解决方案——食品中维生素C的测定

抗坏血酸，是一种多羟基化合物，化学式为C₆H₈O₆，具有2个手性碳原子，分为L-抗坏血酸和D-抗坏血酸。L-抗坏血酸为左式右旋光抗坏血酸，具有强还原性，对人体具有生物活性；D-抗坏血酸又称异抗坏血酸，具有强还原性，但对人体无生物活性。

L-抗坏血酸，常称维生素C，广泛存在于新鲜的蔬菜水果中，如西红柿、菜花、柿子椒、深色叶菜、苦瓜，柑橘、柚子、苹果、葡萄、猕猴桃、鲜枣等；人工合成维生素C常添加于功能饮料、功能性保健食品中，作抗氧化作用，清除自由基、促进抗体形成及参与人体内许多重要的生物合成反应。

D-抗坏血酸是以葡萄糖等为原料，经发酵制得的2-酮基-D-萄糖酸，再经酯化、酸化、精制等步骤生产的食品添加剂，一般作护色剂和防腐剂，常用于肉类制品、鱼肉制品、水果罐头等食品加工中，防止细菌生长、与亚硝酸盐、硝酸盐合用提高肉类制品的发色效果。

《食品安全国家标准 食品中抗坏血酸的测定GB 5009.86-2016 》规定了L-抗坏血酸和D-抗坏血酸的测定，但不同构型的抗坏血酸在食品中作用差异巨大，因此，考察L-抗坏血酸和D-抗坏血酸的分离度、方法稳定性和结果重现性至关重要。

抗坏血酸属于大极性化合物，在C18柱上保留弱、出峰时间过早，容易与溶剂峰发生重叠，影响抗坏血酸的定性和定量。但我们可以从两方面来增强抗坏血酸在色谱柱上的保留，避免溶剂峰干扰：

一、流动相中加入离子对试剂，延长抗坏血酸的保留时间；

二、使用混合模式的色谱柱Acclaim Mixed-Mode WAX-1，拥有疏水性烷基链和可电离的叔胺末端，提供疏水性反相保留和弱阴离子交换，大大提高了极性化合物在色谱柱上的保留能力。

Acclaim Mixed-Mode WAX-1测试维生素C谱图

L-抗坏血酸和D-抗坏血酸连续6针进样，保留时间RSD均小于0.5%，响应值RSD均小于1.0%。

参考文献：

Thermo Scientific™ application, Acclaim Mixed-Mode WAX-1 应用于食品中L-抗坏血酸和 D-异抗坏血酸的测定