IREB2 人铁反应元件结合蛋白2(IRE-BP 2)ELISA Kit

IREB2 人铁反应元件结合蛋白2(IRE-BP 2)ELISA Kit

ELISA测定结果分为定量和定性两大类。1.定量测定则是对比昂本中待测抗原的多少进行量值测定，一具体数值表示。它是用于非病原体抗原物质的测定。如激素，细胞因子，肿瘤标志物，小分子药物等。定量测定的“量值”依据是试剂盒中所带标准品同时测定得出的剂量反应曲线(又称标准曲线)。2、定性测定只是对标本中是否含有待测定抗原或抗体做出“有”或“无”的结论，分别用“阳性”和“阴性”来表示。通常是用于传染性病原体的抗原或抗体的测定，以判断特定病原体感染的存在与否。定性测定的“阳性”和“阴性”的判定依据必须是试剂盒所确定的阳性判定值。以前很多基层实验室均使用卫生部临床检验中心供应的弱阳性定值质控血清(以前也称“临界值”血清)的测定吸光度来判定结果，高于其判为阳性，反之为阴性，而不管试剂盒CUT-OFF值如何。

IREB2 人铁反应元件结合蛋白2(IRE-BP 2)ELISA Kit

操作步骤

1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。 每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加   入50ul于反应孔内。

3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物 素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3   次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9）在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结果判断与分析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测物质标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。