剂盒，常见组织均可找到相应的解离试剂盒。   3、细胞滤器用于去除组织解离后的细胞团块和碎片；三种规格（30μm，70μm和100μm）；有排气槽的设计，因此不会出现液体俘获和溢出，适用于不同规格的试管和分选柱。    4、混悬仪——MACSmix? Tube Rotator机身小巧，充电电池设计，可以根据需要放置在冰箱或37度温箱中，使用方便。另外，还有死细胞去除试剂盒和内毒素去除试剂盒等，让您得到的单细胞悬液更适合下游实验，得到更加完美的组织解离产品。 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030025.html

   核酸稳定的必要性及解决方案核酸提取是临床 PCR 检验最为关键的部分，核酸提取的成败关系到下游 PCR 检验结果的正确性，同时也是临床 PCR 检验操作中最易出问题的环节。高品质的核酸质量，标准化的核酸纯化过程以及整个操作过程的可溯源性是整个分子诊断流程的重中之重。而 QIAGEN 作为核酸纯化领域的领导品牌，其产品和性能高度契合分子诊断领域对样本制备的所有需求。生物样品自采集后，其中的 RNA 含量会受多种因素存在而发生变化，如被 RNA 酶降解，或受温度、缓冲液等外部因素刺激而上升，QIAGEN 提供一系列产品能够快速稳定 RNA，其中 Allprotect Tissue Reagent 能够同时稳定动物组织中的 DNA/RNA/ 蛋白质，PAXgene Tissue Container 还能固定组织，效果与福尔马林相当。这些稳定剂的使用确保了真实的基因表达谱数据和实验的重复性（图 2、3）。快速稳定 RNA在室温下安全的处理样品 — 无需液氮和干冰方便样品的运输 — 室温下进行适合样品长期保存图2 大鼠肾脏组织经 RNeasy Protect Mini Kit 稳定后，室温放置 60 分钟，仍可以纯化到完整地 RNA；而使用常规方法，组织放置一段时间后 RNA 遭到降解。 图3 RNAprotect® Saliva Reagent 稳定了唾液中β-actin mRNA 的水平，mRNA 通过 real-time RT-PCR 定量。 图4 Allprotect稳定的机理：每个Allprotector分子具有多个允许Allprotector分子包被并保护DNA、RNA和蛋白质的接触点。组织裂解时，Allprotector分子被稀释、分解，释放出DNA、RNA和蛋白质。   样本稳定试剂选择指南RNA稳定试剂 样本 RNA稳定试剂名称 货号 组织 RNAlater RNA Stabilization Reagent 76104 RNAlater TissueProtect Tubes 76154 PAXgene Tissue Container 765112 Allprotect Tissue Reagent 76405 细胞 RNAprotect Cell Reagent 76526 细菌 RNAprotect Bacteria Reagent 76506 唾液 RNAprotect Saliva Reagent?   血液 PAXgene Blood RNA Tubes 762165 骨髓 PAXgene Bone Marrow RNA Tubes 764114RNA稳定并纯化试剂盒样本 RNA稳定并纯化试剂名称 货号 组织 RNeasy Protect Mini Kit 74124 细胞 RNeasy Protect Cell Mini Kit 74624 细菌 RNeasy Protect Bacteria Mini Kit 74524 唾液 RNeasy Protect Saliva Mini Kit 74324 血液 PAXgene Blood RNA Kit* 762174 骨髓 PAXgene Bone Marrow RNA Kit* 764133* 专用于 PAXgene Tube 稳定的血液，?包含在 74324 中。以上信息来源于QIAGEN官网！ 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030024.html

   什么是样品破碎？生物学样品的高效破碎和匀浆是所有 RNA 纯化过程的绝对要求。破碎释放出样品中的 RNA，而匀浆则降低了样品粘稠度，利于后续的 RNA 纯化。   为什么要使用 QIAGEN 的样品破碎产品？ QIAGEN 为破碎和匀浆提供了多种技术 – 从 QIAshredder 离心柱到TissueRuptor 和 TissueLyser 系统，前者适合细胞裂解液的简单快速匀浆，而后者适合更坚硬组织的机械破碎和匀浆，具有多种通量。TissueRuptor和 TissueLyser 系统带来了快速高效的破碎，并取代了研钵及研杵等乏味耗时的破碎方法。   QIAGEN 的样品破碎产品如何工作？QIAshredder 是一个离心柱形式的生物大分子破碎系统。将细胞裂解液上样到 QIAshredder 离心柱中，随后短暂离心，即可匀浆裂解液。TissueRuptor 是一个手持式设备，它利用 TissueRuptor 一次性探头同时进行破碎和匀浆，探头中包含了一块刀片，可非常高速地旋转。由于探头是一次性且透明的，故交叉污染的风险被降至最低，且样品破碎过程可直观地监控。一次性探头的使用还节约了时间，因为在破碎每个样品后不需要清洗探头。TissueLyser 仪器是珠磨机（bead mill），它能通过研磨珠在塑料管中的高速震动来同时破碎和匀浆样品。利用一个能容纳多支管的转接器，仪器可同时破碎多个样品 – TissueLyser LT 最多可处理 12 个样品，而TissueLyser II 最多可处理 48 或 192 个样品。图1 高效的组织破碎：使用TissueLyser LT或TissueLyser II破碎不同的大鼠组织。[A] 在QIAcube全自动核酸纯化仪上使用DNeasy Blood & Tissue Kit从25 mg样本中纯化DNA。利用分光光度计测定DNA产量。 [B] 在QIAcube全自动核酸纯化仪上使用RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮肤、心脏和肺) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (大脑)，从20 mg样本中纯化RNA。利用分光光度计测定RNA产量。   产品订购信息：产品名称 规格 货号 QIAshredder (50) For homogenization of cell lysates 79654 TissueRuptor® For disruption of individual samples 9001271 TissueRuptor Disposable Probes (25) Disposable probes for use with the TissueRuptor 990890 TissueLyser LT For disruption of up to 12 samples 85600 TissueLyser LT Adapter, 12-tube For purification of RNA from cells in 96-well format 69980 TissueLyser II For disruption of up to 48 or 192 samples 85300 TissueLyser Adapter Set 2 x 24 Adaptor set for use with the TissueLyser II; holds 48 tubes 69982以上信息来源于QIAGEN官网！更多有关 BLU-V 的信息请见 www.qiagen.com/bluv 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030023.html

BLU-V Viability PMA Kit、BLU-V 系统和 BLU-V Incubation Box（孵育盒）共同组成了 BLU-V 产品套装。它们组合在一起，为您提供了一个开始活菌 PCR 应用的简化工作流程。   BLU-V Viability PMA KitBLU-V Viability PMA Kit 是一种用于进行 PMA 处理的耗材试剂盒，能够兼容包括 QIAamp® UCP Pathogen Mini Kit、QIAamp cador® Pathogen Mini Kit、DNeasy® Blood & Tissue Kit 和 QIAGEN real-time PCR Kit 在内的多种 QIAGEN DNA 纯化试剂盒。BLU-V Viability PMA Kit 可带来：1、提供 PMA 处理所需的试剂、条件和实验方案2、与 QIAGEN DNA 抽提和实时定量 PCR 试剂高度兼容3、提供通用型设置，同时可针对特定应用进行灵活调整   BLU-V 系统 BLU-V 系统是一台小型的桌面级设备，能够简便高效地实现 PMA 光激活过程的标准化。BLU-V 系统的特性包括：1、 可同时对多达 12 例样本实施特定波长的光激活2、持续均一地输出光量，为 PMA 激活提供优化的条件在 PMA 的光激活过程中无需加热样本   BLU-V Incubation Box（孵育盒）BLU-V 孵育盒是对样本实施避光孵育的附属装置。   活菌 PCR 的工作流程 活菌 PCR 技术的实现十分简单，为混合样本中存活微生物的特异性检测提供了一个可靠而简便的方案图 8. 活菌 PCR 的工作流程。BLU-V 检测可以方便地整合进您的实验室工作流程之中使用我们的 BLU-V 套装在您的实验室流程中整合入活菌 PCR 技术，自信地精确区分存活和死亡微生物。   产品订购信息：产品 规格 货号 BLU-V Viability PMA Kit PMA Reagent 2 x 0.7 mg; Buffer EB, RNase-free water 296015 BLU-V System Instrument for photo-activation of dyes, includes one BLU-V Sample Holder 9002300 BLU-V Incubation Box Box for up to 12 tubes (tube volumes up to 2 ml) for light protection during incubation 9022908 BLU-V Sample Holder Sample holder for up to 12 tubes (tube volumes up to 2 ml) 9022909 QIAamp UCP Pathogen Mini Kit 50 QIAamp UCP Mini Columns, Collection Tubes (2 ml), Tube Extenders (20 ml), Elution Tubes, VacConnectors, Buffers, and Proteinase K 50214 QIAamp cador Pathogen Mini Kit (50) For 50 RNA/DNA preps: 50 QIAamp Mini Spin Columns, Carrier RNA, Proteinase K, Collection Tubes (2 ml), RNase-free buffers 54104 DNeasy 96 Blood & Tissue Kit (4) For 4 x 96 DNA minipreps: 4 DNeasy 96 Plates, Proteinase K, Buffers, S-Blocks, AirPore Tape Sheets, Collection Microtubes (1.2 ml), Elution Microtubes RS, Caps, 96-Well Plate Registers 69581以上信息来源于QIAGEN官网！更多有关 BLU-V 的信息请见 www.qiagen.com/bluv 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030022.html

活菌 PCR 是一项崭新的技术，能够选择性地扩增存活细胞的 DNA。这使得研究人员能够快速、可靠地区分存活和死亡细胞，而不再依赖耗时的培养方法进行判断。   传统 PCR 法的缺陷传统 PCR 法的一个主要缺点就是无法分辨存活和死亡的微生物。这会导致误导性结果的生成，例如高估污染水平。此外仅对于存活微生物，传统方法也无法胜任精确的定量检测工作（图 3）图3. 传统的 PCR 技术无法区分存活和死亡的微生物。我们制备了热灭活和存活沙门氏菌的混合样本。裂解细胞并抽提DNA。运行传统的实时定量 PCR 检测。未检出不同细胞混合物之间的 CT 值差异。这表明传统 PCR 方法无法分辨存活和死亡微生物的 DNA。    PMA 对存活和死亡细胞具有高效的分辨能力 PMA 选择性地进入死亡细胞，由光激活进而嵌入 DNA 并与之共价结合，从而在后续 PCR 中强烈抑制扩增反应。由死亡细胞 DNA 获得的 CT 信号显著高于存活 DNA，据此实现存活和死亡细胞的明确区分（图 4）。图 4. PMA 抑制了死亡细胞 DNA 的扩增反应。使用缓冲蛋白胨水配制多种浓度的死亡沙门氏菌样本，并制备了 PMA处理组样本和非处理组样本。实验中发现 PMA 处理组的 CT值相比未处理组发生了明显的上移，ΔCT 平均值为 11.4 左右。这表明 PMA 抑制了死亡沙门氏菌 DNA 的进一步扩增。在沙门氏菌 PMA 处理组中未见到像非处理组那样的 CT 值滴定效应，这可能是由于样本中较低的拷贝数范围处于所使用的 mericon Salmonella spp Kit 的检测下限所致。   PMA 选择性抑制死亡细胞 DNA 的检测当使用存活和死亡微生物的混合样本时，PMA 可选择性地抑制对死亡细胞的检测，而不会对存活细胞 DNA 的检测造成影响（图 5）。样本中的死亡细胞不会影响 PMA 的性能。因此可确信，所得到的结果能够精确反映样本中的存活微生物。图 5. 在存活和死亡细胞的混合样本中，死亡细胞 DNA 的检测仍选择性地受到抑制。左侧的柱状图代表了缓冲蛋白胨水中的存活沙门氏菌细胞。右侧的柱状图则相应代表了以10:90%、50:50%、90:10% 和 100:0% 等不同比例混合的存活与热灭活（死亡）沙门氏菌样本。结果证明两组的 CT值之间存在高度的一致性（CT 值变异度低于 1）。这就印证了 PMA 可有效抑制死亡沙门氏菌检测，也说明 PMA 能够针对存活和死亡细菌的混合样本提供高水平的分辨能力。   PMA 对存活和死亡细胞具有高效的分辨能力 PMA 所具有的存活和死亡细胞分辨能力，能确保您可以轻松、绝对肯定地衡量自身灭菌控制措施的有效性。比较存活和死亡沙门氏菌混合样本的 PMA 处理组与未处理组 CT 值差异（ΔCT）时，我们发现，较高 CT值的最大信号位移可达 15 左右。这一显著性的信号分离事件可用于明确区分 PMA 结合的死亡细胞 DNA 与 PMA 未结合的存活细胞 DNA。而这一分辨能力在样本中存活细胞比例变化较小的情况下仍然有效。这将确保您可以轻松并绝对、肯定地衡量自身灭菌控制措施的有效性。图 6. PMA 提供了高效的存活和死亡细胞区分能力。这里显示了在存活和死亡沙门氏菌混合样本中 PMA 处理与非处理组之间 CT 值的差异。包含 100% 死亡沙门氏菌的样本在PMA 处理条件下，相比未处理组发生了幅度为 15 左右的CT 值上移。PMA 介导的信号淬灭效应是非线性的，在存活细胞的检测中它将显著增加，并因此导致 CT 值相对未处理组发生大幅降低，进而增大了全局性的分辨敏感度。   PMA 技术在混浊介质中实现高效检测使用光激活化合物时存在的一个问题是，如何在性能不够理想的浑浊介质中实现细胞活性检测。好在，激活 PMA 所使用的波长能够穿透浑浊介质。我们在一项针对李斯特菌的分析配置中加入了对照 DNA（掺入（spiked-in）DNA），以确保 PMA 试剂的效能和实现正确操作。PMA 处理组与非处理组样本之间对照 DNA CT 值的比较结果可用来证实 PMA 试剂的效能及操作的正确性。图 7 显示了 PMA 存活 / 死亡细胞区分流程的检测结果，这些结果中包含了对热灭活与存活李斯特菌混合样本中靶标通道和对照 DNA（对照通道）的检测。在靶标通道中，存活李斯特菌样本PMA 处理组与非处理组之间 CT 值不存在差异，这与实验预期一致。在死亡李斯特菌样本中引入 PMA 处理会导致 CT 结果值出现预期性上升，这是 PMA 成功嵌入 DNA 的后续结果（图 7A）。在对照通道中，掺入到李斯特菌样本中的 DNA 显示了预期为 6 左右的的 CT 值移动，其移动范围仍处于特定的 6±2 区间内，说明该结果并未受到所使用的 Nutella®介质影响（图 7B）。这些数据清晰证明了 PMA 的激活光强足以穿透混浊样品，并能成功介导 DNA 的嵌入反应。图 7. 匀质介质对 PMA 存活 / 死亡细胞区分能力的影响。nA 将存活或热灭活的李斯特菌掺入2.5% Nutella 基质中，并单独进行处理。存活李斯特菌在 PMA 处理组与非处理组之间未显示 CT 值改变。死亡李斯特菌样本的 PMA 处理组显示了预期中的 CT 信号位移，表明对 DNA成功完成了嵌入性修饰。nB 将对照 DNA 加入含有相同 2.5% Nutella 基质的存活或死亡细胞样本中。存活或死亡细胞的背景未对对照 DNA 的检测造成显著影响，这些检测结果中仅对应体现 PMA 的存在与否。6 左右的 CT 值移动仍就存在，并符合预定 6±2 的变动范围。这些数据提示了该应用中的 PMA 激活光强足以穿透混浊样品，并能成功介导 DNA 的嵌入反应。以上信息来源于QIAGEN官网！ 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030021.html

    适用于您微生物学应用的活菌 PCR 技术对存活微生物实施快速、敏感和特异性检测是许多微生物学研究和质控对照领域的基本需求。real-time PCR 等基于 DNA的扩增技术能够提供所需的速度和特异性。活菌 PCR 是微生物学研究的新一代技术，它将细胞的存活信息与 PCR 类检测法的速度和特异性整合在一起。   活菌 PCR 技术工作原理活菌 PCR 是一项创新型的技术，能够分辨存活和死亡的微生物。QIAGEN 的活菌 PCR 系统中使用了 DNA 的嵌入试剂单叠氮丙啶（PMA）。PMA 是一类能够在 DNA 水平上区分微生物存活与否的化学分子，当使用特定波长的激光激活 PMA 时，PMA 会嵌入 DNA 并与之共价结合。在后续的 PCR 反应中被修饰 DNA 的扩增将受到抑制，从而导致扩增信号降低。PMA 无法透过完整的生物膜结构。这意味着来自存活微生物的 DNA 由于有完整膜结构包裹而不会受到 PMA 修饰，因此可以被 PCR 反应检测出来。微生物死亡细胞的膜结构由于失去了其原有的保护功能，PMA 能够进入细胞并修饰其中的 DNA。死亡微生物细胞中被修饰的 DNA 在PCR 反应时受到抑制，从而导致扩增信号降低。PMA 带有强正电荷，这意味着它无法穿透完整的存活细胞膜。它同时具有一个锚定基团，能够在特定波长的光学激发下与 DNA 完成不可逆的结合反应。这一特性使得 PMA 能够竞争超越其他 DNA 嵌入染料与核酸的结合，成为 QIAGEN 的 BLU-V® Viability 产品线的基础组件。图 2. 活菌 PCR 的原理。PMA 无法穿过存活微生物的完整膜结构，因此后续的 PCR 反应不会受到影响。与之相反，PMA 能够穿过死亡微生物细胞的膜结构，进而修饰 DNA 并抑制后续的 PCR 反应。 “活菌PCR是一项可靠的区分微生物存活/死亡的技术，QIAGEN推出的解决方案则将此技术实现了标准化，使它可以更加方便地用于广泛的相关应用。”Andreas Nocker-Einsiedler博士，将PMA应用于活菌PCR的技术开发者。以上信息来源与QIAGEN官网！ 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030020.html

联科生物推出系列自主产品套餐，感恩回馈广大科研用户。 活动时间：即日起至2015年6月30日 活动内容：活动期间，凡从联科生物购买下列任一套餐的客户，即可获得一张价值50元的京东购物卡（仅限终端客户）。    套餐一： Western一站式套餐，涵盖Western实验所需所有缓冲液。  产品特点： SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 包含配制SDS-PAGE凝胶的所有缓冲液 即用型，使用方便，操作简单 价格便宜，节省科研成本及时间 丽春红染色液： 可逆染色，检测转膜效率。 与下游WB检测完全兼容，无任何干扰。 联科酶标二抗： 无以伦比的性价比，稀释比高达1:5000-1:100000 -20℃仍为液体，不会反复冻融 无需分装，使用方便 价格便宜，全部现货供应Potent ECL kit高灵敏度的非放射性检测系统: 可检测低至100fg～1pg的抗原，适用于痕量抗原的检测高分辨率: 本底极低，即使长时间曝光，背景仍然极低，远远优于国产与进口同类产品半衰期长：信号衰减慢，12个小时以上仍可感光X光胶片。 目录号 产品名称 规格 LK-WB004 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 1ml LK-WB019 RIPA裂解液 100ml LK-WB018 PMSF (100mM) 1ml LK-PQ0011 BCA法蛋白定量试剂盒(50T/250T) kit LK-WP002 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 1kit LK-WP001 Western Blot缓冲液套装(湿转) 1kit LK-P4520 PVDF片膜，0.45um,7.125*8.5cm 20片 LK-WB025 丽春红染色液 100ml LK-A3828 Bovine serum Albumin(BSA) 5g LK-GAM007 Goat Anti-Mouse IgG(H+L) HRP 100ul LK-P1425 Potent ECL kit 100ml LK-DY01 定影粉（1L） 包 LK-XY01 显影粉（1L） 包      套餐二： 人T细胞三色方案  目录号 产品名称 规格 LK-AH0305-50 Anti-Human CD3,APC 50T LK-AH0401-50 Anti-Human CD4,FITC 50T LK-AH0804-50 Anti-Human CD8,PE 50T      套餐三： 小鼠T细胞三色方案  目录号 产品名称 规格 LK-AM0306-100 Anti-Mouse CD3,PE-Cy5 100T LK-AM0401-100 Anti-Mouse CD4,FITC 100T LK-AM0804-100 Anti-Mouse CD8,PE 100T      套餐四： 大鼠T细胞三色方案  目录号 产品名称 规格 LK-AR0301-100 Anti-Rat CD3,FITC 100T LK-AR0405-100 Anti-Rat CD4,APC 100T LK-AR0804-100 Anti-Rat CD8,PE 100T      套餐五： 刺激阻断剂-Th1/Th2/Th17检测必备  产品特点：FIX&PERM Kit全球公认效果最好的破膜剂1、破膜后细胞分群保持完好；2、溶血、破膜、染色一步完成，节约成本，操作简便；3、保持抗体的特异性、灵敏度以及可重复性。刺激阻断剂（CS1001/CS1002）：1、高品质原料-来自Sigma；2、均为液体，低温不会冻融，无需分装直接使用；3、以浓缩液形式提供，无需计算，按比例加入。流式染色缓冲液1、使用方便，即用型；2、价格便宜；3、有效降低非特异性结合；4、适用于各种流式实验。 目录号 产品名称 规格 备注 LK-AM6904-050 Anti-Mouse CD69,PE 50T 小鼠样本刺激效果质控 LK-GAS003 FIX&PERM Kit 50T 破膜剂 LK-CS1001 PMA/Ionomycin mixture(250X) 100ul 刺激剂 LK-CS1002 BFA/Monensin Mixture(250X) 100ul 阻断剂 LK-S1001 Flow cytometry Staining buffer 125ml 流式染色缓冲液  阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030019.html

常规PCR实验中，PCR引物在室温状态下经常与DNA模板发生非特异性结合，普通Taq DNA聚合酶增加了非特异性片段被扩增的可能性；热启动PCR使用的聚合酶被修饰后在低温状态下不具有活性而只在高温时有活性，保证引物特异性结合状态下特异性产物的有效扩增。罗氏FastStart热启动酶技术采用化学修饰的方法，只需在第一个PCR循环开始前95℃加热2分钟去除热敏感的抑制基团，便能激活FastStart Taq DNA Polymerase或FastStart High Fidelity PCR System的DNA聚合酶活性，就可进行PCR扩增反应。表1表2表3  *结合PCR Nucleotide MixPLUS**与Taq DNA Polymerase比较 ***提供包含dTTP的核苷酸混合物图1: Taq DNA Polymerase的灵敏度和保真度相比较。选择FastStart Taq DNA Polymerase和FastStart High Fidelity PCR System均能提高灵敏度，选择FastStart High Fidelity PCR System能有效提高保真度。www.roche-applied-science.com 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030018.html

罗氏超纯PCR级核苷酸的生产是一个酶合成过程，不存在普通化学合成核苷酸准备过程中引入的被修饰碱基、四磷酸盐和焦磷酸盐等组分的污染。其精心设计的技术缓冲条件保证核酸溶液拥有出色的稳定值和更长的保存期。优势：■ 达到PCR优秀效果：使用FastStart Taq DNA Polymerase配合超纯PCR级核苷酸混合物，能确保扩增反应得到更好的效果和最高的灵敏度。■ 提升常规PCR表现和一致性：纯度一致性经HPLC测定可达>99% dNTP，■ 订购方便：dNTPacks提供一个PCR所需的完整包装，只需一个dNTPack包装，就包含有PCR反应所需组分（模板、引物除外）。■ 更经济实惠：热稳定DNA聚合酶和预混合的PCR级核苷酸共同订购可以享受更优惠的价格。■ 保护珍贵的反应组分：大规模投入生产时应该尽量避免其他来源的核苷酸所带来的风险。相关产品信息：产品 目录号 规格 FastStart Taq DNA Polymerase, dNTPacks 04 738 314 001 100 U 04 738 357 001 500 U（2*250U） 04 738 381 001 1,000 U（4*250U） 04 738 403 001 2,500 U（10*250U） 04 738 420 001 5,000 U（20*250U） FastStart High Fidelity PCR System, dNTPacks 04 738 284 001 125 U 04 738 292 001 500 U（2*250U） 04 738 306 001 2,500 U（10*250U） 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030017.html

选择FastStart高保真PCR系统，可拥有FastStart Taq DNA Polymerase所有优点、4倍的精确度以及扩增片段长度达到5kb的特性。该系统除了包括FastStart Taq DNA Polymerase外，还含有创新的不带有聚合酶活性的热稳定校正蛋白。这两种蛋白均经化学修饰，在75℃以下不具活性，而在95℃加温2分钟后就可恢复活性。优势：■ 扩增更长的模板：FastStart高保真PCR系统可以扩增各类不同的DNA和cDNA模板得到达到5kb长度的片段。■ 提升保真度：混合酶表现出大约4倍于普通Taq DNA Polymerase和FastStart Taq DNA Polymerase的高保真度。■ 获得出色的多重PCR结果：FastStart高保真PCR系统可以同时扩增多条PCR片段，PCR Optimization Kit试剂盒针对于攻克困难模板。■ 获得所有热启动PCR的优点：热启动PCR提升特异性、敏感度和产物产量。■ 扩增特别复杂的模板DNA：FastStart高保真PCR系统中包含DMSO，添加DMSO在PCR体系中，能有助于扩增复杂模板。相关产品信息:产品 目录号 规格 FastStart High Fidelity PCR System 03 553 426 001 125 U 03 553 400 001 500 U（2*250U） 03 553 361 001 2,500 U（10*250U） PCR Optimization Kit 11 636 138 001 1 kit 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030016.html

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     2015年3月6日上午，拱墅区委常委、副区长孙剑甫，区府办分管副主任，区发改局、区科技局、工业区管委会负责人一行领导到杭州联科生物技术股份有限公司进行了走访调研。     孙副区长一行领导深入的了解了联科公司的经营情况，联科总经理宋路红女士详细介绍了公司的发展历程及未来的规划，让区领导了解了企业发展良好的前景以及企业经营过程中遇到的困难。对企业的阳光经营理念、准确的产品定位，孙副区长给予了肯定和赞赏，孙剑甫表示希望公司以新三板挂牌为新起点，科学谋划再次创业，同时运用互联网思维，改进管理和商业模式。     区领导的开年走访调研，让我们企业感受到了区领导的关心，我们的区领导是在实实在在的帮助企业发展壮大，走访期间，孙副区长专业而严谨的讲话给在场的人员留下了深刻的印象。亲切交流 孙副区长在关心联科生物的产品 阅读原文：http://www.liankebio.com/AboutShow/articleID/2015030013.html

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FastStart PCR预混液是一款即开即用、2倍浓度的热启动预混液，从真正意义上使热启动PCR实现毫不费力。其中包括FastStart Taq DNA Polymerase、品质出色的PCR级核苷酸以及其他PCR试剂（只需外加入相应引物和模板），可直接应用于普通PCR和两步法RT-PCR。优势：大大简化操作：您所需要做的仅仅是加入引物、模板和水，2倍浓度的热启动预混液包含您其余一切需要。简化各种不同PCR应用：方便实用的FastStart PCR预混液可应用于常规的高通量PCR或者直接菌落PCR。增加可靠性、减少污染风险：更少的试管间移取操作，控制可能出现的错误和污染的来源。可用移液工作站加样：含有热激活FastStart PCR Taq DNA聚合酶的FastStart PCR预混液可在室温下稳定保存24小时。减少加样时间：FastStart PCR预混液可在2-8℃存放长达1个月，随取随用 相关产品信息:产品 目录号 规格 FastStart PCR Master04 710 436 0012.5ml（2*1.25ml） 04 710 444 00110ml（8*1.25ml） 04 710 452 00150ml（10*5ml） 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030011.html

在您的日常PCR中应用FastStart Taq DNA Polymerase能客服非热启动聚合酶的不足之处。FastStart Taq DNA Polymerase是一款热稳定的、经化学修饰重组的Taq DNA Polymerase。受益于它颇具特点的酶设计和优化的缓冲体系，扩增产物长度能达到3kb。FastStart Taq DNA Polymerase在75℃以下没有活性，而在95℃加温2至4分钟后就可恢复活性。优势：■ 拥有热启动PCR的所有优点：FastStart Taq DNA Polymerase全面提升PCR特异性、灵敏度和产物产量。■ 扩增DNA片段达到3kb：FastStart Taq DNA Polymerase可用于扩增各类DNA和cDNA模板。■ 攻克困难模板DNA：利用FastStart Taq DNA Polymerase产品中提供的GC-RICH Resolution Solution，能减少模板二级结构。■ 可使用自动化加样系统：得益于FastStart Taq DNA Polymerase在75℃以下稳定，不具有活性，PCR加样操作允许在室温下进行。■ 防止交叉污染：允许加入经修饰的核酸和dUTP，可使用尿吡啶DNA糖基化酶（UNG）防止交叉污染。相关产品信息:产品 目录号 规格 FastStart Taq DNA Polymerase 12 032 902 001100 U12 032 929 001500 U（2*250U） 12 032 937 0011,000 U（4*250U） 12 032 945 0012,500 U（10*250U） 12 032 953 0015,000 U（20*250U） 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030010.html

   RNA定量在检测RNA样本时，需确保比色杯中去除了RNA酶，特别是在使用分光光度测定之后仍需回收这些RNA的情况下。该条件可通过使用0.1 M NaOH，1mM EDTA和不含RNase的水的顺序洗涤来实现。使用稀释RNA的缓冲液为分光光度计设定空白对照。   使用分光光度法测定RNA浓度在使用紫外通透的塑料比色杯的分光光度计中，测量260 nm的吸光值(A260)以确定RNA的浓度。为了确保获得有意义的结果，读值应在0.15与1.0之间。在260 nm波长下，1个单位的吸光值对应每毫升44 μg的RNA浓度（A260=1 → 44 μg/ml；基于标准的1 cm测光距离）。这一相关性仅对中性pH值条件下的检测有效。因此，如需稀释RNA样品，则应使用中性pH值的低盐缓冲液（例如10 mM Tris?Cl ，pH7.0）。在检测RNA样本时，需确保比色杯中去除了RNA酶，特别是在使用分光光度测定之后仍需回收这些RNA的情况下。这可以通过使用0.1 M NaOH，1mM EDTA和不含RNase的水的顺序洗涤来实现。使用稀释RNA的缓冲液为分光光度计设定空白对照。列举一个RNA定量中的计算实例如下：RNA定量举例RNA样品的体积= 100 μl稀释=10 μl RNA样品+490μl 10 mM Tris?Cl ，pH 7.0（1/50的稀释比）使用1 ml（已去除RNA酶）比色杯，检测稀释后样本的吸光度A260 = 0.2RNA浓度= 44 μg/ml x A260 x稀释系数= 44 μg/ml x 0.2 x 50 = 440 μg/mlRNA总量 =浓度x以毫升为单位的样品体积= 440 μg/ml x 0.1 ml = 44 μg RNA    确定RNA的品质RNA纯度在260 nm与280 nm读值之间的比例（A260/A280）能够反映RNA的纯度，因为如蛋白一类的污染物会吸收紫外光。不过，A260/A280的比值也受到pH值的显著影响。当使用没有缓冲能力的水时，pH值与A260/A280的比值结果都会发生大范围的改变。 较低的pH值会导致A260/A280的比值变小，对蛋白质污染的敏感性也会随之降低（3）。为了获得精确的比率，我们建议在微碱的低盐缓冲液中检测吸光度（例如10 mM Tris?Cl，pH7.5）。在10 mM Tris?Cl，pH 7.5缓冲液当中，纯RNA的A260/A280 比率约为1.9–2.1。注：某些分光光度计在检测纯RNA时，可常规获得高达2.3的比值。请确保使用同种溶液校准分光光度计。不过，为了准确确定RNA的浓度，我们仍建议使用中性缓冲液稀释RNA样本，因为吸光度和浓度（A260读值为1相当于44 μg/ml的RNA浓度）之间的关系是一个基于中性条件获得的吸光系数。RNA的完整度总RNA的完整度和大小分布可以通过变性的琼脂糖凝胶电泳、溴化乙锭染色或市售的检测系统（如QIAxcel系统或Agilent 2100 ）进行检测。每条核糖体RNA的富集区域在凝胶染色之后应显现为锐利的条带。28S核糖体RNA的条带亮度应为18S rRNA条带的两倍左右。如果某一泳道中核糖体RNA条带不够锐利，却出现小尺寸RNA的弥散情况，则很可能因为RNA样品在制备过程中发生了严重的降解。Agilent 2100 Bioanalyzer也能够提供RNA完整数目（RNA Integrity Number，RIN）这一参数，作为对RNA完整度的一个有用量度。在理想情况下RIN值应接近10，不过在许多情况下（特别是对组织样本来说），RNA品质主要取决于原始样本的保存情况。不同来源的核糖体RNA大小来源 rRNA 大小(kb) E. coli 16S 23S 1.5 2.9 S. cerevisiae 18S 26S 2.0 3.8 小鼠 18S 28S 1.9 4.7 人 18S 28S 1.9 5.0   RNA分析：分析凝胶变性凝胶分析的原理利用RNA在甲醛琼脂糖凝胶中的电荷迁移效应，可对RNA进行分离和鉴定。RNA不像DNA，它们具有复杂的二级结构，因此需使用变性凝胶。凝胶中的甲醛能够破坏RNA的二级结构，从而使得RNA分子严格按照电荷迁移的方式得到有效分离。在电场中，主链磷酸基团上所携带的负电荷使核酸分子向阳极移动。变性的RNA分子的迁移速率取决于它们的尺寸大小；不过片段大小与迁移速率之间并非线性相关，因为更大的片段会遇到更大的摩擦阻力，在凝胶中移动更为困难。琼脂糖凝胶分析是最为常用的RNA分析方法，通常依据RNA的大小相应选择合适分辨范围的琼脂糖凝胶。小的RNA片段，如tRNA或5S rRNA，可以使用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。可查阅分子生物学手册（2,4）以获得关于各类分析胶的详细信息。本节将针对甲醛琼脂糖凝胶电泳进行介绍。制备用于RNA分析的甲醛琼脂糖凝胶下列甲醛琼脂糖（FA）凝胶电泳方案能够提高凝胶分离及后续检测（例如RNA印迹）的灵敏度。本方案的关键特点在于使用了浓缩的RNA上样缓冲液，从而（相比传统实验方案）能够向凝胶中载入更大量的RNA样本。琼脂糖用于制备凝胶的琼脂糖是针对所分离RNA片段的大小来确定浓度范围的。对于大多数的目的RNA种类来说，使用1.0–1.2%（质量体积比）的琼脂糖浓度可获得最佳结果。对于较大的mRNA种类，降低琼脂糖浓度可能会有所帮助。如需分离更小的mRNA，琼脂糖浓度可提高至2%。对于较小的RNA种类，如tRNA或rRNA，则推荐使用聚丙烯酰胺凝胶电泳。请使用超纯琼脂糖，因为如多糖类、盐类和蛋白一类的杂质都会对RNA的迁移造成影响。小贴士：某些电泳槽的塑料不耐乙醇。请对此适当留意，并核对厂商的说明书。Total RNA-甲醛琼脂糖凝胶 每个泳道10ug RNA以上信息来源于QIAGEN: http://www.qiagen.com/cn/resources/molecular-biology-methods/rna/  阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030009.html

   RNA分离：起始材料的破碎和匀浆起始材料的有效破碎和匀浆对于所有总RNA分离操作来说都是必须的要求。破碎和匀浆是两个独立分开的步骤。破碎：对于组织结构、细胞壁和细胞质膜的彻底破碎对于释放样本中所有的RNA是绝对必要的。不同样本需要使用不同的方法以达到彻底的破碎效果。不完全的破碎会导致RNA得率的显著降低。匀浆：匀浆对于减少破碎后细胞裂解产物的粘性是十分必要的。匀浆能够切断高分子量的基因组DNA及其他高分子量的细胞组分，得到均匀的裂解产物。匀浆不够彻底会导致RNA结合效率的下降而显著降低得率。某些破碎方法能够同时对样本起到匀浆作用，而其他方法还是需要专门的匀浆步骤。表针对不同样本进行破碎和匀浆的准则全面概述了适用于多种起始材料的不同破碎和匀浆方法。当您针对所使用的起始材料选择合适的操作方法时，该表格可用来作为参考。下面也将针对破碎和匀浆方法进行更为详细的论述。使用玻珠研磨机进行破碎和匀浆在使用玻珠研磨机破碎样本的过程中，样本与珠子被一起进行高速搅拌。通过珠子与细胞碰撞时的流体动力切割和破碎作用，同步完成破碎和匀浆过程。破碎效率的影响因素有：珠子的大小和组成缓冲液与珠子的比例起始样本的数量搅拌速度和设定处理时间细菌破碎时所使用的理想珠型为0.1毫米（平均直径）的玻璃珠，用于酵母和单细胞动物细胞时为0.5毫米的玻璃珠，对动植物组织则应使用3–7毫米的不锈钢珠。请确保玻璃珠经过浓硝酸的预先润洗。或者可直接购买和使用市售的经酸洗涤过的玻璃珠。关于破碎的其他参数需要依据每一应用的经验进行设定。植物材料以及相关的珠子和破碎管可先在液氮中预冷，破碎应在无裂解缓冲液的条件下进行。对于动物组织则应使用干燥的冷冻粉碎。冷冻粉碎（无论是在玻珠研磨机中还是使用研钵和杵）不同于缓冲液裂解，不会对样本同时起到匀浆作用。使用转子——定子匀浆器进行破碎和匀浆在裂解缓冲液的存在下，转子–定子匀浆机可同时完成对动物组织的彻底破碎和匀浆，所需时间基于样本的坚韧程度，可在5–90秒内完成。转子–定子匀浆机也可以用于细胞裂解产物的匀浆。转子的超高速旋转能够以扰动和机械剪切的综合方式，完成对样本的破碎和匀浆。使用适当大小的管子，在匀浆过程中始终保证匀浆器头部一直处于浸没状态，并持续将匀浆器头部伸入管子末端，以确保匀浆过程中样本内的泡沫达到最少。转子–定子匀浆机有不同大小型号可供选择，并可装配不同大小的探头。5 mm和7 mm的探头适合在300 μl以下的体积内使用，并可用于离心管内的匀浆。10 mm及以上尺寸的探头则适用于更大的管子。使用研钵和杵破碎使用研钵和杵破碎时，先将样本进行迅速的液氮冷冻，并在液氮中将其研磨为细粉。将上清液（组织粉末和液氮）转移至液氮预冷的适当大小的管中，使液氮挥发但不要让样品融解。加入裂解缓冲液，并尽可能快地进行后续步骤。注：使用研钵和杵研磨样品会破碎样品，但无法达到匀浆的目的。匀浆作用需与此步骤分开进行。使用注射器和针头完成匀浆细胞和组织的裂解产物可以使用注射器和针头进行匀浆。可以使用20号（0.9 mm）针头连接一个灭菌塑料注射器，通过至少5–10次的吹打切断高分子量的DNA，直至裂解产物的匀浆形成。为操作便利和减少样品损失，也可能需要增加裂解缓冲液的体积。   针对不同样本进行破碎和匀浆的准则起始材料 破碎方法 匀浆方法 评论 培养的动物细胞 加入裂解缓冲液 使用转子–定子匀浆机或注射器和针头获取胞质RNA 如果处理少于1x105个细胞，可以使用涡动匀浆裂解产物。不提供匀浆方案。 动物组织 转子–定子匀浆机 转子–定子匀浆机 同步进行破碎和匀浆 动物组织 研钵和杵 注射器和针头 使用转子–定子匀浆机和玻珠研磨机通常比使用研钵和杵的得率更高。 动物组织 玻珠研磨机 玻珠研磨机   细菌 加入裂解缓冲液进行酶（溶菌酶）解 涡旋机 如果处理大于5x108个细胞，使用注射器和针头进行匀浆可能会增加得率。 细菌 玻珠研磨机 玻珠研磨机 玻珠研磨机可同时完成破碎和匀浆；不能使用涡动操作代替玻珠研磨机。 酵母 酶解（溶菌酶/消解酶）细胞壁后加入裂解缓冲液，以消化原生质球。 涡旋机   酵母 玻珠研磨机 玻珠研磨机 玻珠研磨机可同时完成破碎和匀浆；不能使用涡动操作代替玻珠研磨机。 植物和丝状真菌 研钵和杵 注射器和针头 研钵和杵不能代替转子–定子匀浆机。   从不同样本来源分离RNA的特别注意事项一些样本来源在其RNA或内含物方面存在着显著不同，可能导致RNA的分离和分析过程出现问题。当操作这些样本来源时需要一些特别注意事项。本节将针对大量不同样本来源的操作进行探讨。植物从植物材料中分离RNA会遇到一些特殊困难，常规技术在用于植物样本之前一般要先经过条件优化。一些植物代谢产物的化学性质与核酸相似，导致其难于从RNA制备产物中除去。（使用不当的）纯化方法（如盐类或苯酚）所导致的代谢物（例如多糖类、多酚类和黄酮类）或污染物与目的RNA的共分离，可能造成对酶促反应的抑制，或导致紫外分光光度测定和凝胶电泳结果上的偏差。从植物材料中分离RNA的过程中可能遇到的困难还包括由于较高粘性导致的吸取体积错误，以及储存过程中的RNA降解问题。通常对植物的生长条件进行优化，使其不产生高水平的植物代谢产物，可有助于对RNA的有效分离。由于植物种类之间存在较大差异，因此对其生长条件很难有同一的指导标准。不过作为普适原则，建议尽可能使用健康幼嫩的植物组织。年轻植物组织的RNA得率通常高于年老组织，因为前者在等重条件下通常比后者包含更多的细胞。而且等重的年轻组织通常也包含更少的代谢物。此外，许多“自定义”的RNA分离方法都推荐将植物组织在黑暗中培养1–2天后再进行收获，以避免形成植物代谢物的高水平积累。心脏、肌肉和皮肤组织从例如骨骼肌、心脏和皮肤组织一类的样本中分离RNA可能比较困难，因为此类样品中含有大量的收缩性蛋白、结缔组织和胶原。为了去除这些可能对RNA分离造成干扰的蛋白，需要使用蛋白酶或含苯酚的裂解试剂对此类样本进行处理。不过，蛋白酶的消化过程需要避免RNA发生降解。细菌细菌mRNA的很多基本特征都不同于真核生物的mRNA。原核生物的mRNA没有5'帽子，也很少具有poly A尾。缺少poly A尾的mRNA无法通过杂交进行捕获。另外，也无法在合成初始链的过程中使用寡聚脱氧胸腺嘧啶核苷（oligo–dT）引物，只能使用随机引物作为替代。此外，细菌RNA也十分地不稳定，快速生长的品种中RNA的平均半衰期约为3分钟。某些细菌的mRNA在翻译同时即发生降解。因此对于尝试从细菌中分离mRNA的研究人员来说，这可算是一个大麻烦。也由于细菌中的mRNA的周转（从生成到降解）非常快，造成原核生物的基因表达研究比真核生物更为困难。为了精确地保留基因表达谱，并使完好mRNA的得率最大化，在样本获取和加工之前需要对其进行稳定处理。血液血液直接源于临床分析的收集样本。在收集管中使用RNA稳定处理试剂可成功保存血液样本的RNA。从血液中分离RNA的方法，需要能够确保生成无污染物或酶抑制剂的高质量RNA。血液中所含有的大量酶抑制剂会对下游的RNA分析造成干扰。此外，如肝素和EDTA等一类常规的抗凝血剂也会干扰下游分析。应注意抗凝血剂并不会对RNA起到稳定化作用。人类血液中的红血球（血红细胞）不含细胞核，因此不会合成RNA；通常情况下这类细胞仅含有非常微量的RNA，而不是RNA分离的主要对象。从全血中分离RNA的主要靶标细胞为白血球（白细胞），这类细胞含有细胞核和RNA。白血球由三种主要的细胞类型构成：淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。由于健康的血液中所含的红细胞数量约为白细胞的1000倍，去除红细胞会有助于简化RNA分离步骤。可通过选择性地裂解红细胞来达到此目的，因为红细胞对低渗休克更为敏感（相比白血球），在低渗缓冲液中会迅速发生破裂。裂解红细胞的另一种常见替代方法是Ficoll密度——梯度离心法。与红血球裂解法不同，Ficoll密度——梯度离心法仅获取单核的细胞（淋巴细胞和单核细胞），而会去除粒细胞。经Ficoll密度––梯度离心法分离出的单核细胞能够使用与其他动物细胞一样的方法进行RNA分离。FFPE组织样品福尔马林固定，石蜡包埋(FFPE)的组织样本是生物医学研究中的重要和广泛的样本来源。越来越多的研究者开始针对FFPE样本开始分子水平的分析，因此考虑这些样本的独特属性以发展针对性的分离方法变得越来越重要。由于在固定和包埋过程中使用了甲醛，通常会使FFPE样本中的核酸发生严重的片段化和化学改变。因此，从FFPE样本中分离到的核酸会比新鲜样本或冰冻样本的分子量更低。其片段化程度基于样本类型、保存期长短，以及固定、包埋和储存的条件而发生变化。尽管在凝胶电泳或芯片实验室（lab–on–a–chip）分析等标准质量控制分析中无法测得甲醛修饰情况，但后者实际会对酶学分析造成严重干扰。为了将FFPE储存法对RNA转录物的影响降至最低，应牢记下列小贴士：尽可能快地取样和固定组织不要使用厚度超过5 mm的样本，样本固定时间不宜过长（最长24小时）使用优质的试剂进行石蜡包埋，不要加入其它添加剂尽可能避免对样本进行染色适当地储存FFPE样本（RNA在4°C可完好保存至1年，优于保存在室温或更高温度）使用适当的脱石蜡步骤RNA分离应包含一个解交联的步骤   特定RNA病毒科 病毒 基因组 Adenoviridae Adenovirus dsDNA Arenaviridae Lassa virus ssRNA Bornaviridae Borna disease virus ssRNA Bunyaviridae Hantaan virus ssRNA Caliciviridae Hepatitis E virus, Norwalk virus ssRNA Filoviridae Ebola virus ssRNA Flaviviridae Hepatitis C and G viruses, Dengue virus ssRNA Hepadnaviridae Hepatitis B virus ss/dsDNA Herpesviridae Herpesviruses (HSV; CMV; EBV; HHV6, 7, 8) dsDNA Papovaviridae Human papillomavirus, JC virus ssDNA Paramyxoviridae Parainfluenza virus, respiratory syncytial virus, rubulavirus ssRNA Parvoviridae Parvovirus B19 (erythrovirus) ssDNA Picornaviridae Coxsackie virus, foot-and-mouth disease virus, hepatitis A virus, poliovirus, rhinovirus ssRNA Reoviridae Rotavirus dsRNA Retroviridae Human foamy virus, human immunodeficiency virus, human T-cell leukemia virus ssRNA Rhabdoviridae Rabies virus ssRNA   RNA的储存 纯RNA可以储存在–20°C或–70°C的不含RNase的水中。在上述条件下，1年内都不会发生RNA降解。以上信息来源于QIAGEN官网：http://www.qiagen.com/cn/resources/molecular-biology-methods/rna/  阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030008.html

   RNA操作常见注意事项核糖核酸酶（RNase）是非常稳定、活跃的酶，它们通常不需要辅因子就能发挥功能。由于核糖核酸酶难以失活，并且很小的量就足以破坏RNA分子，因此在没有事先消除任何可能的核糖核酸酶污染的情况下，不要使用任何塑料或者玻璃器皿。处理RNA时应非常小心，以避免在纯化的过程中或者纯化之后，将核糖核酸酶无意的引入到RNA样品中。为了创造并维持没有核糖核酸酶的环境，在预处理以及使用一次性和非一次性的器皿和溶液处理RNA时，一定要采取以下预防措施。常规操作处理RNA时，一定要使用合适的微生物学的无菌技术。手和灰尘颗粒可能会携带细菌和霉菌，是最常见的核糖核酸酶污染源。为了阻止来源于皮肤表面或者实验室器械灰尘上的核糖核酸酶污染，在操纵试剂以及RNA样品的时候，一直要佩戴乳胶手套或者乙烯基手套（PVC手套）。可能的情况下，要经常更换手套，并将试管处于关闭状态。当用移液管吸取溶液用于下游应用时，要将纯化过的RNA放在冰上。为了去除工作台表面、非一次性塑料器皿和实验室器械（比如，移液管和电泳槽）上的核糖核酸酶污染，推荐使用市售核糖核酸酶去除溶液。也可以使用常见的实验室试剂去除核糖核酸酶的污染。为了去除塑料器皿上的污染，使用0.1 M NaOH, 1 mM EDTA洗涤，然后使用去RNase的水洗涤；如果塑料器皿具有耐氯仿性，则可用氯仿洗涤。为了去除电泳槽的污染，可使用去污剂清洁（比如，0.5%的SDS），使用去RNase的水洗涤，然后用乙醇洗涤（如果电泳槽具有耐乙醇性），之后晾干。重要：在使用化学试剂时，一定要穿戴合适的实验工作服，一次性的手套，以及具有护目镜。请参考产品厂商提供的相应安全数据说明书（SDS），了解更多信息。一次性塑料耗材在处理RNA的时候，推荐使用无菌的，一次性的聚丙烯管。这些试管通常没有核糖核酸酶，因此不需要预处理使核糖核酸酶失活。非一次性的塑料耗材非一次性的塑料耗材在使用之前应该进行处理，以确保其不含有核糖核酸酶。塑料耗材应该严格的使用0.1 M NaOH、1 mM EDTA洗涤，然后用去RNase的水洗涤。具有耐氯仿性的塑料耗材可以使用氯仿洗涤，以使核糖核酸酶失活。玻璃器皿玻璃器皿在使用之前，应该进行处理，以确保其不含有核糖核酸酶。用于处理RNA的玻璃器皿在使用之前，应该使用去污剂清洁，严格的洗涤，并在240°C的烘箱中烘烤至少4小时（如果更方便的话，可以过夜）。也可以使用DEPC（焦碳酸二乙酯）处理玻璃器皿。使用0.1%的DEPC（0.1%的水溶液）充满玻璃器皿，在37°C的条件下过夜（12小时），然后使用高压釜处理或者加热到100°C 15分钟，以去除剩余的DEPC。重要：在使用化学试剂时，一定要穿戴合适的实验工作服，一次性的手套以及护目镜。请参考产品厂商提供的安全数据说明书（SDS），了解更多信息。电泳槽电泳槽应使用去污剂（比如，0.5%的SDS）清洁，严格的用去RNase的水洗涤，然后使用乙醇洗涤，之后晾干。重要：在使用化学试剂时，一定要穿戴合适的实验工作服，一次性的手套以及护目镜。请参考产品厂商处提供的相应安全数据说明书（SDS），了解更多信息。重要：一些电泳槽使用的塑料不具有耐乙醇性，需要仔细查阅厂商说明书。溶液溶液（水或者其它溶液）应该使用0.1%的DEPC处理。DEPC是一种强大但非绝对的RNase抑制剂，它通过共价修饰RNase发挥作用。重要：在使用化学试剂时，一定要穿戴合适的实验工作服，一次性的手套以及护目镜。请参考产品厂商提供的相应安全数据说明书（SDS），了解更多信息。   不含RNase的溶液的制备溶液（水或者其它溶液）应该使用0.1%的DEPC处理。DEPC是一种强大但非绝对的RNase抑制剂。浓度为0.1%的DEPC经常用于处理玻璃或者塑料耗材，以使其表面的RNase失活，或者制备不含RNase的的溶液和水。DEPC通过共价修饰使RNase失活。在100 ml要处理的溶液中加入0.1 ml DEPC，大力的摇晃，以使DEPC充分进入溶液。将溶液在37°C的条件下孵育12个小时。在高压灭菌器内处理15 min以去除任何DEPC的痕迹。DEPC与伯胺发生反应，因此不能直接用于处理Tris缓冲液。在Tris缓冲液存在的条件下，DEPC非常不稳定，迅速分解为乙醇和CO2。在制备Tris缓冲液时，应先使用DEPC处理水，然后将Tris溶解以制备合适的缓冲液。痕量的DEPC会通过乙酰基化作用，与RNA分子中的嘌呤残基反应，将其修饰。在细胞外的环境中，乙酰基化的RNA分子以很低的效率被翻译。但是，除非有大量的嘌呤残基被修饰了，否则不会严重的影响这些RNA分子杂交形成DNA：RNA或者RNA：RNA杂交物的能力。溶液或者器皿上残留的DEPC，一定要在高压灭菌器中处理或者加热到100°C处理15 min，以便除去。重要：在使用化学试剂时，一定要穿戴合适的实验工作服，一次性的手套以及护目镜。请参考产品厂商提供的相应安全数据说明书（SDS），了解更多信息。   生物样本中RNA的稳定处理为了确保基因表达分析的精确性，所分析的RNA应能够准确地反映出其在生物样本中的体内表达情况。但实际在样本的操作和RNA的分离过程中，RNA很容易发生改变而使情况变得复杂。生物样本一经提取，其中的RNA即变得极不稳定。期间所发生的人为影响主要分成两种。基因的下调和RNA的酶促降解会导致mRNA特异性或非特异地发生人为降低。同时在操作和加工样本的过程中，某些基因会被诱导表达。这两种效应的综合可能在检出的转录谱与体内真实情况之间造成偏差。对RNA表达谱进行即刻的稳定化处理是精确基因表达分析中的首要事项。通常情况下，用于RNA分析的样本被迅速置于液氮中冷冻，在进一步处理之前一直储存于–80°C下。产品供应商也提供了一些稳定处理试剂，作为替代方法对生物样本中的RNA进行稳定化处理。这些供应商提供了集成化的样本处理溶液（套装），其中包括容器，稳定处理试剂及制备试剂盒RNA的大小和分子量 不同RNA的大小和分子量 RNA 核苷酸 分子量（道尔顿） E. coli tRNA 5S rRNA 16S rRNA 23S rRNA75 120 1541 29042.6 x 104 4.1 x 104 5.2 x 105 9.9 x 105 果蝇 18S rRNA 28S rRNA1976 38986.7 x 105 1.3 x 106 小鼠 18S rRNA 28S rRNA1869 47126.4 x 105 1.6 x 106 兔子 18S rRNA 28S rRNA2366 63338.0 x 105 2.2 x 106 人 18S rRNA 28S rRNA1868 50256.4 x 1051.7 x 106来自参考文献2。换算为核酸：RNARNA分子量和摩尔换算 单链RNA分子的MW（钠盐）= (碱基数量) x (343道尔顿/碱基)RNA摩尔换算* RNA微克量 皮摩尔 分子 1.0 1.67 1.0 x 1012 0.6 1.0 1.0 x 1011* mRNA平均长度为1930个核苷酸。以上信息来源于QIAGEN 官网：http://www.qiagen.com/cn/resources/molecular-biology-methods/rna/  阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030007.html

   何为RNA?RNA是具有多种不同的功能的生物大分子。信使RNA（mRNA）是DNA转录得到的，用做蛋白质合成的模板。蛋白质的合成是由核糖体完成的，核糖体由核糖体RNA（rRNA）和蛋白质组成。用于蛋白合成的氨基酸，是通过转运RNA（tRNA）输送到核糖体上的。RNA分子也是参与RNA转运过程的核糖蛋白的一部分。非编码RNA也是非常重要的。它们是不翻译成蛋白质的功能RNA分子。这样的RNA分子包括tRNA、rRNA、核仁小RNA（snoRNA）、微小RNA（miRNA）、小干扰RNA和piwi-interacting RNA（piRNA）。它们通常在基因表达的调控中发挥作用。miRNA是一类内源性的（自然产生的），约18–24个核苷酸大小的非编码RNA，在转录后的基因调控中发挥作用。一个miRNA可能在每个细胞中有超过105个拷贝，但是从每个细胞中总RNA质量的角度来看，这些RNA又是微不足道的。由于它们非常短，因此通常需要特别的分离和分析方案。一个典型的快速生长的哺乳动物细胞培养中,每个细胞大约含有10–30 pg的RNA，而一个完全分化的原代细胞中，RNA的量要少得多——大约每个细胞中RNA的含量小于1 pg。细胞中的RNA分子主要是tRNA和rRNA。mRNA大约占细胞中RNA总量的1–5%，但是具体的量取决于细胞类型和细胞的生理状态。一个动物细胞中，大约有360,000个mRNA分子，组成了大约12,000个转录本，一个典型转录本的长度大约为2 kb。一些mRNA分子占到了总mRNA的3%，而其它的mRNA分子的含量低于0.01%。这些“稀有的”或者“低丰度”的mRNA分子在每个细胞中只有5–15个拷贝。但是，这些稀有的mRNA大约有11,000种，占到了mRNA数量的45%。一个生物体中的基因是相对固定的，因此，mRNA的组成代表了在给定的条件下，基因的表达方式。使用杂交技术，包括RNA印迹法（northern印迹）和微阵列分析，或RT-PCR技术、转录本测序技术（RNA-seq）对RNA进行分析，能够充分反映一个生物体中的基因表达谱。但是，与DNA相比，RNA相对不稳定。这很大程度上是由于存在会降解RNA分子的核糖核酸酶(RNases)。核糖核酸酶非常的稳定，不需要辅因子，在非常低浓度的时候就有很高的催化效率，并且不容易失活。核糖核酸酶的污染可以来自于人类的皮肤和携带有细菌和霉菌的尘埃颗粒。因此，RNA的分离和分析需要特别的技术。   一个典型人类细胞的RNA含量参数 量 每个细胞中的总RNA    在一个典型哺乳动物细胞中RNA的分布RNA种类 相对的量 rRNA (28S, 18S, 5S) 80–85% tRNAs, snRNAs, low MW species 15–20% mRNAs 1–5%   基于丰度的mRNA分类丰度 拷贝/细胞 每个细胞中不同mRNA的数量 每种mRNA的丰度 低 5–15 11,000    不同细胞和组织中的RNA含量器官 来源 总RNA (μg)* 细胞培养液 (1 x 106个细胞) NIH/3T3 HeLa COS-7 LMH Huh 10 15 35 12 15 小鼠/大鼠组织 (10 mg) 胚胎(13-day) 肾肝脾胸腺肺 25 20–30 40–60 30–40 40–50 10–20 酵母 (1 x 107个细胞) S. cerevisiae 25 植物 (100 mg叶片) 拟南芥玉米西红柿番茄 35 25 65 60* 由于物种、发育阶段和生长条件的不同，含量有可能不同。   microRNA小RNA（miRNA）是一类内源性的（自然产生的），约22个核苷酸的非编码RNA分子，它们参与转录后的基因调控。它们与siRNA分子具有类似的特征。miRNA分子在很多生物学过程中发挥了重要作用，包括细胞的分化和发育，细胞信号转导和对感染的应答等。大量的证据显示，miRNA表达的紊乱是一些疾病发生的原因和标志，包括多种癌症。在血清和血浆中可检测到无细胞的miRNA分子，而疾病会导致它们表达水平变化。这些发现，使得无细胞miRNA的表达很可能作为疾病诊断和预防中的生物标志物。miRNA和siRNA的途径都与双链RNA相关，但是这些RNA分子的来源不同。与诱导RNA干扰的双链RNA不同，miRNA是由基因组编码的。除此之外，miRNA的前体（pre-miRNA）不完全是双链的，而是包含有双链区域的发卡结构。与RNAi不同（参考RNAi），miRNA的作用主要是调节细胞自己的基因。人类具有超过2000种miRNA分子，据估计，它们调节超过三分之二的人类基因。miRNA系统是调节基因表达的内源性机制。成熟的miRNA分子，主要通过翻译抑制来调控内源性基因的表达。除此之外，miRNA能通过快速的脱腺苷化作用和去除帽子来摧毁mRNA。自然生成的miRNA分子的结合位点，通常在目标mRNA 3’端的非翻译区。在动物的miRNA分子中，序列的部分匹配给确定真正的结合位点带来困难，并且降低了结合位点确定的准确性。   miRNA模拟物和抑制剂miRNA 模拟物是化学合成的，双链RNA分子（通常长度为18–24个核苷酸），通过转染到细胞中，模拟成熟的内源性miRNA分子。miRNA抑制剂是单链（通常长度为21–25个核苷酸），经过修饰的RNA分子，通过转染到细胞中，特异性的抑制miRNA的功能。模拟物和抑制剂包含一些化学修饰，以便提高活性或者增强其在体内的稳定性。通过将miRNA模拟物转染到细胞中，并进行下游的基因表达分析或者表型分析，可以阐明特定miRNA分子的目标和发挥的作用。这些实验可以研究单个miRNA错误调节所造成的生物学影响，也能用于确定某个miRNA分子的特异性靶标基因。miRNA转染之后，如果降低或者提高基因的表达水平，说明研究的miRNA参与调节了这个基因的表达。类似的，miRNA在很多通路中的作用，都可以通过检测miRNA模拟物或者抑制剂转染之后的特定表型来研究。miRNA模拟物/抑制剂转染对于下游应用的影响，通常可以通过如下方案来分析：携带有报告基因，比如荧光素酶，和一个或者多个位于3’端非翻译区的miRNA结合位点的质粒载体做为miRNA的靶标。miRNA的模拟物/抑制剂与载体共转染到细胞中。在转染之后，进行报告基因检测实验，比如荧光素酶检测实验。通过将上述转染的结果与只转染质粒载体的结果比较，确定miRNA模拟物和抑制剂的影响。将miRNA的模拟物/抑制剂转染到细胞中，然后检测相关的内源性基因（即所研究的miRNA分子的靶标）的表达。通过将结果与未转染的细胞或者转染了阴性对照的细胞的表达结果相比，可以确定miRNA模拟物/抑制剂的作用。由于miRNA通常抑制目标基因的翻译，而不降解目标基因的转录本，因此，一般通过检测蛋白的表达水平来确定基因的表达水平，比如通过蛋白质印迹法。这意味着miRNA模拟物/抑制剂的影响通常不能通过定量的real-time PCR 来检测。   siRNA和RNAisiRNA小干扰RNA（通常称做siRNA）参与多种生物学过程——最常见的是RNA干扰或者RNAi。大多数RNA是单链的，但是，siRNA由两条互补的核酸链组成，与DNA类似。siRNA的长度大约为20–25个核苷酸。siRNA在RNAi过程中扮演了重要角色，它们通过互补的核苷酸序列来干扰特定基因的表达。长度为21个核苷酸的双链siRNA分子的一些近似值：20 μM的siRNA相当于浓度大约为0.25 μg/μl长度为21个核苷酸的siRNA的分子量大约为13–15 μg/nmolRNAiRNA干扰（或者RNAi）是细胞中的一种自然发生的过程，它能够关闭或者沉默特定基因的活性。RNA干扰于1998年被发现，现在已经是研究基因功能的强大工具。RNAi通过干扰信使RNA（mRNA）所携带的信息发挥作用，从而抑制蛋白的合成。mRNA失去活性，基因也就失活了。诱导RNAi的双链RNA分子（siRNA），在进入细胞之后，被Dicer酶切割成小的片段。这些小的片段，作为引导物，引导siRNA与具有互补序列的mRNA相结合。然后，这些细胞内的mRNA被切割，从而有效地破坏了它们所携带的信息，并且沉默相应基因的表达。RNAi的过程相当复杂。双链RNA被RNase III识别，然后切割成21–23个核苷酸大小的siRNA分子。这些siRNA分子参与组成了称做RISC（RNA-induced silencing complex，RNA 诱导的沉默复合物）的RNAi靶标复合物，这些复合物能够破坏与siRNA同源的mRNA分子。靶标mRNA分子在其与siRNA分子序列互补区域的中心处被切割，然后导致靶标mRNA分子被降解，降低了蛋白的表达。使用siRNAsiRNA分子是RNAi过程中的主要效应因子，可以通过化学方法或者酶催化的方法在体外合成。siRNA的序列设计对于有效的基因沉默是非常关键的，它们的设计方法是基于对RNAi过程的理解，以及对天然存在的siRNA分子的功能的理解，开发出来的。siRNA的输送对于基因沉默实验是至关重要的。合成的siRNA分子可以通过电穿孔或者亲脂的试剂，输送到细胞内。但是，这两种方法都是暂时的。质粒系统能够用于表达短发卡RNA（shRNA）分子，它们是Dicer酶的底物，在体内能成熟成为siRNA分子。这样的系统能稳定地抑制目标基因的表达。也有一些病毒输送系统，能够将shRNA输送到难于转染的细胞系中。 RNAi实验原理及流程以上信息来源于QIAGEN官网：http://www.qiagen.com/cn/resources/molecular-biology-methods/rna/   阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030006.html

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罗氏 Apotptic DNA Ladder Kit使用凝胶电泳通过DNA Ladder分析检测凋亡，将将基因组DNA切割成组蛋白联合的DNA片断(单链及寡聚小体)，是凋亡细胞的生物学表现之一（图1）。通过纯化及琼脂糖电泳分析，这些DNA片断会呈现出典型的ladder状态（图2）。常规的DNA纯化方法包括苯酚氯仿萃取和DNA沉淀，试剂盒中提供的DNA纯化方法比常规方法操作更迅速。纯化后的DNA和上样缓冲液混合后直接进行检测。Apoptotic DNA Ladder Kit 能被用来：■ 20 分钟内从细胞样品中纯化出DNA。■ 相对简单的DNA 纯化，无需有机试剂萃取及DNA 沉淀操作。■ 试剂盒内配备对照样品（凋亡U-937 细胞片断化DNA 的冻干粉），使实验说明更简单。样品类型：全血或培养细胞。图1：DNA片断化的机理及DNA Ladder示意图 图2：:使用Apoptotic DNA Ladder Kit，显示凋亡细胞中出现的典型DNA ladder。M marker   - 对照细胞   + camptothecin 处理细胞 C 试剂盒中提供的阳性对照产品信息产品 目录号 规格 Apoptotic DNA Ladder Kit 11 835 246 001 1 kit (20 tests) 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030003.html

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BrdU Labeling and Detection Kit III (POD)使用比色ELISA检测细胞增殖，BrdU Labeling and Detection Kit III (POD) 是基于检测 5'-Bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) 的96 孔ELISA 式试剂盒（图1）。BrdU 是胸腺嘧啶的非放射性类似物，其能掺入到新增殖细胞的DNA 中。同放射性同位素技术相比，BrdU Labeling and Detection Kit III有许多优势。■ 避免使用放射性同位素，使用更安全。■ 数据准确性高，实验结果同[3H]- 胸腺嘧啶掺入法高度一致（图2）。■ 高灵敏度，其灵敏度同[3H]- 胸腺嘧啶掺入法一致（图1）。■ 节省时间，通过使用多孔ELISA 读板器能进行高通量实验。■ 节省经费，无需再使用其他昂贵的仪器及试剂。样品类型：96孔中培养的贴壁式悬浮细胞。图1：BrdU Labeling and Detection Kit III (POD) 原理示意图。     图2：（左）在AKR-2B 细胞（小鼠纤维细胞）中添加人表皮生长因子(human epidermal growth factor)，使用BrdU Labeling and Detection Kit III (●) 和[3H]-thymidine（●）掺入法检测细胞增殖。（右）7TD1 细胞（小鼠杂交瘤细胞）中添加重组小鼠interleukin-6 (mIL-6)，使用BrdU Labelingand Detection Kit III (●) 和 [3H]-thymidine 掺入法(●) 检测细胞增殖。结果：图2显示BrdU 法及[3H]-thymidine掺入法在进行细胞增殖检测时显示了相同的灵敏度。产品名称 目录号 规格 5′-Bromo-2′-deoxy-uridine Labeling and Detection Kit III 11 444 611 001 1 kit（1000tests） 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015030001.html

High Pure FFPET RNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理，在柱上直接进行高效DNase消化，在整合的实验流程中方便地去除残留DNA。图1：抽提获得宽泛的RNA片段范围，FFPET RNA抽提物片段长度范围在100-4000bp 使用3中不同的方法从乳腺癌组织的5um FFPET样品中抽提总RNA。绿色线显示了使用该方法抽提获得的RNA长片段极少，以RNA降解片段为主。灰色线显示的RNA抽提物覆盖的片段范围较广，但在短片段RNA的分布存在较大的偏倚性。 结果：罗氏High Pure FFPET RNA Isolation Kit的抽提产物（蓝色线）较均匀地覆盖了整个片段分布范围。图2：从近期和长期保存的FFPET样品中均可抽提获得高RNA得率    A）柱形图显示了从结肠癌组织和正常结缔组织10um FFPET切片样本中抽提获得的RNA平均得率（n=24）样本保存时间分别为＜6个月和＞5年。结果：罗氏High Pure FFPET RNA Isolation Kit能获得更高得率的RNA抽提产物。    B）显示了图A的最左侧两列柱状图，其24个重复样本各自的RNA得率。24个重复样本来自于组织的连续切片，以避免来自不同组织区域的核酸含量差异。结果：在常规研究中，同一组织样本的不同FFPET切片的核酸得率存在差异。但对于同一种样本，罗氏High Pure FFPET RNA Isolation Kit始终能获得更高得率的RNA抽提产物。图3：从样品中抽提获得高质量的RNA，提高RT-aPCR检测灵敏度。 作为qPCR实验中的核酸模板，要求高质量的RNA，即良好的核酸得率、纯度和片段大小分布，并能高灵敏度和不偏倚地检测模板基因的表达情况。 从3中不同异种移植物切片组织中抽提RNA，取150ng总RNA，使用Transcriptor Universal cDNA Master进行反转录反应，取10ng cDNA产物通过LightCycler 480 Real-Time PCR Instrument扩增检测ALAST基因表达情况。 结果：High Pure FFPET RNA Isolation Kit抽提获得的RNA模板（n=8）能在RT-qPCR实验中获得更高的检测灵敏度。产品信息产品 目录号 包装规格 High Pure FFPET RNA Isolation Kit 06 650 775 001 50次抽提反应 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015020028.html

罗氏细胞检测系列产品自问世以来，历经时间的考验，以其出色的品质获得了广大业界用户的支持和认可，相关文献达数千篇。罗氏细胞凋亡、细胞毒性及细胞增殖产品特性：? 检测范围广泛：可实现对细胞培养液、组织切片、单个细胞及细胞群落的分析检测，满足日益增长的高通量检测需求 。? 检测方法灵活：针对光学或荧光显微镜、流式细胞仪、ELISA 。? 操作安全：无需接触任何放射性同位素，简便易用 。? 产品线丰富：针对不同的细胞凋亡通路、细胞毒性和细胞增殖检测目的，有多种产品可供挑选 。罗氏应用科学部细胞凋亡、细胞毒性和细胞增殖研究产品总览细胞凋亡研究方向 检测对象 检测方法 检测样本 产品推荐 包装 货号 Caspase 活性 Caspase对角蛋白18的裂解作用 Western blot, 流式细胞仪，荧光显微镜或是光学显微镜(单细胞水平检测) 贴壁细胞，组织样本(福尔马林/石蜡包埋切片，恒冷箱切片) M30 CytoDEATH 100 μl (250 tests) 12 140 349 001 M30 CytoDEATH, Fluorescein 100 μl (250 tests) 12 156 857 001 Caspase 3活性 荧光ELISA 细胞裂解产物，重组Caspase 3 Caspase 3 Activity Assay 1 kit (96 tests) 12 012 952 001 Caspase 荧光ELISA 细胞裂解产物，重组Caspase Homogeneous Caspases Assay,fluorimetric 1 kit (100 tests on 96-well plates, 400 tests on 384-well plates) 03 005 372 001 Caspase对PARP的裂解作用 Western blot, 免疫沉降，免疫组织化学 细胞粗提物 Anti-Poly( ADP-Ribose)Polymerase (PARP) 100 μl (50 blots) 11 835 238 001 膜变化 质膜外侧的 磷脂酰丝氨 酸 流式细胞仪， 荧光显微镜或是光学显微镜 (单细胞水平检测) 贴壁或悬浮细胞，新鲜分离的细胞 Annexin-V-FLUOS 500 μl (250 tests) 11 828 681 001 Annexin-V-FLUOS Staining Kit 1 kit (250 tests) 11 988 549 001 Annexin-V-Alexa 568 500 μl (250 tests) 03 703 126 001 Annexin-V-Biotin 500 μl (250 tests) 11 828 690 001 DNA片段 DNA片段 凝胶电泳 全血或培养细胞 Apoptotic DNA Ladder Kit 1 kit (20 tests) 11 835 246 001 ELISA 细胞裂解物，细胞培养悬浮液，血清，血浆，贴壁细胞，悬浮细胞 Cell Death Detection ELISAPLUS 1 kit (96 tests) 11 774 425 001 Cell Death Detection ELISAPLUS,10x 1 kit (10x96 tests) 11 920 685 001 细胞裂解后的细胞质成分，离体细胞，组织匀浆 Cell Death Detection ELISA 1 kit (96 tests) 11 544 675 001 TUNEL (单细胞水 平检测) 细胞涂片，贴壁细胞，细胞甩片，冷冻或固定组织切片 In Situ Cell Death Detection Kit,AP 1 kit (50 tests) 11 684 809 910 In Situ Cell Death Detection Kit,POD 1 kit (50 tests) 11 684 817 910 贴壁细胞，悬浮细胞，细胞涂片，冷冻或石蜡切片 In Situ Cell Death Detection Kit,Fluorescein 1 kit (50 tests) 11 684 795 910 In Situ Cell Death Detection Kit,TMR red 1 kit (50 tests) 12 156 792 910 DNA合成 BrdU掺入 ELISA比色法 细胞裂解后细胞质组分，需要预先BrdU标记 Celluar DNA Fragmentation ELISA 1 kit (500 tests) 11 585 045 001细胞毒性研究方向 检测对象 检测方法 检测样本 产品推荐 包装 货号 质膜损伤 释放出乳酸脱氢酶(LDH) 比色法检测 细胞培养悬浮液 Cytotoxicity Detection Kit (LDH) 1 kit (2,000 tests) 11 644 793 001 Cytotoxicity Detection KitPLUS(LDH) 1 kit (400 tests in 96 wells) 04 744 926 001 1 kit (2,000 tests in 96 wells) 04 744 934 001 DNA合成 BrdU掺入 ELISA比色法 细胞培养悬浮液(不含细胞)，需要预先BrdU标记 Celluar DNA Fragmentation ELISA 1 kit (500 tests) 11 585 045 001细胞增殖研究方向 检测对象 检测方法 检测样本 产品推荐 包装 货号 代谢活性 存活细胞将四唑盐降解为formazan盐 ELISA 贴壁或悬浮细胞培养液 Cell Proliferation Reagent WST-1＊ 25 ml (2,500 tests) 11 644 807 001 8 ml (800 tests) 05 015 944 001 Cell Proliferation Kit I (MTT)＊ 1 kit (2,500 tests) 11 465 007 001 Cell Proliferation Kit I (XTT)＊ 1 kit (2,500 tests) 11 465 015 001 ATP水平 生物发光 真核细胞，原核细胞 ATP Bioluminescence Assay Kit HS II 1 kit [1,000 assays(microplate), 500assays (tube)] 11 699 709 001 ATP Bioluminescence Assay Kit CLS II 1 kit [1,600 assays(microplate), 800assays (tube)] 11 699 695 001 DNA合成 BrdU掺入 ELISA比色法 贴壁或悬浮细胞培养液 Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)＊ 1 kit (1,000 tests) 11 647 229 001 ELISA化学发光法 贴壁或悬浮细胞培养液 Cell Proliferation ELISA, BrdU (chemiluminescent)＊ 1 kit (1,000 tests) 11 669 915 001 ELISA比色法 贴壁或悬浮细胞培养液 BrdU Labeling and Detection Kit III (POD)＊ 1 kit (1,000 tests) 11 444 611 001 荧光显微镜或流式细胞仪 (单细胞水平检测) 培养或新鲜分离的细胞，组织块或切片 BrdU Labeling and Detection Kit I (Fluorescein) 1 kit (100 tests) 11 296 736 001 光学显微镜 ((单细胞水平检测) BrdU Labeling and Detection Kit II (AP) 1 kit (100 tests) 11 299 964 001 荧光显微镜或流式细胞仪 (单细胞水平检测) 培养或新鲜分离的细胞(经BrdU体外标记)，组织块(经BrdU体外标记)，冷冻或固定组织切片(经BrdU体内标记 的动物) In Situ Cell Proliferation Kit, FLUOS 1 kit (100 tests) 11 810 740 001 多种检测 培养或新鲜分离的细胞，组织块经BrdU体外标记)，冷冻或固定组织切片(经BrdU体内标 记的动物) Anti-Bromodeoxyuridine 50 μg (500 μl) 11 170 376 001 Anti-Bromodeoxyuridine-Fluorescein 50 μg (500 μl) 11 202 693 001 Anti-Bromodeoxyuridine-Peroxidase,Fab fragments 15 U 11 585 860 001 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015020027.html

ATP Bioluminescence Assay Kits通过检测ATP水平检测细胞增殖，活细胞需要不断以ATP 的形式输入自由能。因此，能通过检测ATP的增加水平检测细胞增殖。罗氏应用科学部提供两个高精度的检测试剂盒，通过荧光素酶发光对ATP 进行检测定量。■ 使用经典的生物发光测定ATP技术检测细胞增殖。■ 两个试剂盒满足不同实验需求。■ 极低浓度的ATP也能检测。■ 96孔板中贴壁及悬浮细胞均能检测。ATP Bioluminescence Assay Kit HS II    当需要高灵敏度检测时可使用ATP Bioluminescence Assay KitHS II。该试剂盒灵敏度比ATP Bioluminescence Assay Kit CLS II高10 倍（图1）。试剂盒内提供高效的细胞裂解试剂。样本类型：真核及原核细胞产品名称 目录号 规格 ATP Bioluminescence Assay Kit HS II 11 699 709 001 1 kit (1,000 assays[microplate]500 assays [tube]) ATP Bioluminescence Assay Kit CLS II    当有持续信号产生而需要高重复性结果时，使用ATP Bioluminescence Assay Kit CLS II ，该试剂盒适用于如酶动力学研究，代谢研究或偶联酶研究等（图2）。样本类型：真核及原核细胞产品名称 目录号 规格 ATP Bioluminescence Assay Kit CLS II 11 699 695 001 1 kit (1,600 assays[microplate]800 assays [tube])图1：ATP Bioluminescence Assay Kit HS II 和ATP Bioluminescence Assay Kit CLS II 灵敏度比较。图2： ATP Bioluminescence Assay Kit HS II 和ATP Bioluminescence Assay Kit CLS II 的光发生动力学。50 μl 10 pmol 的ATP，使用50 μl 的荧光素酶在黑色微板中进行检测。 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015020026.html

RealTime ready DNA Probes Master    RealTime ready DNA Probes Master是罗氏诊断公司最新推出的实时荧光PCR专用反应预混液，作为经典产品LightCycler® 480 Probes Master的升级版，专门用于对 LightCycler® 480或 LightCycler® 1536仪器的水解探针检测(如：UPL通用探针)。经过优化配方的全新预混液具有超强的室温保存稳定性，使您再也不用担心配制PCR体系的时间较长带来的荧光染料信号衰减可能性；并通过改进的粘性系数，有效避免了预混液在各种移液吸头上可能的残留；更可满足自动高通量 PCR 工作流程中的微量取液体积需要；是在罗氏LightCycler® 480或 LightCycler® 1536仪器上进行高效、高准确度的实时荧光PCR分析的最佳选择。图1: RealTime ready DNA Probes Master在室温下的超强稳定性 (0, 8, 24, 48 h). (total RNA 1:10 倍稀释 (500, 50 pg)，SD: 500 pg: 0.14, 50 pg: 0.14)产品特性?省时高效的PCR反应解决方案，方便的即用型试剂，含高效热启动酶。?超强的室温保存稳定性，专为长时间精细配制PCR反应体系的需要而优化，可于室温下储存超出 24 小时，PCR扩增结果不受影响(图1)。?优化的粘性系数和表面张力，有效控制预混液在各类吸头上的移液残留，无论是散装的国产吸头还是昂贵的进口品牌吸头，您都可以获得理想的PCR结果重复性。?支持μl 级的高精度移液和自动化工作站，同时支持10 – 50 μl的常规PCR体系以及0.5 – 2 μl的超微量体系.?随试剂盒附赠内参质控液，在LightCycler® 1536仪器上使用时，可对预混液以及探针、模板或引物是否正确移取进行监控，保证理想的微量PCR分析结果。?为LightCycler® 480和LightCycler® 1536仪器特别优化，在上述两款仪器上使用可得到最佳的实验结果。RealTime ready Cell Lysis Kit    RealTime ready Cell Lysis Kit 专为快速、高性能的基因表达研究设计，使用培养细胞为原材料，仅需2个步骤就可开始实时荧光PCR。试剂盒可在室温下，于5分钟内一次性完成3 - 30,000个细胞的裂解，裂解产物可直接用于cDNA的合成，省却了繁琐的RNA提取步骤。得到的cDNA适用于各个通量的实时荧光PCR分析(包括LightCylcer® 480， 96或384通量以及LightCylcer® 1536)。由于其简单易用的特性，RealTime ready Cell Lysis Kit可轻松整合至任意通量和需求的实验流程中，无论是手动还是自动化的基于细胞的基因表达分析。并与后续LightCycler ®和RealTime ready系列的分析试剂良好兼容。操作简便：简单的一步法细胞裂解程序替代烦琐的多步法RNA纯化方案，产物直接用于cDNA合成。迅速反应：室温下裂解样本仅需5分钟，无需其他处理步骤。减少中间处理步骤：在cDNA合成孵育期间进行DNase处理，通过简化的流程获得优质分析结果。应用范围广泛：支持自动化或非自动分析模式，96 至1536孔的实时荧光PCR通量；起始样本可从3个扩大至30000个培养细胞。RealTime ready RNA Virus Master    RealTime ready RNA Virus Master 专为一步法实时荧光PCR设计，进行快速、高灵敏度和高特异性的病毒RNA检测的实时荧光PCR反应预混液，可支持如甲型H1N1流感病毒、HAV病毒等。试剂盒内含Transcriptor Reverse 转录酶与具有特殊添加剂的 TaqDNA 多聚酶，使用该多聚酶进行 PCR反应，无需 +95?C激活。?一步法的“热启动”操作，同步实现高特异性的反转录和qPCR检测。?25 – 50 分钟完成45个循环的PCR反应。?50×高浓度Transcriptor反转录酶和Taq DNA聚合酶混合液，可从多种来源样本中检测10 到10 6 拷贝的病毒RNA。?专利的反应缓冲体系(US. 5677152)，无需额外的TaqDNA聚合酶的激活，就可快速、简便的进行热启动RT-PCR。图 4：实时即用型细胞裂解试剂盒加速工作流与柱纯化 High Pure RNA分离  试剂盒常规工作流的实时PCR结果。19个不同的参考基因检测显示，两种RNA分离技术实时PCR结果准确性、重现性较高，扩增阈值(Cqs)线性相关性较高。实验设置：30000 HeLa细胞/孔，用于RNA制备。使用 Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒进行RNA逆转录。于 LightCycler® 480仪器上(96-孔格式，20μl反应容量)，使用 LightCycler® 480 Probes Master与RealTime ready Human Reference Gene Panel进行实时PCR扩增。仅 75 分钟获得 qPCR 结果...... 订购信息货号 产品 新品上市 RealTime ready Cell Lysis Kit 06 366 821 001 50 x 40 μl reactions 05 943 523 001 500 x 40 μl reactions货号 产品   Transcriptor First Stand cDNA Synthesis KitSynthesis Kit 04 379 012 001 1 kit (50 x 20 μl rections) 04 896 866 001 1 kit (100 x 20 μl rections) 04 897 030 001 1 kit (200 x 20 μl rections)货号 产品 新品上市 RealTime ready RNA Virus Master 05 619 416 001 100 x 20 μl rections 05 992 877 001 1000 x 20 μl rections 05 502 381 001 RealTime ready DNA Probes Master (1,250 x 20 μl rections) 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015020025.html

无细胞体液包括：血浆或血清，脑脊液 ，尿液，其他无细胞体液，细胞培养上清液。QIAamp Viral RNA Mini Kit —— 从无细胞体液中纯化病毒 RNA1)快速纯化高品质病毒 RNA（见图 1）2)无需有机提取或乙醇沉淀3)重复性好，产量高4)完全去除污染物和抑制剂图1 扩增血浆中的RNA从血浆中纯化的1026 nt RNA片段的RT-PCR产物。将10倍梯度稀释液（如图所示）加入血浆，使用QIAamp Viral RNA Mini Kit纯化。M：分子量标准；C：阴性对照。QIAamp MinElute Virus Spin Kit —— 浓缩柱版，从血浆、血清或无细胞体液中同时纯化病毒 DNA 和 RNA1)快速纯化并浓缩高品质病毒 DNA 和 RNA（见图 2）2)无需有机提取或乙醇沉淀3)重复性好，产量高4)完全去除污染物和抑制剂5)洗脱体积可低至 20 μl6)有对应 Vacuum kit，真空操作更快更高效  图2高灵敏 PCR 检测。数据显示了低病毒滴度阳性样本的百分比，病毒核酸分别利用 QIAamp MinElute Spin or Vacuum Kit 进行纯化；结果显示，对于 95% 的置信区间内，离心操作对应的病毒滴度值为 27.25 IU / ml 和而真空操作过程则为 9.30IU/ml。QIAamp UltraSens Virus Kit —— 血清和血浆中浓缩和纯化病毒 DNA 和 RNA1)快速纯化并浓缩高品质的即用型病毒 DNA 和 RNA（见图 3）2)样本起始体积可多至 1 ml3)无需有机抽提或乙醇沉淀4)重复性好，产量高5)完全去除污染物和抑制剂图 3. 纯化获得的核酸在下游分析中有出色表现。利用QIAamp UltraSens 步骤从典型的病毒中纯化 RNA， 在LightCycler 上进行一步法 RT-PCR。geq/ml：每毫升中的基因组当量；–：阴性对照；M：分子量标准。（数据由德国汉堡 Artus GmbH 的 Thomas Laue 博士提供。）QIAamp UCP Pathogen Mini Kit —— 从全血、拭子、培养基或体液中纯化微生物 DNA1)从微量样本中纯化病原体(细菌和真菌) DNA 2)使用 Pathogen Lysis Tubes 对细胞进行高效的机械破碎3)简化的纯化流程，实验方案包括预处理步骤和真空或离心操作4)采用超级洁净生产过程（UCP）生产，确保无任何外源 DNA 污染QIAamp UCP Pathogen Mini Kit使用特制的样本预处理方案进行样本预处理。使用Pathogen Lysis Tubes进行机械破碎，可高效裂解革兰阳性或阴性细菌、酵母和其他真菌。QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit —— 用于从人类血清或血浆中浓缩并纯化游离 DNA 和 RNAQIAamp Circulating Nucleic Acid Kit 简化了从血清或血浆中纯化游离DNA 和 RNA 的过程，配合真空底座 QIAvac 24 plus 使用，一次可以从24 个血清 / 血浆样本中高效纯化并浓缩游离 DNA 和 RNA（见图 4）。1)起始体积高达 5 ml，洗脱体积低至 20 μl2)高效回收 DNA 片段和 RNA3)无需有机溶剂抽提或乙醇沉淀4)完全去除杂质和抑制剂5)高度适合 NIPT 产前诊断核酸纯化在24个血浆样本中加入同等量的DNA片段（200 bp和1000 bp）。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit从5 ml血浆中纯化DNA，洗脱体积为80 μl。使用QuantiTect Multiplex PCR Kit对每个DNA片段特异性的66 bp靶点进行双重real-time PCR，定量DNA的产量。miRNeasy Serum/Plasma Kit —— 从血浆和血清中纯化包括 miRNA 的总RNA循环 miRNA 可作为检测不同癌症及其他疾病（如糖尿病）的潜在生物标志物。miRNeasy Serum/ Plasma Kit 能够从少量的血浆或血清中纯化包含 miRNA 的总 RNA。QIAGEN 同时提供miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control，适用于研究血清或血浆样品时的标准化。纯化得到的miRNA 之后可用 miScript PCR System 进行表达分析，用于发现生物标志物。1)从多至 200 μl 血清或血浆中纯化包含 miRNA 的总 RNA2)硅胶膜技术确保无盐或苯酚的污染3)洗脱体积低至 10 μl，最大程度确保 miRNA 高浓度4)可在 QIAcube 上进行自动化纯化无细胞体液核酸纯化产品列表：产品名称 货号 QIAamp Viral RNA Mini Kit (50) 52904 QIAamp UltraSens Virus Kit (50) 53704 QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (50) 55114 QIAamp DSP Circulating NA Kit (50) 61504 QIAamp MinElute Virus Spin Kit (50) 57704 QIAamp DSP Virus Kit 60704 QIAamp DSP Virus Spin Kit (50) 61704 miRNeasy Serum/Plasma Kit (50) 217184 miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control 219610以上信息来源于QIAGEN官网！ 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015020024.html