ELISA试剂盒的试验条件相同时

    ELISA试剂盒包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18～24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被后，在其它，观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg/ml。但操作中的各个环节对试验的检查作用影响较大，如不留意，有也许致使显色不全、花板等成果。 

    下面将操作中各个环节常出现疑问解决办法总结如下：试剂要选择质量优秀的检查试剂，严厉依照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。标本收集与保留：防止运用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本；2-8℃下，标本可放置24-48小时，长时间保留需放置-20℃下，请防止重复冻融。  

ELISA试剂盒详细请参照：       

1.洗涤液：用前制造，有的试剂盒会标明，配好的4度下一般能够放一个月，假如没有标明，尽量用新鲜的，不要多制造；

2.显色液（有A液和B液的），用前15分钟制造；  

3.规范品：有的试剂盒中规范品是现已制造好的，4度保留，有的是要现制造的，依照说明书操作；  

4.浓缩生物素联系的二抗和HRP：假如需求制造，试剂盒没注明配好能够保留多久的话，尽量现配现用（用前15分钟制造）；原则是试剂盒上没有指出制造物的贮藏方式的话，应当现配现用；不要怕麻烦；还有小瓶的管子开盖前要离心，ELISA试剂盒避免盖子上粘连今后总量不行；

5.加样：室温温育的试剂，格外是温育时间比较短的试验操作的试剂，加样对数据的影响比较大，格外要留意加样疑问。