单菌落质粒DNAout试剂盒

单菌落质粒DNAout试剂盒实验要点 

1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  

2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 

3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。单菌落质粒DNAout试剂盒小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。

单菌落质粒DNAout试剂盒注意

1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。     

2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。      

3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。

单菌落质粒DNAout试剂盒其它产品信息：

TC-axbz-018 大鼠乳腺癌细胞 SHZ-88

TC-axbz-019 小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0

TC-axbz-020 鼠骨髓瘤细胞 SP2/0-Ag14

TC-axbz-021 小鼠骨髓瘤细胞 P3-X63-Ag8.653

TC-axbz-022 小鼠骨髓瘤细胞 P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]

TC-axbz-023 小鼠骨髓瘤细胞 FO

TC-axbz-024 小鼠淋巴瘤细胞 Yac-1

TC-axbz-025 小鼠淋巴瘤细胞 EL4

TC-axbz-026 小鼠淋巴瘤细胞 EL4.IL-2

TC-axbz-027 小鼠黑色素瘤细胞 B16F1

TC-axbz-028 鼠黑色素瘤细胞系 B16-Fo

TC-axbz-029 小鼠黑色素瘤高转移细胞 B16F10

TC-axbz-030 小鼠黑色素瘤细胞 B16BL6

TC-axbz-031 小鼠黑色素瘤细胞 B16

TC-axbz-032 小鼠SRSV转化的3T3细胞 SRSV/3T3

TC-axbz-033 小鼠胚胎成纤维细胞 BALB/3T3 clone A31

TC-axbz-034 小鼠肝癌细胞 H22

TC-axbz-035 小鼠肝癌细胞 Hepa 1-6

TC-axbz-036 大鼠肝癌细胞 CBRH-7919

TC-axbz-037 大鼠肝癌细胞 RH-35

TC-axbz-038 小鼠畸胎瘤细胞 F9

TC-axbz-039 小鼠畸胎瘤细胞 P19

TC-axbz-040 大鼠神经胶质瘤细胞 C6

TC-axbz-041 小鼠脑神经瘤细胞 Neuro-2a

TC-axbz-042 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 PC12

TC-axbz-043 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化) PC-12

TC-axbz-044 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化) PC-12