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非洲猪瘟快速诊断检测方案
FAO和OIE推荐方法
通过中国动物疫病预防控制中心产品性能验证
一、概况：
1.实验室总面积：43.56平米。
2.建设内容：结构、给排水、通风空调、电气（强、弱）、废弃物处理、废气处理、设施配套和安装。
3.建设原则：实现食品安全检测实验室操作需求；符合食品安全检测实验室相关建设规范要求；同时满足国家实验室认可委对生物安全实验室的基本要求，为今后实验室通过国家相关标准验收奠定基础。
4.补充说明：目前实验室设计规划完全是假设条件，不可避免会产生部分与实际操作人员习惯不相符的情况。我们的经验应该是要经过现场勘察，与实际专业操作人员进行广泛、多次交流后才能形成科学合理的设计。
二、实验室区域划分：
1.更衣室：一更衣室、二更衣室，用于实验服的更换。
2.缓冲区：控制污染气流和控制压差。
3.试剂配制区：扩增试剂的配制、分装和保存。?
4.样品处理区：样品登记、分装；核酸提取、保存和加样。
5.扩增区：用于样品的扩增。
6.产物分析区：扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
三、所需仪器设备
1.样品采集
采集发病动物或同群动物的全血、血清以及病料组织（如脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏和骨髓等样品，也可用拭子充分擦拭脏器表面或蘸取匀浆液）等。采集的样品应在冷藏和密封状态下运输到相关实验室后，-70℃冷冻保存。
样品采集包（内置耗材可根据实际需求进行调整）：
序号 | 名称 | 规格参数 | 备注 |
1 | 重大动物疫病采样包 | 1个 | 子母包 |
2 | 生物解剖器具包（内含手术刀一把、手术剪刀2把、镊子2把） | 一次性 | 用于组织样品采集 |
3 | 剥皮刀 | 一次性 | 用于组织样品采集 |
4 | 无菌采样袋 | 32*20cm | |
5 | 隔水垫 | 30*30cm | |
6 | 垃圾袋 | 黑色 50个/包 | |
7 | 冻存管 | 2ml | 用于纯缘软蜱样品采集 |
8 | 橡皮筋 | 1包 | 用于全血样品、血清样品采集 |
9 | 试管架 | 5mL | |
10 | 采血盛血器 | 10mL | |
11 | EP管 | 1.5/2ml | |
12 | 抗凝管（EDTA） | 0.5ml | |
13 | 防护服（含塑料鞋套、带帽） | 1套 | 防护装备 |
14 | 手套 | 乳胶1包 | |
15 | 口罩 | 1包 | |
16 | 头戴式探照灯 | 1个 | |
17 | 一次性注射器 | 各规格 | |
18 | 搪瓷托盘 | 1个 | |
19 | 酒精灯 | 1个 | |
20 | 隔水垫 | 30*30cm |
2.试剂配制区
序号 | 名称 | 规格参数 | 备注 |
1 | 各量程移液器 | 1-10ul | |
50ul | |||
10-200ul | |||
1000ul | |||
2 | 试剂冰箱 | 4℃/-20℃ | |
3 | PCR管架 | 1个 | |
4 | PCR管 | 0.2ml | |
5 | EP管 | 1.5/2ml |
3.样本处理区
采集发病动物或同群动物的全血、血清以及病料组织（如脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏和骨髓等样品，也可用拭子充分擦拭脏器表面或蘸取匀浆液）等。采集的样品应在冷藏和密封状态下运输到相关实验室后，-70℃冷冻保存。
序号 | 名称 | 规格型号 | 备注 |
1 | 生物安全柜 | 1个 | 子母包 |
2 | 台式高速离心机 | 1.5mL/24孔转子/最高转速大于10000rpm | 用于组织样品处理 |
3 | 金属浴 | 0.2ml（标准孔）*96 | 用于组织样品处理 |
4 | 样本冰箱/冰柜 | -20℃ | |
5 | 掌上离心机 | 0.5ml，PCR用0.2ml | |
6 | 组织研磨仪 | 2ml*24（钢珠） | |
7 | 高压灭菌器 | 最高工作温度：135℃ 最高工作压力：0.212MPa | 生物安全 |
8 | 涡动仪 | 振荡频率：3000rpm | |
9 | 电子天平 | 精确到0.01g | |
10 | 抗凝管（EDTA） | 0.5ml | |
11 | EP管 | 1.5/2ml | 样本前处理 |
12 | 移液器 | 1-10ul | 样品前处理及PCR反应体系 |
50ul | |||
10-200ul | |||
1000ul | 组织样品处理 |
4.扩增区
序号 | 设备名称 | 规格参数 | 备注 |
1 | 荧光定量PCR仪 | 16孔 | 需连接电脑使用，按检测需求配置 |
48孔 | |||
96孔 |
5.检测试剂
序号 | 试剂盒 | 规格 | 备注 |
1 | 明日达非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测试剂盒 | 48头份/盒 | 必选 |
2 | 组织前处理试剂（组织样本用） | 48头份/盒 | 组织样本用 |
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