雌二醇放射免疫分析药盒说明书

         大鼠碘[125I]雌二醇放射免疫分析药盒说明书

【产品名称】

通用名：大鼠碘[125I]- 雌二醇放射免疫分析药盒

汉语拼音：DA SHU Dian[125I] Ci’erchunFangshemianyifenxi Yaohe

英文名:RAT Iodine[125I]- Estradiol Radioimmunoassay Kit

简称：大鼠碘[125I] 雌二醇(E2)放免药盒

【使用目的】

用于定量测定大鼠血清（或血浆）中雌二醇(E2)的浓度。

【临床意义】

雌二醇是一种 18 碳类甾体激素，分子量为272D。在女性，月经周期的卵泡期由卵泡内膜细胞与颗粒细胞分泌；黄体期由内膜黄体细胞分泌；妊娠期由胎盘合成。在男性，则由肾上腺皮质网状带分泌的雌烯二酮在外周转化而来；也可由睾丸Sertoll 氏细胞转化而成。测定E2对青春期前女性内分泌疾病的诊断，对闭经、月经紊乱、卵巢功能评估有重要意义，是研究生殖生理和诊断不孕症的重要手段。

【试验原理】

本品采用竞争性放射免疫分析方法，将放射性标记抗原和非标记待测抗原同时与限量特异性抗体进行竞争结合反应，通过分离未结合的标记抗原，测定标记抗原-抗体复合物的放射性计数，利用标准曲线和RIA的数学模型计算样品中待测物质的含量。 

【放射性核素半衰期】本品所用核素为碘[125I]，其物理半衰期(T?)为59.7天。

【试剂成分】

1.125I- E2： 1瓶，放射性活度< 0.11MBq/瓶(100管)。

2.E2 标准品：共7 瓶淡黄色液体（去激素人血清配制）。浓度分别为：0；10；50；100；250；500；1000pg/ml。
3.兔抗-E2 抗体： 1瓶，蓝色液体（兔抗） 。

4.质控血清：2瓶，淡黄色液体。参考值范围：质控血清I  56.5±12.8pg/ml
                                          质控血清II 248.6±58.6pg/ml
5.分离试剂： 1瓶，悬浮液（含驴抗兔血清和PEG）。

【适用仪器】适用于各类ν-放射免疫分析仪。
【样本收集和保存】

     取静脉血分离血清，勿需加防腐剂及其它处理，溶血和脂血标本影响测定结果。 如不立即测量，可将样品密封后，置于2～8℃或-20℃储存备测，2～8℃保存不应超过1周，-20℃保存不超过2个月。冰冻样品在保存过程中应避免反复冻融。冰冻样品测定前，将样品置于室温或常温水中融化，并充分摇匀。

【测定步骤】

取圆底聚苯乙烯试管若干，用记号笔或特殊铅笔编号NSB、S0～S5和待测样品管等，然后用微量加样器按下表加样。加样前所有试剂（尤其分离剂！）包括待测样品要摇匀，并且最好平衡到室温。

加样程序表                                                  单位：μl

         管别

试剂

总T

NSB

S0

S1-6

样品或质控管

纯化水

—

100

—

—

—

“0” 标准品 

—

100

100

—

—

 标准品(S1～S6)

—

—

—

100

—

质控血清或样品

—

—

—

—

100

兔抗-E2抗体

—

—

100

100

100

125I-E2

100

100

100

100

100

混匀，37℃水浴1小时。

       分离试剂

—

500

500

500

500

充分摇匀，室温放置15分钟，3600转/分钟离心15分钟，吸弃上清，测各沉淀管的放射性计数。

【数据处理】

（1）联机处理：由电脑自动处理得出结果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，处理软件也不一样，用户一定要使用适合的处理软件进行数据处理。在此建议用户使用logit-log或四参数数据处理模式。

（2） 设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B，非特异管计数为NSB，则百分结合率计算公式为：B/B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100%

以上各标准品B/B0%为纵轴，以相应浓度为横轴，在logit-log或半对数坐标纸上绘制剂量反应标准曲线，待测样品浓度可在标准曲线上查出。

【参考正常值】

女性：     绝经期 <60 pg/ml

          青春期前<8pg/ml  

           卵泡期 10-90 pg/ml

           排卵期 100-500 pg/ml

           黄体期 50-240 pg/ml

男性：青春期前<10pg/ml；成人 <70 pg/ml

建议各实验室应建立本实验室的正常值范围，以上数据仅供参考。

【技术指标】

1. 非特异结合率（NSB）：<5% 

2. 零管结合率 ：>30% 

3. 灵敏度:<5pg/ml。

4. 精密度：批内变异系数 <10%；批间变异系数 <15%。

5. 准确度：回收率94-109%

6. 标准曲线：相关系数>0.990

7. 单位换算：（pmol/ml）=(pg/ml)×3.67

【禁忌】本品仅供体外科研实验用！

【注意事项】

1. 收到试剂盒后，尽快存放在2～8℃。使用时所有试剂包括待测样品事先应在室温平衡。使用时须充分摇匀。

2. 分离试剂在2～8℃保存，不可冰冻。  

3. 离心速度可用3000转/分，但至少30分钟。离心时机内温度在4-25℃之间。

4. 不同批号试剂不能混合使用，建议样品做双管检验。

5. 本实验使用放射性同位素，操作应由经过培训的专业技术人员按放免检验的规定进行。产生的放射性废物应按国家有关规定处理。

 【孕妇及哺乳期妇女用药】无特殊要求

【贮藏】2～8℃保存。

【有效期】42天。