CNS前沿文献追踪 - CAR-T细胞上除了CAR还有TCR呢！

研究者们设计CAR并将其表达于T细胞表面，通过CAR特异的识别肿瘤抗原激活T细胞！然而T细胞表面本来是存在TCR用于识别MHC分子提呈的抗原肽的，TCR的激活对于T细胞有着重要意义，那么CAR-T细胞上的TCR激活对于CAR-T细胞起着怎样的作用呢？此次整理分享的就是TCR信号对于CAR-T功能的影响 - 研究者以CAR4（CD4+ CAR-T）和CAR8（CD8+ CAR-T）为研究对象，分析TCR信号对于这两种亚型CAR-T功能的影响。

In vitro和in vivo来看CAR4和CAR8对于肿瘤细胞的杀伤、延长小鼠存活时间没差异

肿瘤细胞刺激后CAR4产生的细胞因子更多（IL-10除外） 

CAR4及CAR8单独灌注时扩增能力无差异，但1:1混合后灌注后CAR8扩增更快

为研究TCR的作用，做了表达HY抗原特异性TCR的CAR

4和CAR8

 In vitro：TCR激活及CAR激活均能引起CAR-T分泌细胞因子脱粒

TCR激活引起CAR表达下调

In vivo：HY抗原特异性TCR的CAR4和CAR8分别灌注表达TCR抗原HY阳性、阴性的荷瘤小鼠

对于TCR抗原HY阳性荷瘤小鼠CAR8“失效”，CAR4依然有效

找CAR8“失效”原因：TCR抗原HY刺激后引起CAR8细胞凋亡marker caspase3/7表达增多，CAR8扩增受到抑制，却不影响CAR4

找CAR8“失效”原因：TCR抗原HY刺激后引起CAR8细胞“疲劳”marker表达上调，CAR4不受影响

TCR的激活受MHC限制，CD4细胞接受的是MHC-II分子提呈的抗原肽，而MHC-II不像MHC-I那么普遍的表达，它大多表达于造血细胞，是否是因为这种限制对CAR存在保护作用呢？因此构建了骨髓移植模型

除female移植female组外CAR8细胞不能像CAR4细胞一样杀死肿瘤细胞，延长荷瘤小鼠存活时间

和前面模型一致，在移植模型上CAR8在TCR激活的情况下“疲劳”marker表达显著升高，CAR4不会

换一种TCR抗原（OVA）验证：CAR8在TCR激活的条件下依然

“失效”，表达“疲劳”marker

CAR4长时间暴露于TCR特异抗原（80天，前面的模型时间较短-7天）也出现了表达凋亡marker、扩增受限、“疲劳”marker表达

上调的现象

从基因表达的水平看：CAR8 TCR单独激活与CAR、TCR双重激活基因表达模式相似，说明在双信号刺激下CAR8是TCR信号占主导（而CAR4是TCR信号占主导）；无论TCR、CAR如何激活CAR8凋亡、抑制受体相关基因表达均较CAR4高

（与前面蛋白水平的结果一致）

 这篇文章着眼于一个在明显不过的点-TCR信号对于CAR-T功能的影响，发现了TCR信号对于CAR8细胞发挥功能显著的抑制作用（促进凋亡、疲劳），这些抑制作用在蛋白及核酸水平都做了验证！除了这篇文章近期还有其他CNS级的文章讲了CD4 CAR-T的“好”，后面会进行分享！- 已经获批上市的CAR-T产品均是“混合物”，这些研究成果的发表对于相关产品的升级意义重大！

另外有个小细节：这篇文章发现TCR激活引起CAR表达下调，上一次分享的文章发现CD22 CAR在灌注一段时间之后表达下调（基因拷贝数没变化、mRNA上调，CAR下调是在转录之后发生的）- 这两篇文章这个小点凑到一起是有“故事”可讲的:-P

Y Yang, ME Kohler, CD Chien, et al. TCR engagement negatively affectsCD8 but not CD4 CAR T cell expansion and leukemic clearance.[J]. Science Translational Medicine, 2017, 9(417):eaag1209.

想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！