二氧化碳培养箱常见的灭菌/除菌方法

北京德泉

2015/09/17 10:19

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体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功与否的关键。而培养过程中最常使用的二氧化碳培养箱都有哪些灭菌/除菌的方法呢？

下面我们来介绍一下这些方法及其优缺点：

1.紫外线消毒：是一种低能量的电磁辐射，可杀死多种微生物，其消毒的强度与辐射的强度和剂量成正比。但是，紫外灯管只能杀死大部分的微生物，对于真菌、孢子等敏感性不强，属于预防性灭菌，一旦污染，无法彻底清洁。而且，紫外灯容易老化，属于耗材，需要额外维护费用。另外，紫外灯对皮肤、眼睛有伤害，对培养细胞与试剂等也会产生不良影响。

2.HEPA过滤除菌：通过风扇是腔内气体循环通过HEPA膜，过滤细菌，而非杀灭细菌，微生物仍然存在于HEPA膜中。所以，在箱体培养细胞的同时，也促进了HEPA中微生物的滋生。而且，HEPA过滤器内置于腔体，极易导致腔体内污染。此外，HEPA也是一种昂贵的耗材，至少6个月更换一次。

3.高温灭菌：主要是将箱体加热到120℃以上，并保持90-120分钟，以杀死细菌和芽孢。高温灭菌过程较长，有的需要25小时。Binder二氧化碳培养箱180℃高温灭菌（如下图）仅需10小时过夜灭菌，不影响第二天的实验。最重要的是，Binder二氧化碳探头（以及三气培养箱的氧气探头）和温度探头在此过程中不必拆卸，可以一同进行180℃的灭菌。因此，这种方法灭菌效果更彻底显著，从而为细胞正常生长提供了强大的保障。

4.化学擦拭/蒸汽熏蒸消毒：用化学物质擦拭熏蒸腔体表面，达到杀菌消毒的目的。这种方法需要耗费多余的人力和化学试剂，可能导致化学物质、清洗剂残留，经常使用化学物质对人体和环境均有损伤。

5.纯铜抑菌：可以杀灭纯铜表面的99.9%的特定微生物，但并不能取代其他的消毒灭菌方法。纯铜材质不仅增加了成本（只有铜含量达到70%以上才有抑菌作用），在高湿度环境下铜还容易被氧化生成铜绿，破坏纯铜材质，从而影响细胞培养。