Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础，具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证，包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选，能够实现各种细胞功能的分析：细胞活性和细胞毒性细胞增殖和细胞周期细胞凋亡自噬氧化应激内吞作用和吞噬作用细胞内离子    本文为大家介绍细胞凋亡的产品。   细胞凋亡(细胞程序性死亡)是细胞正常发育过程中，由遗传控制的细胞消亡现象。凋亡调控异常与许多疾病状态有关，例如阿尔茨海默病、中风以及癌症。区别于坏死细胞的是，凋亡细胞的形态学特征为核染色质固缩、细胞皱缩以及产生膜包裹凋亡小体。细胞凋亡的生物化学特征在于基因组的片段化及几种细胞蛋白的解离或降解。   与细胞活性一样，无法通过任何单一参数来准确界定细胞彻底死亡；因而采用几种不同的方法研究细胞凋亡通常十分有利。候选抗肿瘤药物若无法诱导细胞凋亡，其临床功效通常较差，因此凋亡分析成为重要的高通量药物筛选工具。     阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030029.html

   氧代谢的平衡对于机体的生理功能和代谢过程极其重要，机体对于低氧或者缺氧的条件具有适应能力。缺氧是造成细胞损伤的最常见原因，可以诱发体内各系统的功能改变，是引起临床各科多种疾病甚至死亡的最重要和最常见的直接因素或主要病理过程之一，因此该领域的研究越来越受到关注。   缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factors，HIF)是细胞在基因转录水平协调缺氧变化的最主要的调节因子，广泛表达于哺乳动物各种组织细胞中，是一种介导哺乳动物细胞内低氧反应的核转录复合体，其表达调控与肿瘤发生发展和某些疾病的病理生理过程密切相关。深入研究HIF-1及其调控基因的作用机制，能够为临床心、脑、肺等疾病的研究提供较好的途径。　　Novus作为全球知名抗体公司，拥有最全面的组织缺氧研究产品，其中畅销产品HIF-1 alpha抗体（NB100-105）被引用410次。 组织缺氧产品详情， 敬请关注：http://www.novusbio.com/research-areas/hypoxia.html   阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030028.html

    阅读原文：http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014030027.html

 打开工具地址：http://us.ebioscience.com/resources/fluorplan-spectra-viewer.htm该工具的运行需要Java环境，如果您没有安装Java，请先点击“Get Java”安装。此时您就可以看到FluorPlanTM的超炫界面了。上半部分是直观的荧光光谱图下半部分是机型和荧光素的选择框，您可以通过下拉或者勾选的方法，来适应您的需要。在Cytometer Configuration选项中的Set Cytometer后通过下拉的方式选择您使用的流式细胞仪机型，如CantoII：软件中的机型名称后有一个括号，其中的“2/4/2”代表该机型有三个激发光（405nm、488nm、633nm），分别对应的检测通道有2个、4个和2个。点击激光后面的+，即可将这些通道都展开。如果您的机器只有两个激发光，比如蓝光和红光，您可以把405nm的激发光取消勾选。此时光谱图上仅显示蓝光和红光的通道和默认选择的适合荧光素：为了看的更清楚，我们可以将激发光谱取消勾选，只留下我们最需要关注的发射光和检测通道：每个荧光素的位置可以下拉选择其他的荧光素，比如在PerCP-eFluor710的位置下拉换成PerCP，图上的光谱也相应跟着改变：荧光素选择原则：  1.荧光通道的位置接近发射光谱的峰值，说明检测的效率最高；  2.荧光素之间的交叉部分尽量的小，说明两种荧光素之间的补偿小，在调节机器时更方便使用。   阅读原文：http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/20140 30026.html

  阅读原文：http://www.liankebio.com/AboutShow/articleID/2014030025.html

   阅读原文：http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014030024.html

    阅读原文：http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014030023.html

  阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030022.html

     96T ￥1550；48T ￥930  免费提供ELISA检测服务  免费提供数据分析        SunnyELISA试剂盒优势   ?性能稳定可靠，达国际一流水准?WHO推荐的标准品校准，检测结果更准确，具全球可比性?灵敏度高，批间差小，价格优惠?中国人的健康血清测试校准，更适合中国本土用户    人 Human小鼠 Mouse大鼠 Rat 如果您对我们的产品或ELISA技术感兴趣，我们可为您的实验室安排讲座进行沟通交流，欢迎您随时来电咨询 400 6721 600。  阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030021.html

  Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础，具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证，包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选，能够实现各种细胞功能的分析：细胞活性和细胞毒性 细胞增殖和细胞周期 细胞凋亡 自噬 氧化应激 内吞作用和吞噬作用 细胞内离子本文为大家介绍细胞增殖和周期的产品。  细胞增殖以及促进或抑制增殖药物的研究是细胞生物学和药物开发研究中一个极其重要的领域。Life Technologies可提供传统的细胞增殖和细胞周期检测试剂——尤其是 Hoechst核酸染料和在细胞分裂过程中掺入的 5-溴-2′-脱氧尿苷 (BrdU) 探针——以及开发的更先进的工具，包括 Click-iT? EdU 细胞增殖分析试剂盒。   1.Click-iT EdU 细胞增殖分析试剂盒  Click-iT EdU细胞增殖分析试剂盒采用了”click”化学技术，是一种性能出色、可替代传统方法的检测和定量新合成DNA的技术。Click-iT?分析方法采用修饰性核苷酸——EdU (5-乙炔基-2′-脱氧尿苷)，该核苷酸可通过快速click化学反应在 DNA 合成时掺入进去。Click-iT? EdU分析实验方案适用于贴壁细胞和细胞悬液。EdU检测分析只需 90 分钟即可完成，而采用以抗体为基础的BrdU分析方法则需要6-24小时。此外，还可采用Alexa Fluor 染料标记的二抗，实现Click-iT EdU细胞增殖分析在细胞表面和细胞内标记物的多重分析。尽管 Click-iT EdU 试剂和方法的主要应用领域是培养的哺乳动物细胞，但其已成功应用于多种模式生物。产品特点：☆ 准确：优于BrdU测定，差异极小(低CV值)，实验操作更简单☆ 快速：无需将DNA变性，只需90分钟即可获得结果☆ 简单：简化的实验方案，组分比早期试剂盒更少☆ 功能多样：适用于流式细胞术、成像、HTS、HCS和动物整体分析☆ 兼容：可与细胞周期染料、抗体联合使用产品列表：货号产品名称应用规格 C10337 Click-iT EdU Alexa Fluor 488 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10338 Click-iT EdU Alexa Fluor 555 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10339 Click-iT EdU Alexa Fluor 594 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10340 Click-iT EdU Alexa Fluor 647 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10637 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 488 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10638 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 555 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10639 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 594 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10640 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 647 Imaging Kit IF 50 to 250 coverslips C10350 Click-iT EdU Alexa Fluor 488 HCS Assay HCS 2 plates C10351 Click-iT EdU Alexa Fluor 488 HCS Assay HCS 10 plates C10352 Click-iT EdU Alexa Fluor 555 HCS Assay HCS 2 plates C10353 Click-iT EdU Alexa Fluor 555 HCS Assay HCS 10 plates C10354 Click-iT EdU Alexa Fluor 594 HCS Assay HCS 2 plates C10355 Click-iT EdU Alexa Fluor 594 HCS Assay HCS 10 plates C10356 Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS Assay HCS 2 plates C10357 Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS Assay HCS 10 plates C10214 Click-iT EdU Microplate Assay M 1 kit C10418 Click-iT EdU Pacific Blue Flow Cytometry Assay Kit FCM 50 tests C10425 Click-iT EdU Alexa Fluor 488 Flow Cytometry Assay Kit FCM 50 tests C10420 Click-iT EdU Alexa Fluor 488 Flow Cytometry Assay Kit FCM 100 tests C10424 Click-iT EdU Alexa Fluor 647 Flow Cytometry Assay Kit FCM 50 tests C10419 Click-iT EdU Alexa Fluor 647 Flow Cytometry Assay Kit FCM 100 tests C10632 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 488 Flow Cytometry Assay Kit FCM 50 tests C10633 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 488 Flow Cytometry Assay Kit FCM 100 tests C10634 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 647 Flow Cytometry Assay Kit FCM 50 tests C10635 Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 647 Flow Cytometry Assay Kit FCM 100 tests A10044 EdU (5-ethynyl-2’-deoxyuridine)   50 mg E10187 EdU (5-ethynyl-2’-deoxyuridine)   500 mg         FCM: FCM: flow cytometry HCS: High Content Screening IF: Immunofluorescence M: microplate assay图1. Jurkat细胞以Click-iT Alexa Fluor 488 azide和FxCycleTM Far Red染料进行双重参数标记。Jurkat细胞依照规定的染色流程以10μM EdU处理1小时再进行检测。(A)细胞以Alexa Fluor 488 azide染色后可明显区分出嵌入EdU正在增殖的细胞以及未增殖细胞。(B)细胞以FxCycleTM Far Red染料染色，显示出G0/G1期、G2/M期及处于中间的S期细胞的DNA含量分布。(C)DNA含量以及处于增殖细胞的双参数分析，双阳性的细胞为正处于S期的细胞百分比。 2.用于流式细胞术细胞增殖研究的 CellTrace? 试剂   荧光染料的Succinimidyl ester (SE)酯化合物为现今最广泛应用于细胞世代分析的探针。具有荧光性质的SE会通过lysine支链及其他胺基而与胞内及细胞表面的蛋白共价结合。细胞分裂时，SE标记会平均分配至子代细胞，子代细胞因此具有母细胞一半的荧光强度。增殖的细胞群体中，子代细胞都具有母细胞一半的荧光强度，因此可轻易利用流式细胞技术追踪。  CFSE能进行均质化细胞标记且具有绝佳的世代间隔分辨能力，因此已广泛用于活体内的细胞增殖分析。相比于其他细胞追踪染料,CFSE可提供更均质化的细胞染色结果，也因此具有更优异的世代分辨能力。   CFSE是以fluorescein分子为基础打造，因此诸如GFP表达的细胞或者以FITC标记的抗体无法搭配使用CFSE。Life Technologies提供的CellTrace? Violet Cell Proliferation Kit为紫光激发，可通过染料稀释方法分析细胞增殖，可与GFP表达的细胞或者以FITC标记的抗体兼容。此外CellTrace? Violet与CFSE相比，细胞保留度较佳，世代分辨能力多达10代，同时毒性也最低(图2)。      图2. 人CD8+ T细胞以10 μM CellTrace? Violet染色，进行细胞增殖分析。　　 您可以利用 CellTrace? 试剂永久性地标记细胞，在体内或体外实现传代或分裂细胞示踪，且不影响细胞的形态或生理。Life Technologies提供的 CellTrace? 试剂可适用于您流式细胞仪上的紫色激光、488 nm 激光和 633/635 nm 激光。产品特点：☆性能卓越——明亮的单峰染色可方便地观察多代细胞☆信号稳定——染色后可在细胞内保留数天☆无细胞毒性——不影响细胞增殖能力或形态☆功能多样——有多种颜色可供选择，可与细胞功能抗体或标记物 (如GFP) 轻松结合 产品列表货号产品名称 Ex/Em规格 C34557CellTrace? Violet Cell Proliferation Kit, for flow cytometry 391/450 180 assays C34554CellTrace? CFSE Cell Proliferation Kit - For Flow Cytometry 492/517 10 x 50 μg C34553CellTrace? Far Red DDAO-SE - Special Packaging 646/659 20 x 50 μg           3.Premo? FUCCI细胞周期传感器   Premo? FUCCI细胞周期传感器是一种基于荧光蛋白的系统，它使用了与不同细胞周期调控因子融合的红色(RFP)和绿色(GFP)荧光蛋白：cdt1和geminin。  在细胞周期过程中，上述两种蛋白被特定的E3泛素连接酶泛素化，经由蛋白酶体降解。 E3连接酶可对上述两种蛋白的活性进行时序调控，从而在细胞周期过程中实现geminin和cdt1水平的双相周期变化。 在细胞周期的G1期,geminin被降解；因此只有RFP标记的cdt1在细胞核内呈现红色荧光。 在S、G2和M期，cdt1被降解，只有GFP标记的geminin保留，从而使细胞核呈绿色荧光。在G1/S转换过程中，当cdt1水平下降且geminin水平增高时，这两种蛋白均存在于细胞内，当绿色和红色图像覆盖时，细胞核发出黄色荧光。 这种从红色-黄色-到绿色的动态颜色变化代表了细胞周期和分裂的进程(图3)。   Premo? FUCCI细胞周期传感器可用于评估药物、siRNA或其他因素对细胞周期的影响。研究表明，geminin-GFP和Cdt1-RFP的荧光信号能够耐受4%甲醛固定和0.1% Triton? X-100透化，因此可以用针对其他细胞靶点的抗体标记细胞。☆ 活细胞细胞周期状态指示剂☆ 灵活：作用于活细胞，亦适用于固定细胞☆ 方便：加入细胞，过夜孵育即可观察 图3. 利用 Premo? FUCCI细胞周期传感器在活细胞中进行细胞周期进程成像。(A)细胞周期进程及细胞核荧光变化示意图。(B)使用Premo? FUCCI细胞周期传感器(P36237)转导U2OS细胞，然后采用Alexa Fluor? 647小麦胚芽凝集素(W32466)染色。产品列表货号产品名称 Ex/Em P36237Premo? FUCCI Cell Cycle Sensor (BacMam 2.0) 2 x 1000 μl P36238Premo? FUCCI Cell Cycle Sensor (BacMam 2.0) 2 x 200 μl         4.细胞周期流式产品  Vybrant? DyeCycle?染料设计用于在活细胞中针对DNA含量进行流式细胞技术分析；所有Vybrant? DyeCycle?染料皆为DNA选择性、可穿透细胞膜，并且在结合至双链DNA之前保持非荧光状态。一旦与DNA结合，这些染料会散发出与DNA含量成正比的荧光信号。只需简单的步骤就能以Vybrant? DyeCycle?将细胞染色：将细胞培养在添加Vybrant? DyeCycle?染料的环境后，便可直接测量荧光——不需任何额外的处理或离心步骤。荧光数据可用于制作频率分布图，以呈现出细胞周期的不同阶段(图4)。Vybrant? DyeCycle?染料家族能让您将活细胞染色以便进行DNA图谱鉴定，同时可自由选用405、488、532或633nm激发光。Vybrant? DyeCycle?染料对细胞不具毒性，因此可用于根据细胞周期阶段将细胞群体分类。   图4. 分析活细胞中的细胞周期。分布图显示经Vybrant? DyeCycle?染料染色的Jurkat活细胞中的DNA含量分布情况。G0/G1和M期分布图高峰中间间隔了分布于S期的细胞。单变量的DNA含量分析为一广泛应用于肿瘤学、细胞学及分子生物学研究的公认实验方法。选用另外的激光波长，而将常用的488nm激光保留给其他标记，则可用于进行多色荧光的细胞周期研究。FxCycle? Violet和FxCycle? Far Red可分别用于紫色激光和红色激光，以此两种激光测量DNA含量，其他参数如细胞周期蛋白、周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK)、细胞周期检测点、核蛋白以及增殖标记便可通过常用的488nm激光加以测量(图5)。 图5. 多参数细胞周期及免疫表型分析。TF-1红血球母细胞以酒精固定过夜，经冲洗后以0.1% Triton X-100/PBS/1% BSA重悬，再以anti-histone H3[pS10]纯化抗体搭配Zenon? Alexa Fluor? 488 Rabbit IgG标记试剂及FxCycle? Violet Stain染色。pH3信号(红色)表示细胞正处于有丝分裂期。产品列表  货号产品名称 细胞类型规格 V35003Vybrant? DyeCycle? Violet Stain 活细胞 369/437 200 assays C34554Vybrant? DyeCycle? Green Stain 活细胞 506/534 200 assays C34553Vybrant? DyeCycle? Orange Stain 活细胞 519/563 200 assays   Vybrant? DyeCycle? Ruby Stain 活细胞 638/686 400 assays   Vybrant? DyeCycle? Ruby Stain 活细胞 638/686 100 assays   FxCycle? Violet Stain 固定细胞 358/461 500 assays   FxCycle? Far Red Stain 固定细胞 640/658 500 assays 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030020.html

  ELISA是一种简单、高效的检测平台，主要用于定性或者定量检测细胞因子、趋化因子、生长因子、磷酸化蛋白、免疫球蛋白以及其他的一些免疫标记。ELISA可以检测各种生物样本，比如血清、血浆、细胞上清和细胞裂解物等。目前在生物标记物的筛选方面，ELISA已经成为一个有价值的检测工具。相对于其他检测平台，ELISA方法批间或批内的差异更小，而且操作简便，灵敏度更高。目前，ELISA已经成为蛋白定量检测的金标准。ELISA检测平台为当代研究者所面临的问题提供了一个很好的解决方案---其设置及使用简单，使用普通酶标仪即可分析，可特异、敏感的检测出未纯化样本中的目的蛋白水平。所有这些特点使得ELISA适用于快速、经济地分析大量样本。  eBioscience公司于1999年成立于加利福尼亚州圣地亚哥，在供应免疫学和肿瘤学流式细胞试剂方面居世界领先地位，可以为生命科学及诊断学提供世界一流的抗体、ELISA试剂盒及蛋白产品。eBioscience的ELISA试剂盒使用双抗夹心法-利用两个特异性抗体与抗原的两个不同抗原表位结合的免疫技术，特异性较竞争法ELISA更有优势。  针对不同类型样本、不同科研工作者的研究需求，eBioscience公司研发了不同类型的ELISA试剂盒，供广大科研工作者使用。  eBioscience提供的ELISA解决方案：ELISA解决方案试剂盒类型试剂盒特点适用实验高品质即用型ELISA试剂盒 Platinum ELISA 经过严格质量验证的即用型ELISA试剂盒 常规ELISA实验 Instant ELISA 创新的一步法ELISA试剂盒，提高分析速度与通量 高通量研究者 High Sensitivity ELISA 专利ELISA技术，高灵敏度检测靶蛋白 低丰度蛋白表达检测 InstantOne ELISA 1小时/1次洗涤的磷酸化ELISA试剂盒 磷酸化蛋白水平检测自己包被的ELISA产品 Ready-Set-Go! ELISA 灵活、经济的ELISA 细胞上清样本及试剂盒研发的客户 Module Set (Antibody pairs) 灵活、经济的ELISA 细胞上清样本及试剂盒研发的客户     Platinum ELISA试剂盒是eBioscience公司研发的预包被ELISA试剂盒，也是eBioscience不断追求的高质量产品中的一部分。目前已有超过170种高质量的目标蛋白ELISA试剂盒，主要包括人、小鼠、大鼠、猴和猪。eBioscience经过严格的研发、生产和质控，以确保Platinum ELISA试剂盒的优质性能。Platinum ELISA试剂盒优势：☆ 高质量性能，即用型；☆ 适用于血清、血浆、细胞上清的蛋白准确检测；☆ 严格的批间质控，重复性高；☆ 灵敏度高； 具体信息请参考：http://www.ebioscience.com/knowledge-center/product-line/elisa/platinum-elisa-kits.htm Instant ELISA?即一步法ELISA,是eBioscience公司在传统ELISA的基础上研发的更简便、更精确的快速ELISA产品。您只需加入样本即可开始ELISA检测。无需费力的准备试剂、标准品梯度稀释、以及把它们顺次加入酶标孔内。与传统ELISA相比，Instant ELISA?酶标板孔中包含了包被抗体和冻干的检测抗体、Streptavidin-HRP和样本稀释液。另外用于标准曲线制作的标准品已按比例预先冻干在酶标孔中，只需按要求加入定量的水即可开始检测，省时并增加样本检测孔。Instant ELISA是要求高准确性、高重复性和省时的流水型ELISA检测系统的理想之选。Instant ELISA?试剂盒特点及优势：☆ 准确度高---无需进行标准品稀释及抗体顺序加入等操作；减少操作误差，增加结果一致性；☆ 缩短时间---仅需15min准备时间，只需加入样本然后即可开始检测；☆ 检测样本更多---96孔全部用于检测样本；标准曲线由另外的平行孔获得；☆ 灵活操作---与自动化兼容，最大限度完成实验室的高通量工作流程； ☆ 成本降低---省却了标准品稀释、抗体及检测试剂等繁琐操作步骤的人力时间成本； 具体信息请参考：http://www.ebioscience.com/knowledge-center/product-line/elisa/instant-elisa-kits.htm eBioscience公司研发的高灵敏度ELISA试剂盒（High Sensitivity ELISA），可以有效检测血清、血浆和细胞培养上清中低水平表达的蛋白。在传统的基于HRP-反应系统为基础的ELISA方法中，通过增强HRP酶反应信号强度提高检测灵敏度，但是不会导致准确度降低、背景值增加。如果您正在为低丰度蛋白检测而发愁，那么eBioscience公司的High Sensitivity ELISA试剂盒可轻松为您解忧。High Sensitivity试剂盒特点及优势：☆ 灵敏度高--可检测浓度低于1.0pg/ml的细胞因子含量，结果可靠；☆ 样本量少--检测样本只需50ul，是珍贵样本检测的理想选择；☆ 操作简便--操作流程简单明确，且试剂盒包括实验所有必需试剂；☆ 设备简单---使用常规标准化酶标仪检测（450nm）； 具体信息请参考：http://www.ebioscience.com/knowledge-center/product-line/elisa/high-sensitivity-elisa-kits.htm    eBioscience公司基于蛋白磷酸化状态确定和ELISA方法研发出了蛋白磷酸化水平检测ELISA试剂盒——InstantOne ELISA。该试剂盒是采用传统的夹心ELISA方法，但又有显著差异。InstantOne ELISA更加灵活、操作简便，同时由于采用专利方法，使得包被抗体能与酶标板结合的同时，使检测物与包被抗体、检测抗体反应，从而大大减少了反应时间。未结合的反应试剂及非特异性样本组分可通过洗涤的方式去除；特异性的检测物则通过比色的方法检测定量。整个反应过程仅需要1h即可完成。与传统夹心法ELISA相比，InstantOne ELISA更富灵活性。由于捕获抗体并未预包被于酶标孔中，所以在同一块板的不同板孔内可同时分析多种目标检测物。您只需将样品裂解物加入孔内，然后将不同的抗体对加入相应酶标孔中即可完成操作。因此，在同一块板上分析一个家族或者下游通路中目的检测物的总蛋白水平及磷酸化蛋白水平变得简单容易。InstantOne ELISA试剂盒优势：☆ 简单快速——仅需1h即可完成整个操作过程，比传统ELISA省时1/3；☆ 选择灵活——可单独或同时检测总蛋白及磷酸化蛋白水平，也可在同一块板上检测通路中不同目的蛋白；☆ 结果准确——与Western Blot相比，结果更准确；☆ 兼容性好——常规比色法检测，使用实验室传统的酶标仪读数即可；☆ 产品齐全——涵盖多个信号通路蛋白的检测，且不断开发新产品； 具体信息请参考：http://www.ebioscience.com/knowledge-center/product-line/elisa/instantone-elisa-kit-technology.htm    eBioscience的Ready-Set-Go! ELISA kits价格经济实惠，试剂盒包含了ELISA实验必需的试剂组分，包括抗体对、标准品、检测试剂；您只需要再搭配洗液（Wash buffer）、终止液（1M H3PO4 or 2N H2SO4）即可完成该实验。   Ready-Set-Go! ELISA 试剂盒是ELISA经验丰富研究者的理想选择。RSG操作者从包被开始实验，可以自己更改些条件来获得最佳结果。  具体请参考：http://us.ebioscience.com/product-line/ready-set-go-elisa-sets.htm    eBioscience还为广大科研工作者提供酶联免疫印迹ELISpot相关的试剂盒，检测单个细胞分泌的细胞因子情况。具体信息请参考：http://us.ebioscience.com/product-line/ready-set-go-elispot-kits.htm   Human IL-17A ELISPOT Human PBMCs cultured for24 hrs (no mitogen). Human PBMCs activated with PMA/Ionomycin for 24 hrs.如果您有其他任何有关ELISA/ELISpot 的问题，欢迎随时联系我们 400 6721 600。 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030019.html

  CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写，中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ、IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群， 其既具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性，又具有NK细胞(自然杀伤细胞)的非MHC(主要组织相容性抗原)限制性肿瘤杀伤能力。CIK细胞具有杀瘤活性高、杀瘤谱广，对正常组织毒性低，体外可高度扩增等特点，是目前临床上广泛使用的过继性免疫治疗细胞。  DC是“DendriticCells”的缩写，中文全称为“树突状细胞”，因其成熟时伸出许多树突样或伪足样突起而得名。DC是由2011年诺贝尔奖获得者、加拿大籍科学家RalphM. Steinman于1973年发现的，是目前发现的功能最强的抗原递呈细胞(Antigen Presenting Cells,APC)。已证实，DC是唯一能够显著刺激初始T细胞(Na?ve T cells)增殖的APC，而其它APC(如单核巨噬细胞、B细胞等)仅能刺激已活化的或记忆性的T细胞。DC是机体适应性T细胞免疫应答的始动者，在肿瘤免疫中具有极其重要的作用。  DC-CIK即DC和CIK细胞在体外共培养，然后回输给患者。严格的说，最终的效应细胞是经DC体外活化的CIK细胞。多项研究表明，DC与CIK具有协同作用，共同孵育后，DC表面共刺激分子的表达及抗原递呈能力均明显提高，而CIK的增殖能力和体内外细胞毒活性也得以增强，因此DC-CIK较单独的CIK治疗更为有效。若将肿瘤抗原负载的DC与CIK共培养，可刺激产生肿瘤抗原特异性的T细胞，这样的DC-CIK治疗则兼具特异性和非特异性双重肿瘤杀伤作用，比未负载肿瘤抗原的DC刺激活化的CIK活性更强，常被用于临床和科研。1．DC培养用细胞因子： GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)：  GM-CSF是一种造血生长因子，在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成，并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的?功能。GM-CSF是最早被鉴定出来对于DC有作用的细胞因子之一。  GM-CSF在DC培养中的功能是促进单核细胞向大巨噬样细胞分化，细胞表面MHC II类分子的表达得以提高，从而增强细胞的抗原递呈功能。此外，GM-CSF还可促进DC的存活。IL-4(白细胞介素-4)  IL-4在由单核细胞诱导成DC的过程中发挥的作用是抑制巨噬细胞的过度生长，从而引导单核细胞向DC方向分化。若培养体系中不加IL-4，单核细胞将分化为巨噬细胞。同时，IL-4还有降低细胞表面表达CD14分子的能力。CD14表达水平的降低是单核细胞分化为DC的重要标志。   GM-CSF和IL-4共同作用可使单核细胞定向分化为未成熟DC(immature DC)，此时的DC具有较强的抗原摄取和加工能力，但抗原递呈能力很弱。细胞表面中度表达MHC I类、II类分子和B7家族分子(CD80, CD86等)，但不?表达CD14。TNF-α(肿瘤坏死因子-α)   TNF-α可下调未成熟DC的巨胞饮作用和表面Fc受体的表达，使细胞内MHC II类分子区室(class IIcompartment)消失，但能够上调细胞表面?MHCI类、II类分子和B7家族分子(CD80、CD86等)的表达，使未成熟DC分化为成熟DC(matureDC)，此时DC的抗原摄取和加工能力明显减弱，而抗原递呈能力显著增强，可极强的激活T细胞。2．CIK培养用细胞因子和抗体： CD3激发型单抗：)   T细胞活化的第一信号来自于T细胞表面的受体，即T细胞抗原受体(T cell antigen receptor, TCR)与APC提呈的抗原的特异性结合，也就是T细胞对抗原的特异性识别。TCR是由2条不同肽链构成的异二聚体，在T细胞表面，其与CD3分子通过非共价键结合，形成TCR/CD3复合体。TCR识别特异性抗原后会引起CD3和T细胞表面的?辅助受体CD4或CD8分子的胞浆尾部聚集，进而激活与胞浆尾部相连的酪氨酸激酶(Lck、Fyn和ZAP-70等)，促使CD3分子胞浆区的免疫受体酪氨酸活化基序(immunoreceptortyrosine-basedactivationmotif,ITAM)中的酪氨酸(Y)磷酸化。磷酸化的酪氨酸(pY)进一步磷酸化下游含酪氨酸的蛋白，从而引起激酶活化的级联反应(磷脂肌醇途径MAP激酶途径等)，最终通过激活转录因子，使其进入细胞核内，结合于调控T细胞增殖和活化的靶基因(?如IL-2和IFN-γ等)，引起基因的表达和转录，T细胞因而由静止状态转为增殖和活化状态。   由上可见，CD3分子在T细胞活化信号的转导中起着极其关键的作用。CD3激发型单抗与T细胞表面CD3分子特异性结合后，可引起CD3分子胞浆区ITAM基序中酪氨酸的磷酸化，进而导致T细胞增殖和活化的下游信号的激活，从而使T细胞增殖和活化。也就是说，CD3激发型单抗能够模拟抗原与TCR/CD3复合物的识别和激活过程，从而引起T细胞的增殖与活化，因此是CIK细胞培养中不可或缺的刺激因素。   此外，CD3激发型单抗在选用时一定要注意克隆号。研究表明，仅克隆号为OKT-3的CD3激发型单抗可以刺激所有人的T细胞的增殖，而其它克隆号的CD3激发型单抗仅能刺激一部分人的T细胞。因此，在进行CIK培养时，最好选用OKT-3克隆，以保证每个患者的T细胞均能被激活。 IL-2(白细胞介素-2)   IL-2最初发现时被称为T细胞生长因子(T cell growth factor, TCGF)，是引起T细胞增殖最重要的细胞因子。IL-2既是自分泌细胞因子，也是旁分泌细胞因子，其通过与T细胞表面的IL-2受体(IL-2R)的特异性结合而促使T细胞活化，并进入细胞分裂状态。此外，IL-2还可刺激NK细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK细胞培养中须添加IL-2，以促进T细胞的增殖与活化。  IFN-γ(干扰素-γ)   IFN-γ具有上调外周血淋巴细胞表面IL-2R表达的作用，因此会增强T细胞对IL-2促增殖反应的敏感度和强度。在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN-γ，可降低IL-2的用量。研究发现，IFN-γ加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN-γ，培养24后再加入IL-2，可明显提高CIK的细胞毒活性。 IL-1a(白细胞介素-1a)   IL-1a也可以介导外周血淋巴细胞表面上调表达IL-2R。当IL-1a与IFN-γ和激发型CD3单抗合用时，可以明显提高CIK 的细胞毒作用。1．外周血单个核细胞的采集  1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞80 - 100ml；   1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC)；   1.3 无血清培养液洗涤2次，获得纯度在90%以上的PBMC，细胞数量需达到1-3 x 108。2．(可选步骤)肿瘤抗原的制备]   用于负载DC的肿瘤抗原可以是肿瘤特异性抗原肽(Tumor-Specific Antigens, TSA)或肿瘤相关抗原(Tumor-Associated Antigens, TAA)，也可以是肿瘤全细胞抗原。  用TSA或TAA负载的DC具有很好可克服这些缺陷，因为此时无需知道那些抗原是肿瘤细胞的TSA或TAA，而且全抗原中的多种不同肿瘤抗原冲击DC可诱导产生针对不同抗原决定簇的细胞毒T淋巴细胞(CTL)克隆，从而实现对肿瘤细胞的有效杀伤。  肿瘤细胞全抗原负载DC的方法很多，包括用肿瘤细胞裂解液负载DC、用凋亡肿瘤细胞负载DC、用坏死或死亡的肿瘤细胞负载DC，用肿瘤活细胞负载DC，和将肿瘤细胞与DC融合等。目前临床上常用的是用肿瘤细胞裂解液负载DC，因该方法简单、快速、有效。  反复冻融是获得肿瘤细胞裂解液的常见方法，具体步骤如下：  2.1 手术切除肿瘤标本，无菌条件下，将坏死组织和癌旁非肿瘤组织去除干净；  2.2 无菌生理盐水洗3次；  2.3 用无菌的组织剪将肿瘤组织剪碎，加入RPMI 1640培养基，充分研磨；  2.4 200目无菌网过滤后收集单细胞悬液；  2.5 用RPMI 1640培养基重悬细胞至1-2 x 107/ml，装入5ml无菌冻存管中；  2.6 将冻存管浸入液氮中速冻，10 min后取出，再迅速放入37℃水浴中解冻10 min。反复3-5次；   注：也可以-80℃/37℃反复冻融3-5次。    2.7 将肿瘤裂解物加入离心管中，3000rpm，离心10min；  2.8 收取上清，0.22μm滤膜过滤除菌，留样检测蛋白含量及细菌、真菌和支原体；  2.9 -80℃保存备用。  3.0 CIK细胞的培养及鉴定  3.1 步骤1中获得的PBMC 用无血清培养液调整细胞浓度至2 x 106/ml，置于培养瓶内；  3.2 37℃，5%CO2培养箱中孵育2h，以使单核细胞贴壁；  3.3 收集悬浮细胞，用无血清培养液调整细胞浓度至1-2 x 106/ml；  3.4 加入1,000 U/ml 的重组人IFN-γ培养；  3.5 24h 后加入50ng/ml 的CD3 单克隆抗体和300 U/ml 的重组人IL-2，刺激CIK 细胞的生长和增殖；   注：此时也可同时加入100U/ml的重组人IL-1a。   3.6 每3天半量换液或扩瓶一次，并补加重组人IL-2300 U/ml；  3.7 在培养的第7d，收获CIK细胞,此时数量应达到1x109个以上；  3.8 CIK细胞质控：  3.8 .1台盼蓝染色检测细胞活力：活细胞应在80%以上；  3.8 .2用流式细胞仪检测细胞表面CD3、CD8和CD56 等分子的表达，观察CD3+CD56+细胞的比例是否明显提高。4.DC细胞的培养及鉴定   4.1 步骤3.2中剩下的贴壁细胞(主要是CD14+的单核细胞)，加入含重组人GM-CSF 500-1,000U/ml和重组人IL-4 500U/ml的无血清培养液，37℃，5%CO2培养箱中培养，诱导单核细胞向DC细胞分化；  4.2 每3d 半量换液一次，并补足细胞因子；  4.3 (可选步骤)?在培养的第5d, 加入步骤2中获得的肿瘤抗原50 mg/ml，对DC进行抗原负载；  注：若不对?DC?进行抗原负载，该步省略。   4.4 在培养的第6d，加入重组人TNF-α(500U/ml)，诱导DC细胞成熟；  4.5 在培养的第7d或第8d，收获DC 细胞，其数量应达到1×106个以上；  4.6 DC的质检：  4.6 .1台盼蓝染色检测细胞活力：活细胞应在80%以上；  4.6 .2流式细胞仪检测DC 细胞表面HLA-DR、CD83 和CD86 等分子的表达以确定DC是否成熟。  5.0 DC-CIK细胞的制备和质检  5.1 收集步骤4和步骤3中所获得的DC 细胞和CIK 细胞，按1:10(数目比)的比例共培养，无血清培养液中添加重组人IL-2 (300 U/ml)；  5.2 每3天半量换液一次，并补加重组人IL-2 (300U/ml)。  5.3  在第7d 收集细胞，细胞数量应达到1×1010个以上；  5.4  DC-CIK细胞的质检：  5.4 .1台盼蓝染色检测：活细胞应在80%以上；  5.4 .2流式细胞仪检测细胞表面CD3、CD8、CD56等分子的表达：CD3+CD56+细胞的比例应在20%以上。  5.4 .3细胞杀伤实验：以DC-CIK细胞为效应细胞，以肿瘤细胞(可为原代肿瘤细胞或肿瘤细胞株)为靶细胞，将效应细胞与靶细胞按10:1(数目比)的比例加入96 孔U型板中，每孔含靶细胞1 x 104个，终体积为200ml，设3个复孔。培养4h，然后取培养上清，用乳酸脱氢酶(LDH) 试剂盒检测效应细胞对靶细胞的杀伤率。   5.4 .4收获细胞前，取少量培养物进行细菌、真菌培养，并检测支原体、衣原体，及内毒素(标准：病原学检测阴性，内毒素 阅读原文：hhttp://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014030018.html

 Q. 是否能涡旋震荡抗体或重组蛋白？    我们不推荐震荡蛋白或抗体溶液，这会改变产品的特性。通常在运输过程中，液体有可能已经分散在管子中。推荐使用之前，瞬时离心，这样抗体会沉到管底，以达到标示的体积。Q. 我能涡旋震荡已经标记了抗体的细胞样品吗？   可以，短时震荡能保持细胞的最佳状态。Q. 标记了tandem染料如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等的细胞样品能固定并保存吗？   大多数情况下，可以将样品保存在IC Fixation Buffer(cat. 00-8222)(100 μL样品混合100 μL IC Fixation Buffer)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中，暗处4°C 最长可以保存3天，对检测没有影响。某些影响可能与克隆号有关。Q. 不能马上检测的样品，我该如何保存？   首先，要获得最好的效果，一定是推荐立即上机检测。  要保存染色完成的样品，可以在IC Fixation Buffer (cat. 00-8222) (100 μL样品混合100 μL IC Fixation Buffer) 或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中固定保存，暗处4°C 最长可以保存3天。对于tandem染料，如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等，eBioscience的数据显示不会增加它们与APC或者PE的补偿。某些影响可能与克隆号有关。Q. 我可以用自己配制的固定缓冲液来保存细胞吗？   我们不推荐使用其他缓冲液，我们只能确保IC Fixation Buffer (cat. 00-8222)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)的保存效果。Q. 有文献提到与DEC205+ cells存在不兼容的情况，我能选择哪些其他的标记呢？   其实CD205已被证实可以与PE-Cy5.5标记抗体和链霉亲和素标记物结合 (Part et al. 2012 J. Immunol Methods 384:184-90); 然而，不能用于CD205+ 的树突状细胞。我们推荐使用 PerCP-Cy5.5 或者PerCP-eFluor 710 标记来替代。  阅读原文：http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014030017.html

 您还在担心因货期原因无法开展实验而一筹莫展吗？您还在担心老板又在叨叨地催着实验结果吗？   Life Techonologies备有大量现货，包括细胞因子、一抗、二抗、磁珠、流式产品、细胞成像产品等等，让您马上有试剂，马上做实验，马上出结果！详细现货列表请点击下载，或联系联科生物当地销售人员。　 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030016.html

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     2014年4月25到28日第六届国际抗体大会将于在中国大连举办。此次盛会的主题是：抗体研发与治疗新纪元。联科生物作为特约参展商将全程参与此次会议。 　　 第六届国际抗体大会将继续为本领域相关人士提供一个广阔而专业的信息交流与合作平台。并邀请超过150位国内外抗体医药领域的企业界精英及学术界知名专家学者来华做专业演讲报告，交流抗体医药领域最新研究成果，展示最新技术和产品。本次会议的专业议题涵盖最新抗体研究及技术，抗体药物研发前沿，抗体的应用，抗体工程及生产，抗体药物市场及趋势等五大方面。  会议网址：http://www.bitlifesciences.com/ica2014/cn/default.asp 联科生物欢迎各位老师莅临86号展位~！特备相关资料及精美礼品相赠！ 阅读原文：http://www.liankebio.com/ArticleShow/articleID/2014030014.html

　　Cell-Based ELISA（基于细胞的 ELISA）是一种新的定性蛋白检测技术，细胞直接在微孔板里培养，待检测时，不需裂解细胞便可直接测量微孔板里的蛋白变化。在一个 96 孔酶联板上，便能检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤，样本的损失也能降到最低，比起其他普通的 ELISA 测定方法，这项全新的 ELISA 技术能更快速、更方便地一次检测大量的细胞内蛋白。 无需裂解细胞目标蛋白损失最少可检测贴壁细胞、半贴壁细胞和悬浮细胞使孔与孔之间的数据标准化即用型，无须优化体系两种检测方法可供选择：显色法和荧光法替代Western Blot的理想选择 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030013.html

　　Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础，具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证，包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选，能够实现各种细胞功能的分析： 细胞活性和细胞毒性细胞增殖和细胞周期细胞凋亡自噬氧化应激内吞作用和吞噬作用细胞内离子本文为大家介绍细胞活性和毒性的产品　　细胞活性和细胞毒性的荧光分析可与荧光显微镜、荧光计、荧光酶标仪或流式细胞仪配合使用，操作方便，与传统的比色法和放射性分析相比具有诸多优势。Life Technologies的细胞活性和细胞毒性分析试剂及试剂盒主要用于测定细胞群中活细胞和死细胞的比例。　　　　LIVE/DEAD?细胞活性/毒性试剂盒提供了一种极其简单的基于荧光的分析方法，可用于测定贴壁或非贴壁细胞的活性以及细胞毒性。LIVE/DEAD? 分析专门采用两种单独的荧光探针区分活细胞与死细胞，Life Technologies开发出多种颜色的试剂盒，可用于流式细胞术、显微镜或微孔板检测。产品特点： 操作简单——加样、孵育并分析；无需清洗步骤功能多样——适用于贴壁细胞、非贴壁细胞及特定的组织易于分析——通过不同的荧光可轻易地区分死/活细胞  1) 适用于哺乳动物细胞的LIVE/DEAD?试剂盒   　　哺乳动物细胞LIVE/DEAD?试剂盒与荧光试剂结合使用，可通过两色区分活细胞群与死细胞群，且无需冲洗步骤。是高通量筛选、成像、荧光分析和流式细胞术的理想选择。产品列表：　　货号 产品名称 应用 荧光素 Ex/Em(nm)颜色 L3224LIVE/DEAD? Viability/Cytotoxicity Kit *for mammalian cells*FCM;IF;MCalcein AMEthidium homodimer-1494/517517/617Green (Live)Red (Dead)L7010LIVE/DEAD? Cell-Mediated Cytotoxicity Kit *for animal cells*FCM;IF;MDiOC18(3)PI484/501536/617Green (Live)Red (Dead)L7011LIVE/DEAD? Sperm Viability KitFCM;IFSYBR? 14 dyePI485/517536/617Green (Live)Red (Dead)L34951LIVE/DEAD? Cell Vitality Assay Kit *C12-resazurin/SYTOX? Green*FCM;IF;MSYTOX? GreenC12-resazurin488/530488/575Green (Dead)Red (Live)FCM: flow cytometry IF: Immunofluorescence M: microplate assaysss图1. 活的以及经乙醇处死的牛肺上皮细胞混合物经LIVE/DEAD? Viability / ytotoxicity Kit(L3224)染色。活细胞显示绿色荧光，而死细胞则显橘红色。图2. LIVE/DEAD? Sperm Viability Kit (L7011)染色精子。具有完整细胞膜的活精子被标记可透膜的核酸染料SYBR? 14，显示绿色荧光。死亡的精子则被PI标记，显示橘红色。图3. Jurkat细胞加入10 μm喜树碱诱导，于37℃、5℃孵育4h后，经LIVE/DEAD? Cell Vitality Assay Kit (L34951)染色。根据SYTOX绿色荧光和resorufin荧光强度可将细胞分为活细胞、受损细胞和死细胞三群。  2) 适用于细菌的试剂盒   　　LIVE/DEAD? BacLight?细菌活性试剂盒提供了两种不同的核酸染料，可将质膜完整的活细菌(绿色荧光)与质膜不完整的死细菌(红色荧光)快速区分开来。 　　产品列表：货号 产品名称 应用 荧光素 Ex/Em(nm)颜色 L7007LIVE/DEAD? BacLight? Bacterial Viability KitFCM;IF;MSYTO? 9 PI485/530 485/630Green (Live)Red (Dead)L7012LIVE/DEAD? BacLight? Bacterial Viability KitFCM;IF;MSYTO? 9 PI485/530 485/630Green (Live)Red (Dead)L13152LIVE/DEAD? BacLight? Bacterial Viability KitFCM;IFSYTO? 9 PI485/530 485/630Green (Live)Red (Dead)L34856LIVE/DEAD? BacLight Bacterial Viability and Counting KitFCMSYTO? 9 PI485/530 485/630Green (Live)Red (Dead)FCM: flow cytometry IF: Immunofluorescence M: microplate assaysss图4.使用LIVE/DEAD? BacLight? Bacterial Viability Kit (L7007, L7012, L13152)鉴定酿脓链球菌上存活的和死亡的细菌。  图5.使用LIVE/DEAD? BacLight Bacterial Viability and Counting Kit (L34856)分析细菌培养物。活的和死亡的金黄色葡萄球菌(A和C)和大肠杆菌(B和D)经试剂盒染色后进行流式分析。使用绿色或红色荧光与SSC(A和B)区分出细菌和微球。通过红色和绿色荧光可区分出活细胞和死细胞(C和D)  3) 适合酵母和真菌的试剂盒   　　　　LIVE/DEAD?酵母存活试剂盒提供了一种极为简单灵敏的分析方法，可用于区分复杂的混合物或不纯的培养物中的活酵母和真菌。　　 LIVE/DEAD? Yeast Viability Kit采用新的双色荧光探针检测酵母细胞的活性。在具有完整浆膜和代谢功能的酵母中，FUN 1可由黄绿色的胞内荧光转变为橘红色的空泡内荧光，而无论代谢状态如何，Calcofluor White M2R都会与细胞壁结合，产生蓝色荧光。　　 LIVE/DEAD? FungaLight? Yeast Viability Kit则通过流式快速准确地鉴定死/活酵母细胞。绿色荧光的SYTO 9可与所有酵母细胞结合，而PI则只能进入细胞膜受损的酵母中，并降低SYTO 9的荧光，从而区分死细胞(红色荧光)和活细胞(绿色荧光)。产品列表：货号 产品名称 应用 荧光素 Ex/Em(nm)颜色 L7009LIVE/DEAD? Yeast Viability KitIF;MFUN 1Calcofluor White M2R488/530 488/560-610365/440Green (All)Red-orange (Live)Blue (All)L34952LIVE/DEAD? FungaLight? Yeast Viability KitFCMSYTO? 9 PI485/530 485/630Green (Live)Red (Dead)FCM: flow cytometry IF: Immunofluorescence M: microplate assay 图6. 使用LIVE/DEAD? Yeast Viability Kit (L7009)染色酿酒酵母，FUN 1在空泡内的产生红色荧光，而Calcofluor White M2R结合在细胞壁上发出蓝色荧光。图7. 使用 LIVE/DEAD? FungaLight? Yeast Viability Kit (L34952)染色酵母。A为根据FSC/SSC排除碎片，选择的酵母群设门。B为R1门中的酵母根据红色荧光和绿色荧光区分死细胞和活细胞。  4) 可固定死细胞染色试剂盒   　　　　LIVE/DEAD? 可固定死亡细胞染色试剂盒采用了一种能与胺基起反应的荧光染料，通过流式细胞仪来测定哺乳动物细胞的活力。对于细胞膜受损的细胞，染料可与细胞内部及细胞表面的自由胺基相互作用而发出强烈的荧光。而对于活细胞，染料只能与细胞表面胺基相互作用，因而荧光强度较低。活细胞与死细胞荧光强度差别通常大于50倍，这一荧光强度的差别在甲醛固定后仍可完全保留下来。Life Techonlogies提供多种单一颜色的检测试剂盒以及多色检测试剂盒可供选择。 　　产品特点： 保存时间长——染料为冻干粉，稳定染色稳定——固定后保持原有染色类型，不会降低灵敏度信号强——在单通道中能够轻易区分活/死细胞，可兼容多色分析产品列表：货号 产品名称 应用 激发光(nm)Em (nm)L23105LIVE/DEAD? Fixable Blue Dead Cell Stain KitFCMUV450L34955LIVE/DEAD? Fixable Violet Dead Cell Stain KitFCM405451L34957LIVE/DEAD? Fixable Aqua Dead Cell Stain KitFCM405525L34959LIVE/DEAD? Fixable Yellow Dead Cell Stain KitFCM405575L23101LIVE/DEAD? Fixable Green Dead Cell Stain KitFCM488520L23102LIVE/DEAD? Fixable Red Dead Cell Stain KitFCM488615L10120LIVE/DEAD? Fixable Far Red Dead Cell Stain KitFCM633/635665L10119LIVE/DEAD? Fixable Near-IR Dead Cell Stain KitFCM633/635775L34960LIVE/DEAD? Fixable Dead Cell Stain Sampler KitFCMvariousvarious 图8. 使用LIVE/DEAD? Fixable Violet Dead Cell Stain Kit (L34955)进行活细胞设门，排除假阳性。以散射光设门活细胞(A)会带入许多死细胞，造成染色的假阳性(C)；而用LIVE/DEAD? Fixable Violet染料设门活细胞(B)可消除死细胞带来的假阳性(D)。　　　　SYTOX?染料为细胞非通透性的核酸染料，可以非常轻易地渗入质膜受损的真核细胞及革兰阳性和革兰阴性细菌内，但不会进入活细胞。由于它们无法穿过完整的细胞膜，与双链 DNA 结合而增加荧光强度，因此是最佳的死细胞染料。SYTOX? 死细胞染料易于使用，只需将其加入细胞并观察即可，它在水溶性培养基中不发出荧光，因此无需额外的清洗步骤。这些染料适用于多种平台，包括荧光显微镜、流式细胞仪和微孔板检测。　产品特点： 准确：高亲和核酸染料，可轻松鉴定死细胞灵活：多种颜色，光谱重叠极少，具有更佳的多色性能简便：无需清洗步骤；只需加入、孵育并分析即可可固定：固定后可维持染色形态，适用于胞内表型的简单活细胞、死细胞分析货号 产品名称 规格 S11368SYTOX? Orange Nucleic Acid Stain - 5 mM Solution in DMSO250 μlS7020SYTOX? Green Nucleic Acid Stain - 5 mM Solution in DMSO250 μlS34857SYTOX? Blue Dead Cell Stain, for flow cytometry1 mlS34859SYTOX? Red Dead Cell Stain, for 633 or 635 nm excitation1 mlS11348SYTOX? Blue Nucleic Acid Stain - 5 mM Solution in DMSO250 μlS33025SelectFX? Nuclear Labeling Kit (DAPI, SYTOX? Green, 7-AAD, TO-PRO?-3 Iodide), for fixed cells1 kitV35113Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V APC and SYTOX? Green, for flow cytometry1 kitV35112Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V PE and SYTOX? Green, for flow cytometry1 kitV13240Single-Channel Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V Alexa Fluor? 488 and SYTOX? Green Dyes, for flow cytometry1 kitV35114Metabolic Activity Dead Cell Apoptosis Kit with C12 Resazurin, Annexin V APC, and SYTOX? Green, for flow cytometry1 kitF24631FluoCells? Prepared Slide #4 (mouse intestine section with Alexa Fluor? 350 WGA, Alexa Fluor? 568 Phalloidin, and SYTOX? Green)1 eachS34860SYTOX? Green Dead Cell Stain, for flow cytometry1 mlS34861SYTOX? Orange Dead Cell Stain, for flow cytometry1 mlS34862SYTOX? Dead Cell Stain Sampler Kit, for flow cytometry1 ml图9. HeLa细胞经固定、破膜和RNA酶处理后，标记mouse anti-human Golgin-97 monoclonal antibody (A21270)和黄色荧光的Alexa Fluor? 430 goat anti-mouse IgG antibody (A11063)，F-actin以红色荧光的Alexa Fluor? 594 phalloidin (A12381)标记，细胞核以SYTOX? Green nucleic acid stain (S7020)标记。图10. 未处理的和热处死的Jurkat细胞混合物经SYTOX? Blue Nucleic Acid Stain (S11348)染色5分钟后，在配置405nm紫光激发光的流式仪上进行检测。活细胞和死细胞可轻松地区分开。 阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030012.html

恭喜以下实验室和科学家使用eBioscience产品发表了高水平的文章联科生物和eBioscience携手为您提供最可靠的实验支持文章标题PI单位杂志2014影响因子发表时间使用eBioscience产品列表HMGB1–LPS complex promotes transformation of osteoarthritis synovial fibroblasts to a rheumatoid arthritis synovial fibroblast-like phenotype沈茜 研究员第二军医大学附属长海医院实验诊断科Cell Death and Disease6.04402/20/2014PE-anti TLR2APC-anti TLR4Impaired Circulating CD4+LAP+ Regulatory T Cells in Patients with Acute Coronary Syndrome and Its Mechanistic Study曾秋棠 教授同济医学院心血管免疫学实验室PLOS ONE3.7302/18/2014plate-bound (5 μg/ml) anti-CD3 and soluble anti-CD28 (2 μg/ml)anti-human GARP-PEAn unbalanced PD-L1/CD86 ratio in CD14++CD16+ monocytes is correlated with HCV viremia during chronic HCV infection鲁凤民 教授北京大学基础医学院感染病研究中心及病原生物学系北京大学感染病研究中心Cellular and Molecular Immunology3.41902/16/2014ELISA kitsHER2 as a Promising Target for Cytotoxicity T Cells in Human Melanoma Therapy高斌中科院微生物所病原微生物与免疫学重点实验室PLOS ONE3.7308/27/2013OKT3 anti-CD69-PEanti-CD3-FITC (UCHT1)Thymic Stromal Lymphopoietin Attenuates the Development of Atherosclerosis in ApoE–/– Mice曾秋棠同济医学院心血管免疫学实验室J Am Heart Assoc新创刊，暂无Aug 2013;anti-CD11c-biotin antibody (clone N418) IL‐4, IFN‐γ, IL‐12p70, and TGF‐β1 Elisa KitExpression of co-stimulatory molecule B7-H4 in patients suffering from rheumatoid arthritis蒋敬庭苏大附三医院肿瘤生物学治疗科Immunology Letters2.337online 22 August 2013FITC-labeled mouse anti-human CD3, FITC-labeled mouse anti-human CD14, FITC-labeled mouse anti-human CD19, FITC-labeled mouse IgG1 and PE-labeled mouse IgG1 and mouse IgG1Treatment of allergic inflammation and hyperresponsiveness by a simple compound, Bavachinin, isolated from Chinese herbs天津科技大学工业发酵微生物重点实验室Cellular and Molecular Immunology3.41909/09/2013Foxp3 Staining Buffer SetMannose-Binding Lectin Inhibits Monocyte Proliferation through Transforming Growth Factor-β1 and p38 Signaling Pathways广东医学院基础医学院微生物免疫系PLOS ONE3.7309/06/2013TGF-β1 ElisaTLR2 Mediates Helicobacter pylori–Induced Tolerogenic Immune Response in Mice山东大学医学院药理学研究所PLOS ONE3.7309/13/2013IL-12p70, IL-23p19, IL-6, TNF-α, IFN-γ, IL-10, and IL-17A were measured using Quantikine ELISA KitsInflammation-induced proteolytic processing of the SIRPα cytoplasmic ITIM in neutrophils propagates a proinflammatory state南京大学医药生物技术国家重点实验室Nature Communications10.0209/11/2013PE-conjugated anti-Ly6G antibodyBone Marrow Injury Induced via Oxidative Stress in Mice by Inhalation Exposure to Formaldehyde华中师范大学PLOS ONE3.7309/11/2013Mouse EILSA kits for TNF-α and IL-1βElevated Plasma Soluble Sema4D/CD100 Levels Are Associated with Disease Severity in Patients of Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome四军大免疫系PLOS ONE3.7309/10/2013TMB (3, 3', 5, 5'-Tetramethylbenzidine)-substrateDistribution of Bone-Marrow-Derived Endothelial and Immune Cells in a Murine Colitis-Associated Colorectal Cancer Model厦门大学附属中山医院胃肠科PLOS ONE3.7309/10/2013CD31 antibodyAberrant Expression of CXCR4 and β-Catenin in Pancreatic Cancer西安交大第一附属医院肝胆外科Anticancer Res1.713Sep-13antibodies to CXCR4 and beta-cateninFicolin-2 Defends against Virulent Mycobacteria Tuberculosis Infection In Vivo, and Its Insufficiency Is Associated with Infection in Humans武汉医科大学PLOS ONE3.7309/09/2013FITC-labeled anti-F4/80 and PE-anti-IFN-γ antibodies, fixation buffer, and permeability buffer，ELISA kits (IFN-γ, IL-4, IL-12, IL-6, IL-17A, and TNF-α)，Respiratory Syncytial Virus Infection Induces Higher Toll-Like Receptor-3 Expression and TNF-α Production Than Human Metapneumovirus Infection重庆医科大学儿童医院PLOS ONE3.7309/09/2013phycoerythrin (PE)-labeled monoclonal IgG1α hTLR3 antibody and PE-labeled mIgG1 isotype control 阅读原文：http://www.liankebio.com/AboutShow/articleID/2014030011.html

　　2014年3月1日，杭州市拱墅区科技工业功能区管委会隆重召开2013年度先进企业及先进个人的表彰大会，杭州联科生物技术有限公司榜上有名，同时获得“最具成长潜力企业”、“纳税先进企业”两项荣誉称号，联科感谢园区管委会对我们工作的支持和帮助，也感谢联科人的共同努力付出，在2014年我们将珍惜荣誉，再接再厉，努力使联科再上新的台阶，为园区发展作出新的、更大的贡献！ 阅读原文：http://www.liankebio.com/AboutShow/articleID/2014030010.html

　　金蛇狂舞辞旧岁,策马奔腾迎新春，2014年2月13日-15日，联科生物“快乐工作、精彩生活”主题年会在嘉兴奥林匹克大酒店隆重举行。　　2月14上午，在联科2013年终总结暨表彰大会上，联科总经理宋路红女士首先肯定了2013年公司取得的成绩同时也指出了2014年公司工作的方向，让我们联科人的目标更明确，大家相信只要在我们的共同努力下，阳光的企业一定会有阳光的未来！随后公司对2013年工作表现优秀的员工和团队进行了表彰和奖励，肯定了他们在2013年取得的骄人成绩，希望他们在2014年再创佳绩！　　　　除了年终总结暨表彰大会，晚上我们还为大家准备了丰盛地元宵盛宴，晚宴中员工们各展所长，有欢快喜庆的歌曲；活泼、热情如火的舞蹈；诙谐幽默的情景喜剧，为大家奉献了一场视听上的饕餮盛宴，更让我们领略到联科人的另一番风采！　　欢聚的时间总是短暂的，联科生物2013年企业年会随着15日返程大巴的启动圆满结束了。感谢各位联科人2013年的共同努力，2014年我们已站在新的起跑线上，就让我们在联科的舞台上尽情地展示自己，为联科新的里程碑加油！  阅读原文：http://www.liankebio.com/AboutShow/articleID/2014030009.html

     Novus是全球知名的专业抗体生产公司，以优质的产品和完善的服务著称。作为抗体种类最全公司之一，Novus目前有9万多种一抗和近2000种二抗，产品涉及组织缺氧，自噬，神经生物学，脂质和代谢，细胞凋亡，肿瘤，DNA修复，干细胞标记，信号转导等数十个研究领域，尤其拥有最全面的组织缺氧研究产品，同时，Novus在自噬、神经生物学等领域拥有非常高的声誉。Novus还为科研者提供重组蛋白、细胞裂解液、ELISA试剂盒等多种产品。  高质量的产品： Novus致力于为全球科研工作者提供高品质产品，因此不断对产品提供最全面的验证数据。 多达207000种产品，每月刷新 超过23000篇引用文献，每日刷新 超过850的使用反馈，每日刷新 185512张验证图片，每日刷新 涉及31个应用领域 涵盖46个物种 涵盖超过42000基因IDs  高质量的服务： 无论您是在寻找适合您的产品还是购买Novus产品后需要技术支持，Novus和联科生物都会为您提供全面优质的实验解决方案以确保您选择更高性价比的产品，强大的技术支持力量，让您实验无后顾之忧。 便捷订购：全国销售网点（北京，上海，广州，南京，苏州，杭州，天津办事处）   技术支持：及时的电话/邮件解答 专业技术团队：详尽的技术资料&FAQs Novus Explorer：生物科研产品及文献查找利器， 扫描右下角二维码，体验Novus Explorer。   活动一：马年买一抗，马上有二抗，Novus携手联科生物祝您马到成功 活动时间：从即日起至2014年3月31日 活动期间，凡从联科生物购买任意一支Novus品牌用于Western实验的一抗，即送一支联科品牌与一抗匹配的50ul的HRP标记二抗，仅限HRP标记抗Goat IgG、Mouse IgG、Rabbit IgG二抗，其它种属的二抗，需要另外购买； 买任意三支Novus品牌用于Western实验的一抗，即送一个联科品牌60ml的ECL试剂盒。 活动二：买Novus一抗，享受半价检测服务 活动时间：从即日起至2014年6月30日 活动期间，凡从联科生物购买任意一支Novus品牌用于Western实验的一抗，即可享受联科生物Western检测服务半价优惠。 活动三：买两支Novus一抗，可四折特价另外获得一支Novus 原装小包装一抗 活动时间：从即日起至2014年6月30日 活动期间，凡从联科生物购买任意两支Novus品牌一抗，即可四折特价另外获得一支Novus 原装小包装一抗（小包装产品列表请下载文档“Novus四折特价优惠小包装产品列表” ）。 活动四：买Novus一抗，加50元即可获得Western Buffer Kit 活动时间：2014年4月1日-2014年9月30日 活动期间，凡从联科生物购买任意一支Novus品牌用于Western实验的一抗，加50元即可获得Western Buffer Kit。 以上活动最终解释权归联科生物技术有限公司   阅读原文：http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014030008.html

　　流式细胞术是一种高敏感度、高效率的细胞生物学研究方法，在临床诊断，疗效评估，以及生物医学研究中被广泛应用。近年来，新一代的功能更强大的流式细胞仪和应用软件不断推出，极大的拓展了流式细胞术的应用领域，所有这些都对流式细胞术的应用者提出了更高的技术知识和应用能力要求。在连续成功举办7期培训班的基础上，浙江加州国际纳米技术研究院定于2014年6月在浙江大学继续举办第八期流式细胞术基础及应用培训班（2014年国家级继续医学教育项目2014-01-04-028 (国)，参加人员考核合格，授予国家级I类继续教育学分10分）。2014年6月16-20日流式细胞术基本原理，技术要点及主要应用流式细胞仪技术应用中的质量控制和实施方法样本制备与保存的基本方法，避免制样误差的要点细胞分型的策略及技术要点多色流式细胞术及补偿调节方法新一代荧光染料在流式细胞术中的应用流式技术新应用－CBA方法介绍流式细胞术在信号传导通路研究中的应用流式细胞术在干细胞研究中的应用全血流式细胞术的技术要点，优势以及应用领域白血病细胞分型的方案及技术要点白血病微小残余病变流式细胞术诊断以及对临床治疗的指导意义流式细胞术在免疫学中的具体应用流式细胞分选术的原理及应用策略流式细胞仪临床新项目开发和应用稀有细胞的检测与分析DNA与细胞周期分析应用原理，数据分析方法Beckman Coulter Karluza 软件介绍及实习BD DIVA软件介绍      本培训班师资力量雄厚，主讲人李奈林博士是国际知名的流式细胞术培训与应用专家，在瑞典卡罗林斯卡研究院开设流式细胞术课程十余年，在北欧享有盛誉。Beckman Coulter公司和BD公司分别选派流式细胞术应用专家全程参与课程培训。课程还聘请了国内知名的专家（如浙江大学汤永民教授，鲁林荣教授，苏州大学血研所朱明清教授等）分别就其专长做应用报告。同时，为满足部分学员对主流流式细胞仪应用软件的学习需求，特设Beckman Coulter Karluza软件和BD DIVA软件操作培训，供学员选择学习。此外，课程还安排专门时间，请所有授课专家就参训人员流式细胞术应用中的实际问题与参训人员进行个案讨论，解决疑难。      热烈欢迎对此班有兴趣的同行踊跃报名，也欢迎学员带着课题或问题前来交流和联系，与我院建立协作关系，进行项目合作，共同申请课题，发表文章。现将参加培训班的有关事宜通知如下：无论您是在寻找适合您的产品还是购买Novus产品后需要技术支持，Novus和联科生物都会为您提供全面优质的实验解决方案以确保您选择更高性价比的产品，强大的技术支持力量，让您实验无后顾之忧。李奈林博士（瑞典 斯德哥尔摩Karolinska医学院 副教授）汤永民教授 (浙江大学医学院附属儿童医院血液肿瘤科主任)鲁林荣教授（浙江大学医学院免疫学研究所）朱明清教授 (苏州大学血研所) BD、Beckman Coulter、联科生物及Life Tech等公司的流式细胞术专家全国医疗保健系统的检验科和中心实验室专业技术人员，以及各大学科研院所的流式细胞仪应用人员。联系人：程老师、宓老师联系电话：0571-88208359、85400649电子邮箱：zcnitraining@gmail.com杭州·浙江大学华家池校区 干训楼（杭州江干区凯旋路268号）1800元/人（含注册费、培训费和资料费等）统一安排食宿，费用自理住宿地点：浙大华家池校区干训楼报到日期：2013年6月15日报到地点：浙大华家池校区干训楼前台（杭州江干区凯旋路268号）请将报名回执发至 zcnitraining@gmail.com报 名 回 执 姓  名  性 别 □男 □女  电子信箱  手 机  专  业  职  称 工作单位  座 机  地  址、邮 编 是否需要安排食宿  □合住双标房 □单住双标房 □否 （打“√”）阅读原文：http://www.liankebio.com/ArticleShow/articleID/2014030007.html