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2013-11-07 12:42
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ELISA是一种用酶标记抗原或抗体,在固相反应板上进行抗原抗体反应的方法。常用于检测体液中的微量抗原和抗体,具有灵敏度高、特异性强、操作简单、容易判断等优点。其检测方法、注意事项、结果分析等详见检测试剂的说明书。
大鼠血管舒缓激肽ELISA试剂盒为了检测抗原可用夹心法。将特异性抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯制成的小管、小盘或小孔)上,然后加被测溶液,倘样品中有相应抗原,则与抗体在载体表面形成复合物。洗涤后加入酶标记的特异性抗体,后者通过抗原也结合到载体的表面。洗去过剩的标记抗体,加入酶的底物,在一定时间内经酶催化产生的有色产物的量与溶液中抗原含量成正比,可用肉眼观察或分光光度计测定。
大鼠骨特异性碱性磷酸酶B ELISA试剂盒实验目的
1、 熟悉酶免疫技术基本原理和方法、免疫荧光技术的基本原理。
2、 了解酶联免疫吸附实验(间接法)的基本过程及其作用。
目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),它是使抗原或抗体吸附于固相载体,使随后进行的抗原抗体反应均在载体表面进行,从而简化了分离步骤,提高了灵敏度,即可检测抗原,也可检测抗体。实验方法包括间接法、夹心法及竞争法。
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流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。