科普丨胶体金免疫层析法在畜禽产品兽药残留检测中的应用

在畜禽养殖过程中，为了防止畜禽感染各类疾病导致减少产量，通常会应用一些药物进行相关预防和治疗。而大量的药物应用，会使得相关药物不能完全被畜禽所代谢，储存在畜禽体内，从而形成畜禽产品的兽药残留。畜禽产品中的兽药残留在人体食用后会被人体吸收，从而影响人体健康，是食品安全中的一个重要问题。为控制畜禽产品的兽药残留和保证食品安全，通常会对相关畜禽产品进行兽药残留检验。胶体金免疫层析法就是一种新型的畜禽产品兽药残留的检测方法。

胶体金是一种分散相、粒径为1～100mm，橘红色至紫红色的金溶胶。胶体金可以通过静电作用、疏水作用以及金硫键等相关物理作用方式将蛋白质等高分子吸附并结合在金溶胶的表面。胶体金免疫层析法属于一种标记免疫分析方法，主要是采用纳米金颗粒对相关抗体进行标记，当金标抗体聚集到一定量时，就会形成肉眼可见的紫红色，从而可对抗体和抗原的反应结果进行直观测定。胶体金免疫层析法可分为夹心法和竞争抑制法两种情况，夹心法主要应用于对病毒、细菌、寄生虫等残留的检测，而竞争移植法主要应用于对兽药残留、类固醇、农药等小分子物质的检测。

胶体金免疫层析法操作简单、经济实惠。应用时将被检测样品溶液滴加在试纸上，通过观察试纸颜色的变化确定检测结果。胶体金免疫层析试纸主要由样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫以及pvc胶板等材料构成。将样品溶液滴落在样品垫上，样品溶液在层析作用下经过胶体金标记抗体的结合垫，然后经过包被抗原和二抗检测线（实际应用中也被称作t线）以及控制线（即c线），若样品溶液中含有兽药成分，相关药物成分就会与金标抗体相结合，而不会再与包被抗原发生反应，所以t线就不会显色。反之如果被测样品中包含有相关兽药成分，金标抗体就会与包被抗原发生反应，从而出现显色反应。但无论是否存在相关兽药成分，金标抗体都会与二抗发生反应，所以应用后c线均会发生反应，若c线未发生显色反应，则提示本次检测失败。

胶体金层析法为近年来新出现的一种标记免疫分析检测技术，在畜禽产品药残留检测的应用中相对应用较少。但近年来已经有很多研究证实，胶体金层析法在畜禽产品兽药残留的检测中应用价值较高。特别是对抗生素药物、磺胺类药物、呋喃类药物以及兴奋剂药物等相关兽药残留的检测应用效果较好，并得到科学地实验证实。比如近年就有研究报道指出，应用胶体金层析法检测猪肉中氯霉素残留，其检测限达0.3μg/kg，其检测结果与液相色谱-串联质谱法的检测结果基本一致，其检测时间均控制在10分钟以内；在检查猪肉中磺胺甲噁唑残留中，有研究报道其检测下限可达到20μg/l，且其与磺胺嘧啶、四环素、青梅等无交叉反应，其检测灵敏度高，特异性强。对呋喃类药物的检测，可根据其与代谢物质作为残留的标识物进行检测。而对β-兴奋剂的检测可通过对相关动物的血液、尿液粪便等进行检测，以确定其体内是否存在β-兴奋剂。

在畜牧、家禽养殖过程中，为了保证其产量，通常会对相关畜禽给予一定药物进行预防和治疗相关疾病。随着药物的应用量的增多，通常其残留在畜禽体内的药物残留量较大。当人食用相关畜禽产品后，其产品中的兽药残留可能会被人体吸收，从而影响人体的健康。比如残留的抗生素可能会导致食用者出现过敏、耐药性增强、毒性反应、致畸、致癌等，残留的磺胺类药物可能会对食用者神经系统、泌尿系统、造血功能等造成损害，呋喃类药物残留可致癌、诱导突变，残留的β-兴奋剂也可能损害人体的神经系统等多系统功能。所以控制畜禽产品兽药残留，确保食品安全，已成为当下全社会关注的焦点。当前，随着相关科技地不断创新和发展，对相关畜禽产品的兽药残留检测手段较多。在实际应用中较为常见的可分为色谱分析法、微生物抑制分析法以及标记免疫分析法。其中标记免疫分析法又可以分为胶体金免疫分析法、放射性免疫分析法、酶联免疫分析法、荧光免疫分析法等多种方法。胶体金免疫分析法由于其操作简便，不需要任何辅组仪器以及相关试剂，同时其测试速度快，一般只需要3～15min即可测得其结果，且其可以通过肉眼直接观看检测结果，其实践应用性强，特别是对相关畜禽产品兽药残留的初筛检验中应用价值极高。