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层析技术原理

百典仪器

2016/05/10 10:11

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层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质(吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等)的差异,在两相运动中,不断地进行交换、分配、吸附及解吸附等过程,可将各组分间的微小差异经过相同的重复过程而达到分离。配合相应的光学、电学和电化学检测手段,可用于定性、定量和纯化某种物质,其纯度高达99%。层析法的特点是分离率、灵敏度(pg-fg级)、选择性均高的一种分离方法。尤其适合样品含量少,而杂质含量多的复杂生物样品的分析。层析技术按照层析原理可分为吸附层析法、分配层析法、离子交换层析法、凝胶层析法、亲和层析法;按照操作形式可分为柱层析法、薄层层析法、纸层析法、薄膜层析法。

在层析柱内放入凝胶,将混合液体或者混合凝胶状物体倒入层析柱内,混合物的颗粒大小不同,重量不同,因此与凝胶相融度不同,重量大且体积小的可以先从层析液中透过,较早达到层析柱底部,通过管路分离出来;而重量小或者体积大的,则下沉速度较慢,较晚的分离出来;在这种分离过程中,要求产品震动小,如果产品的震动大,则会影响混合液与凝胶的融合度,不能进行有效的分离;


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