蛋白复性液实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。蛋白复性液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
蛋白复性液注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
蛋白复性液其它产品信息:
xy-E11299 人维生素D(VD)ELISA试剂盒
xy-E11300 人维生素K1(VK1)ELISA试剂盒
xy-E11301 人维生素B12(VB12)ELISA试剂盒
xy-E11302 人维生素D3(VD3)ELISA试剂盒
xy-E11303 人维生素D2(VD2)ELISA试剂盒
xy-E11304 人维生素E(VE)ELISA试剂盒
xy-E11305 人维生素A(VA)ELISA试剂盒
xy-E11306 人鸟苷酸交换因子(GEF)ELISA试剂盒
xy-E11307 人维生素D受体(VD R)ELISA试剂盒
xy-E11308 人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒
xy-E11309 人金葡菌肠毒素(SE)ELISA试剂盒
xy-E11310 人钙联蛋白(CNX)ELISA试剂盒
xy-E11311 人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA试剂盒
xy-E11312 人β细胞素(BTC) ELISA试剂盒
xy-E11313 人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒
xy-E11314 人胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒
xy-E11315 人胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒
xy-E11316 人胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒
xy-E11317 人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒
xy-E11318 人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMV IgM)ELISA试剂盒
xy-E11319 人抗弓形体IgM抗体(anti-tox IgM)ELISA试剂盒
xy-E11320 人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RV IgG)ELISA试剂盒
xy-E11321 人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒
xy-E11322 人孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒
xy-E11323 人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒
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