尿素(电泳级)干粉实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。尿素(电泳级)干粉小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
尿素(电泳级)干粉注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
尿素(电泳级)干粉其它产品信息:
100369 维生素B2 对照品 HPLC法含量测定用
100370 泛酸钙 对照品 HPLC含量测定
100371 乌苯美司 对照品 含量测定
100373 阿苯达唑 对照品 含量测定
100374 苯磺酸氨氯地平 对照品 含量测定
100375 盐酸特拉唑嗪 对照品 HPLC法含量测定
100379 氨力农 对照品 UV法含量测定
100380 更昔洛韦 对照品 含量测定
100381 肾上腺色腙 对照品 含量测定
100384 大蒜素 对照品 UV法含量测定
100385 豆腐果苷 对照品 HPLC含量测定
100386 哌拉西坦 对照品 含量测定(HPLC)
100387 夫拉扎勃(原:呋咱甲氢龙) 对照品 UV法含量测定
100388 依托泊苷 对照品 HPLC法含量测定
100396 枸橼酸 对照品 HPLC法含量测定用
100401 顺铂 对照品 含量测定(HPLC)
100407 棓丙酯 对照品 含量测定
100408 氯美扎酮 对照品 UV法溶出度检查
100410 磷酸氢钙 对照品 UV法含量测定
100411 磺胺二甲嘧啶 对照品 HPLC含量测定
100412 磺胺脒 对照品 HPLC法含量测定
100414 去甲斑蝥素 对照品 含量测定(UV)
100415 芬布芬 对照品 含量测定用
100416 曲可芦丁 对照品 HPLC法含量测定用
100417 二羟丙茶碱 对照品 HPLC法含量测定
100418 茜素双酯 对照品 UV法含量测定
100419 苯甲酸 对照品 HPLC法含量测定用
100420 盐酸地巴唑 对照品 HPLC法含量测定用
c 磷酸氯喹 对照品 HPLC法含量测定用
100422 盐酸异丙嗪 对照品 含量测定(HPLC)
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