目前随着生物医学研究的深入,多肽药物开发已拓展到多种适应症领域,包括糖尿病、肿瘤、抗感染、减肥、疫苗、诊断等。从业者或手动合成多肽,或采用用多肽合成仪进行半自动/全自动的合成;而多肽纯化通常采用制备色谱纯化收集。
多肽通常需要单独的机器进行合成或纯化,导致通量低、操作复杂。为了高效的多肽药物研发,开发人员寻求简化、可靠的解决方案。有没有可能在一台仪器上同时实现多肽合成与多肽纯化的功能呢?
答案是肯定的
随小编一起了解下Protein Technologies,Inc.(PTI)公司的解决方案:
美国多肽合成仪研发与制造商Protein Technologies,Inc.(PTI)公司【即Gyros Protein Technologies公司】生产多款全自动多肽合成仪,包括PurePep®Chorus(2,4,6通道),Symphony®X(24通道),PurePep®Sonata+(单通道工业级)。PurePep®Chorus与Symphony®X均支持多通道平行多肽合成,可满足科研客户及医药研发企业的实验需求。
近年来PTI公司又推出了PurePep EasyClean (PEC)多肽纯化技术,进一步打破了多肽生产的壁垒。开发者设计了一种基于新型无痕可裂解连接分子(PEC-Linkers)和活性过滤材料的捕获-释放方法,用于合成多肽的纯化和修饰。PTI公司生产这些创新的PEC-Linkers,并为您提供第一个广泛适用的肽纯化试剂盒以及相关耗材,方便您迅速的将该技术应用于多肽化学实际工作中。
通过捕获和释放的方法进行PEC纯化的方案包括下图所示的六个步骤
1
Linker偶联目标肽:在固相肽合成(SPPS)结束时,将PEC-Linker偶联到目标肽上。(每个氨基酸偶联循环作封端反应。)
2
切割肽:使用TFA混合溶液从SPPS树脂上切割肽
3
沉淀并溶解肽
4
捕获Linker:通过共价捕获(“Catch”)将肽链偶联在活化的过滤材料上
5
洗脱非目标肽:漂洗,共价捕获允许洗出未结合的物质,例如截断的序列、副产物等,并且您能够选择性地修饰结合的未受保护的肽。
6
a) Linker还原:PEC-Linker的还原使系统致敏,以保障安全释放多肽;
b)酸敏感化释放:通过弱酸性试剂洗脱(“Release”)目标肽
PurePep EasyClean (PEC)多肽纯化技术详细介绍,请参考无需HPLC,一种实现多肽高效纯化的新方法
PurePep® EasyClean Auto Kit
PTI公司推出的PurePep® EasyClean Auto Kit,可在多肽合成仪上使用,进行多肽纯化。PurePep EasyClean自动化试剂盒是您的终极解决方案,可实现自动化平行纯化多肽。该套件包含PEC-Linker,预先填充活化过滤材料的墨盒,以及所需耗材,量身定制,以适应您现有的PurePep®Chorus多肽合成仪或Symphony®X多肽合成仪。
试剂盒组成
品类 | 内容 |
PEC-Linker | RC+ |
活性过滤材料 | 6个墨盒(Agarose100填充) |
耗材 | 6个45mL反应器 1个SingleShot玻璃管 |
还原剂 | DL -二硫苏糖醇 |
封闭剂 | L -半胱氨酸 |
缓冲液 | 缓冲柠檬酸-碳酸钠的混合物 |
主要特点
3个手动步骤(仪器设置;加入多肽产物并运行;收集多肽与乙醚沉淀)
与色谱法相比,每次肽纯化的手动操作时间减少90%
6条或更多的自动多肽纯化所需时间不到6小时
与传统色谱相比,毒性溶剂使用减少85%
该试剂盒适用于在PurePep®Chorus或Symphony®X多肽合成仪上平行纯化6 x 100 μmol(Synthesis scale)多肽。
PurePep®Chorus多肽合成仪结合了稳定自动化的多肽合成、多肽切割及多肽纯化;可先平行合成6条不同肽序,并原位切肽,然后在同一台仪器上,平行纯化6条多肽;使用感应加热能快速合成多肽,同时正交捕获-释放PurePep EasyClean (PEC)技术可实现高效多肽纯化;可有效应用于疏水肽(hydrophobic peptides)及聚集肽(aggregating peptides)的合成与纯化。
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