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产品名称:人核基质蛋白22(NMP-22)Elisa Kit。
规 格:96T/48T
检测标本:血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清,组织匀浆等
检测方法:ELISA
检测类型:酶联免疫夹心法
运输保存:2~8°保存6个月
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人核基质蛋白22(NMP-22)Elisa Kit,抗血清的制备方法:
有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。
作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清,用于免疫的动物应适龄,健壮,无感染性疾患,最好为///雄性,此外还需十分注意动物的饲养,以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。若用兔,最好用纯种新西兰兔,一组三只,兔的体重以2~3kg为宜。
免疫途径
免疫途径有多种多样,如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等,一般常用皮下或背部多点皮内注射,每点注射0.1ml左右。途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物学活性抗原,一般不宜采用静脉注射。
免疫方法
抗原剂量,首次剂量为300~500μg,加强免疫的剂量约为首次剂量为1/4左右。每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂,首次免疫时皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必注射百日咳疫苗。
在第2次加强免疫后2周,从耳缘静脉取2~3ml血,制备血清,检测抗体效价。如未达到预期效价,需再进行加强免疫,直到满意时为止。当抗体效价达到预期水平时,即可放血制备抗血清。
人核基质蛋白22(NMP-22)Elisa Kit,包被条件与封闭:
包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过夜,37℃中保温2h被认为具有同等的包被效果。包被的最适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/mL-20ug/mL。
封闭(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。抗原或抗体包被时所用的浓度较低,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥在ELISA其后的步骤中干扰物质的再吸附。封闭的手续与包被相类似。最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,其最大的特点是价廉,可以高浓度使用(5%)。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用,但由于奶粉的成份复杂,而且封闭后的载体不易长期保存,因此在试剂盒的制备中较少应用。
封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月。
人核基质蛋白22(NMP-22)Elisa Kit,其他部分相关Elisa Kit:
人核基质蛋白22(NMP-22)Elisa KitHuman Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit
人软骨寡聚蛋白(COMP)Elisa KitHuman cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit
人多药耐药相关蛋白(MRP)Elisa KitHuman multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit
人高速泳动蛋白17(HMG-17)Elisa KitHuman high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit
人空泡毒素相关蛋白A(VacA)Elisa KitHuman Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit
人玻连蛋白/体外粘连蛋白(VN/CD51+CD61)Elisa KitHuman vitronectin,VNR ELISA Kit
人波形蛋白(VIM)Elisa KitHuman vimentin,VIM ELISA Kit
人表面活性蛋白D(SP-D)Elisa KitHuman Surfactant Protein D,SP-D ELISA Kit
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)Elisa KitHuman arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit
人β乳球蛋白(β-Lg)Elisa KitHuman β Lactoglobulin,β-Lg ELISA Kit
人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)Elisa KitHuman β catenin,β-Cat ELISA Kit
人淀粉样前体蛋白(βAPP)Elisa KitHuman β amyloid precursor protein,βAPP ELISA Kit
人β2糖蛋白(β2-GP)Elisa KitHuman beta2 glycoprotein,β2-GP ELISA Kit
人α乳清蛋白(α-La)Elisa KitHuman α Lactalbumin,α-La ELISA Kit
人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)Elisa KitHuman N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit
人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)Elisa KitHuman Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit
人脑红蛋白(NGB)Elisa KitHuman Neuroglobin,NGB ELISA Kit
Kit
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:人核基质蛋白22(NMP-22)Elisa试剂盒操作说明
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人核基质蛋白22(NMP-22)水平。用纯化的人核 基质蛋白22(NMP-22)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入核基 质蛋白22(NMP-22),再与HRP 标记的核基质蛋白22(NMP-22)抗体结合,形成抗体-抗原- 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的核基质蛋白22(NMP-22)呈正相 关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人核基质蛋 白22(NMP-22)浓度。
生物产业
2014/04/23
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企业名称
上海雅吉生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001060688
成立日期
2011-04-17
注册资本
50
经营范围
上海雅吉生物科技有限公司
公司地址
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