应用指南--OPSI 开放式进样端口与expression CMS 联用快速检测尿液中的芬太尼

在全球范围内，卫生从业人员和执法机构对滥用药物的快速和简便分析方法的需求很大。2017年，芬太尼 fentanyl 已成为滥用最广泛的合成阿片类药物，甚至已经成为一个公共健康问题。芬太尼是一种快速合成止痛药，药效几乎是吗啡的100倍。

       随着市场需求日益增多, AIS 开发了一种简单快速的尿液芬太尼筛查方法, 即 Touch Express OPSI 开放式采样端口与 expression CMS 小型台式质谱仪相结合实现快速筛查。

       OPSI 开放式采样端口技术由 AIS ESI 电喷雾电离源升级开发而来，提供了一个快速检测解决方案。

实验方法

芬太尼(1.0 mg/ml)和芬太尼- d5 (100ug/ml)作为标准溶液。

标液 2.5、5、10、25、50、100、250、500 和1000 ng/ml ，芬太尼- d5：100 ng/ml，绘制校准曲线。

然后采用液-液萃取法制备样品（LLE）。将1.5 mL 1/1乙酸乙酯/己烷加入 0.5 mL 尿液样本中，涡旋 20 s，静置 2 min。然后 1.0 mL 上清转移到干净的 2ml 离心瓶中，在真空蒸发器中蒸发至干燥。用 250ul 甲醇对干燥的提取物进行处理，然后进行 OPSI-CMS 分析。

溶剂以 250µl/min 的速度输送到开放式采样区域。在文丘里效应作用下，溶剂在开口处形成一个弯月面，样品沿着管路进入质谱仪的离子源。将对照和添加芬太尼的尿液样本按顺序接触 Touch Express 取样端口(图1)，在< 30s 内获得结果。 

实验结果

芬太尼和芬太尼-D5 的质谱图：芬太尼和芬太尼-D5 的加氢峰分别在m/z 337.2 和 342.2 处检测到。这些离子 m/z 在进行 SIM 选择性离子监测时定量测定尿液中的芬太尼。

对照尿液中芬太尼的 SIM 分析：无芬太尼对照尿液经 LLE 纯化后，SIM m/z 未检测到干扰，对照尿液中的提取离子电流（XIC）如图 3a 所示。芬太尼-D5的 XIC 如图 3b 所示。

对照尿液中芬太尼的 SIM 分析，2.5 ng/ml，（图4A）和芬太尼-D5 的 SIM 分析，100 ng/ml，（图4B）：2.5 ng/ml 芬太尼的信噪比（S/N）为135，因此估计定量限（S/N=10）低于 1 ng/ml。每个样品的总分析时间小于 30 秒。没有观察到残留，证明 OPSI 具备芬太尼高通量筛查的能力。 

校准曲线显示线性回归相关系数 0.997，线性动态范围为 2.5 至 500 ng/mL。

在 2.5 至 500ng/ml 的浓度范围内，测量的平均准确度和精密度（CV%）分别为87.5±0.17% 至 106.5%±3.36%，在标准范围内。

结论

Touch Express OPSI 开放式进样端口是一项独特的进样技术，为操作人员提供了快速、简便的方案：

        1、可用于药物研究、食品安全、环境、司法鉴定等应用领域；

        2、可用于大分子物质检测，如：蛋白质、脂质、核苷酸、聚合物等；

        3、固体、液体均可直接进样，无需样品前处理，30s 即可获得实验结果；

        4、一种经济有效，高通量的检测技术。