Invivo2 500低氧工作站（低氧培养箱）

心肌梗死后细胞死亡导致的功能性心肌细胞的丧失对于随后的心室重构、心功能障碍和心力衰竭最为关键。大量研究表明，自噬失调可能导致心肌细胞死亡。然而，自噬失调介导的细胞死亡的潜在机制仍不清楚。本文研究表明，在体内和体外对心肌缺血性损伤的反应中，自噬活性迅速增加，但随后是受损的自噬降解过程，这由到心肌梗死后12周的持续较高水平的beclin1 所证明，同时，LC3 和p62 的积累增加。串联mRFP- GFP-LC3 腺病毒和溶酶体抑制剂氯喹的结果都支持缺血损伤诱导的缺陷性自噬。重要的是，我们发现受损的自噬流，不仅由自噬抑制剂绿奎诱导，也由beclin1 敲除遗传学诱导，上调RIP3 的表达，并加重OGD 诱导的心肌细胞凋亡和心功能障碍。同时，心脏特异性beclin1 过表达上调自噬部分改善了心梗后的心功能障碍。此外，通过强制心脏特异性过表达RIP3 引起的坏死性激活加重了坏死性心肌细胞死亡、MI 后心脏重塑和心脏功能障碍，但所有这些都可以通过RIP3 敲除抑制坏死而得到改善。总之，这些结果表明自噬功能障碍介导的神经细胞凋亡在机械上导致心肌梗死后心肌细胞丢失、心室重构不良和进行性心力衰竭。抑制坏死可能是预防梗死后心脏重构和心力衰竭的潜在靶点。

丹参素对急性心肌梗死(AMI)诱发的心功能下降和心肌重塑有保护作用，但其剂量-效应关系及其作用途径尚不清楚。本研究采用丹参素不同剂量(7.5、15 和30 mg/kg/d)给AMI 模型大鼠灌胃21 d，在体内评估生存率、超声心动图和组织学分析；采用MTT 法、流式细胞术、Western blotting 等方法研究丹参素对H9C2 细胞的细胞毒性和抗凋亡作用。机制上，研究了MAPK 效应因子和p38 在体内的激活。结果表明，中、高剂量丹参素能明显改善心功能，减少梗死面积和心肌纤维化。中剂量对心功能的保护效果最好，而高剂量对细胞凋亡和组织学改变的保护效果最好。在体内，丹参素显著抑制JNK 的激活，这可能有助于解释自噬对AMI 诱导的凋亡的以及剂量效应关系的差异。综上，本研究提示JNK 抑制在丹参素诱导的心肌梗死抗凋亡作用中起重要作用，且中剂量丹参素在体内的抗凋亡作用最强。