熬和树脂 Chelex 100 sodium form

熬和树脂  Chelex 100 sodium form

原代细胞共性

原代细胞现在广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA、RNA和遗传学研究等，还应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。原代细胞在生物医药领域有不可替代的作用，市场前景十分广阔。我国原代细胞用于实验才刚刚开始，随着实验要求的提高和全球生物医药研发重心的东移，我国对原代细胞的需求在逐年递增。

除了部分终末分化的细胞，一般的细胞都能传代8-10代及以上，有些细胞甚至更多，但是一般都建议客户采用3-4代以内的细胞。

在原代细胞培养过程中，一般是初次培养过夜后换液，以后每隔2-3天换一次液，以培养液的颜色为标准，一般变黄后就需换液。原代细胞的传代前期一般是3-4天传一次代，后期一般是4-6天传一次代（前期指前三代，后期指三代后）。

四，细胞系（Cell Line） 系由系列传代培养的第一次培养或其中任何阶段培养制备的细胞群（非原始培养细胞）。该细胞群通常是非均质的。

熬和树脂  Chelex 100 sodium form

生产方法：

原料处理 利用右旋糖酐划分液，回收相对分子质量5000-7500的作原料。

　　脱色、混合 在容器中加水约300ml，加热煮沸后，加右旋糖酐100g，搅拌至全部溶解，补加水配制成100g/L。按右旋糖酐质量配比加30g/L(3%)活性炭，搅拌，煮沸15-30 min，用3号垂熔漏斗过滤，得澄明滤液，放冷至室温。取滤液至适当容器中，在搅拌下加入650g/L(65%)三氯化铁溶液200ml，搅拌均匀，得混合液。

　　右旋糖[蒸馏水，活性炭]→[煮沸]滤液[FeCl3]→混合液

　　催化 在100mm×100mm玻璃离子交换柱内，装701苯乙烯型弱碱性阴离子交换树脂，用100 g/L (10%)NaOH做再生剂，是树脂转成阴离子OH型，流出液pH7-8，无氯化物，比电阻在50kΩ/cm以上，供催化反应用。

　　将再生好的树脂柱内的水位放至树脂界面处，倒入混合液，进行动态催化反应，流出速度控制在15ml/min为宜。当深红色右旋糖酐铁流出时，立即取样检查pH值、氯化物和比电阻，其pH应在8以上，氯化物应为阴性，比电阻在2kΩ/cm以上，合格后收集。当混合液下降到树脂界面时，开始用水洗脱，进水速度控制在和流出速度相同，一般可收集到2-3L流出液。

　　混合液[701树脂柱]→流出液（右旋糖酐铁）

　　浓缩 取上述流出液进行减压浓缩，温度45-65℃之间，至1L时停止蒸馏，取样测定含铁量并酌情调节含铁量，使成2.5%。

　　流出液[40-65℃，减压]→浓缩液

　　制剂 将配好的溶液，经3号或4号垂熔玻璃漏斗过滤，按灭菌制剂操作，分装，封口，112℃，30min灭菌，即得右旋糖酐铁注射液成品。

　　浓缩液[112℃，30min]→右旋糖酐铁注射液成品。[1]