ELISA试剂盒真假鉴别方法

上海基免

2014/07/26 09:03

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ELISA试剂盒鉴别方法：
Ⅰ. 利用干扰实验即可辨别ELISA试剂盒是否检测目的抗原，方法如下：
（1）将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液
（2）37℃孵育15分钟后，代替原试剂盒中的检测抗体
（3）后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物
（4）实验完毕后，检测其标准曲线，如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配，试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原，该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。（5）如果标准曲线无线性，则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰，影响了其实际试剂盒抗体的检测作用，则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。
Ⅱ.如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B，利用交叉实验即可辨别ELISA试剂盒是否造假，方法如下：
（1）取出购买的试剂盒A的包被板两条。
（2）一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
（3）另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
（4）后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物。
（5）实验完毕后，检测两条标准曲线，如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B，即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
（6）如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标，试剂盒A只能检测A，不能检测B，即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。