2016/06/17 16:16
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方案摘要:
产品配置单:
DHS TL2010S 中通量组织研磨仪
型号: TL2010S
产地: 北京
品牌: 鼎昊源
¥1万 - 5万
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方案详情:
DHS 鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪研磨新鲜动物组织
—— DNA提取适用性评估对比
实验样品:新鲜动物内脏组织
实验仪器:DHS 鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪(北京鼎昊源科技有限公司生产)
实验目的:
对比鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪与手工液氮法研磨后的新鲜组织样本在DNA提取、RNA提取性能方面的差异,评估自动研磨仪的适用性。
实验材料及试剂:
1.实验材料准备:将10例新鲜样本分别用吸水纸吸干表面的水分后,称重后分装为2管/例,20 mg±0.3 mg/管。
2.实验试剂:天根DP422 DNA/ RNA共提试剂盒
实验过程:
1.研磨
【自动研磨】向离心管内加入300μl裂解液。将离心管放于液氮中,冷冻处理。
液氮冷冻处理后的离心管固定于鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪适配器中,向离心管中加入2粒3mm磁珠。小心将适配器正确安装至自动研磨仪上,设置研磨参数: 5轮循环数,60 s/轮,10 s间隔。启动仪器,研磨组织。研磨后,再向离心管中加入300μl裂解液(裂解液总使用量为600μl) 。
【手工研磨】 取样本放于研钵中,加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中,称重后向其中加入 600μl裂解液。
2.核酸提取、检测及保存
将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本,使用DNA RNA共提试剂盒同时提取DNA和RNA。使用微量分光光度计测定DNA、RNA的浓度及纯度。DNA提取后于-20℃保存,RNA于-80℃保存。
实验结果:
实验结论:
鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪处理与手工液氮研磨处理后提取样本的 DNA、RNA 在浓度、纯度上均无显著性差异(成对检验 P>0.05)。但手工研磨有较大的样本损失率,对于DNA提取浓度较低的样品来说,自动研磨仪可以做到样品0损失,在DNA提取上有着明显的优势,且手工处理的过程复杂、易交叉污染,操作所用时间等方面均不及鼎昊源TL2010S中通量组织研磨仪,因此自动研磨仪对于DNA提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。
本文关键词:新鲜动物内脏组织研磨,组织研磨仪,TL2010S中通量组织研磨仪,鼎昊源
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