美国BD全自动微生物鉴定飞行时间质谱仪

全自动微生物鉴定飞行时间质谱仪Biotyper

微生物的快速鉴定与分类

对细菌、酵母和真菌等微生物进行快速可靠的菌种鉴定是临床诊断、食品和动物检验检疫、食品安全与加工质量控制、环境学和分类学研究等领域所必须进行的工作。美国BD联合布鲁克公司推出的MALDI Biotyper高通量微生物鉴定系统可以满足微生物的快速鉴定与分类的需求。该系统包括基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF）和Biotyper数据库，具有快速简便的工作流程和强大可靠的数据处理能力，是微生物鉴别与分类中的最新技术。截止2013年3月份的统计，全球超过1000台MALDI Biotyper系统应用于临床、工业、商检质检以及CDC等行业的微生物快速鉴定。

工作原理

每种微生物都有自身独特的蛋白质组成，因而拥有独特的蛋白质指纹图谱。MALDI Biotyper高通量微生物鉴定系统通过MALDI-TOF质谱仪测得待测微生物的蛋白质指纹谱图，通过Biotyper软件对这些指纹谱图进行处理并和数据库中各种已知微生物的标准指纹图谱进行比对，从而完成对微生物的鉴定。

MALDI Biotyper的优点：

1.操作简单、快速、通量高

单个微生物菌落或其它生物材料经简单的样品前处理（仅需几分钟，详见附件）后，使用MALDI－TOF质谱仪进行测定。所获得的质谱图可直接送到Biotyper数据库进行检索。这个简单而独特的工作流程可以满足绝大多数微生物的鉴定，而且不需要进行革兰氏染色、氧化酶试验或选择PCR引物。一个样品从获得单克隆开始，到样品处理、谱图采集和获得鉴定结果可以在几分钟内完成，操作简单、快速，通量高。

2.灵敏度高

使用经久耐用且性能可靠的布鲁克·道尔顿的MALDI－TOF系列质谱仪，可以实现高重现性的快速可靠检测。由于仪器的高灵敏度，可以检测到低至5000个细胞。

3.准确度好

MALDI－TOF获得的蛋白指纹图谱用作模式匹配，匹配分值用作鉴定结果的分级和归类。Biotyper软件对所得的图谱进行归一化分析，其精巧的算法保证了鉴定的精确性。蛋白指纹图主要集中在2-20kDa受到微生物生长环境和状态影响很小的稳定高表达的那些蛋白。

MALDI Biotyper的创新性：

1.优越、成熟的硬件技术。

MALDI Biotyper高通量微生物鉴定系统是建立在MALDI－TOF质谱仪上的。尽管多年来国际、国内的众多研究人员都在尝试建立基于MALDI－TOF技术的微生物鉴定技术，但大多受限于MALDI－TOF质谱技术的有效应用。布鲁克公司的FLEX系列MALDI－TOF质谱仪历经十多年的开发已经非常的成熟，采用了很多专利技术，各项性能指标均很优越，公司并针对微生物检测和鉴定专门开发了专属的样品制备和测定方法，并做了大量认真、细致的研究工作，形成了目前这套准确度高，灵敏度高而且重复性非常好的微生物检测、鉴定方法。

2.设计新颖的Biotyper软件。

BioTyper软件是MALDI Biotyper高通量微生物鉴定系统的一个重要组成部分。这一软件与布鲁克的MALDI－TOF质谱仪的仪器控制和数据采集软件配套并且有机地结合在一起，使用了数据库服务器和客户端分离的模式，采用先进的算法，可以自动化地快速处理大量的数据，以达到高通量准确鉴定的目的。此外，软件的用户界面友好，使用方便。

3.开放式的Biotyper微生物蛋白特征指纹图谱数据库系统。

MALDI Biotyper高通量微生物鉴定系统的另一个重要组成部分是Biotyper微生物蛋白特征指纹图谱数据库系统。这一数据库系统采用开放式的设计，使用简单，占用资源少，使用服务器和客户端架构，既可使用专用的电脑服务器，也可以单机使用，方便、快捷地大批量地处理数据，无需专人维护。目前数据库中已经含有常见的超过2100种微生物的特征指纹图谱，而且还在不断增加中。此外，用户可以根据自己的需要，轻松地添加所获得的新的微生物特征指纹图谱，并用于日常检测、鉴定工作中。

4.大量实际应用经验积累

MALDI Biotyper高通量微生物鉴定系统的开发过程中得到了诸如德国微生物和细胞培养收集中心、美国农业部农业研究服务中心食品微生物学部及其他众多欧美政府部门和大学、医院、研究所等科研单位的支持，在多方合作的努力下，积累了大量实际应用经验，并且这一系统已经在这些地方得到了充分地应用。专家们一致认为MALDI Biotyper具有快速简便的工作流程和强大可靠的数据处理能力，是微生物鉴别与分类中的最新技术。现在已有多个国家将这一方法应用于临床样品的常规检测。