应用报告|发酵液过滤膜后浊度在线检测

图 1：发酵液膜后滤液在线检测平台

简介

材料和方法 

仪器和附件

➢ UV7 紫外可见分光光度计

➢ 天平（ME4002E）

➢ PendoTECH 压力传感器

➢ 相应连接管路

➢ LongerPump 蠕动泵

➢ MA1HC027H1深层过滤膜包(一级膜和二级膜)

➢ 1.0cm光程流通池

➢ LabX

样品和试剂

➢ 发酵液

➢ Tris-HAC缓冲液

➢ 去离子水

在线平台搭建 

蠕动泵+过滤膜包+UV7 

过滤膜包后管路与流通池连接，流通池出液口下方由浊度杯收集，进行离线检测，如图 1 所示。 

不同浊度发酵液样品（一级膜测试）

• 发酵液离心获取上清液(39.7NTU)，作为稀释液

• 用上步稀释液对发酵液原液进行稀释，如表1 所示(使用 Hach2100Q 检测不同稀释样品的浊度)

不同浊度发酵液样品（二级膜测试） 

• 使用 Tris-HAC 缓冲液对发酵液进行不同浓度的稀释，如表 1 所示

测量步骤

• 先使用离线的方法，对制备的不同浊度的样品进行吸光度 A 的检测，并使用二次曲线拟合方式获得，吸光度与浊度关系曲线，如图3、图 4 所示；

• 获得浊度标准曲线后，按照下面所列的定量检测方法参数，以每 min 读取一次数值获得在线动态检测膜后发酵液的浊度(NTU)值；

• 获得浊度(NTU)数值后，以生物载量(L/m2)为横坐标，浊度(NTU)为纵坐标，绘制两者相互关系图，观察浊度动态曲线图，以评估3 种检测方法的浊度变化趋势，同时对比三种方法几个数据采集点的浊度(NTU)数值。

结果 

Y=94.19302X2+81.21537X+36.77241，线性相关系数 R2=0.987； 

获得二级膜膜后发酵液浊度(NTU)与吸光度A 的标准曲线 

Y=464.00293X2+290.75055X-0.04805，线性相关系数 R2=0.999 

参考资料：

[1] 高云华，徐守军，刁天喜. 抗体药物研

究进展[J]. 中国新药杂志, 2014, 23（20）：2414-2417.