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TL-2010S自动研磨仪DNA提取适用性评估

鼎昊源

2013/10/18 10:07

阅读:510

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TL-2010S自动研磨仪推出至今,越来越多用户体验了其在组织DNA提取中相对于手工研磨的方便性及高效性,近日我们在北京某诊断试剂生产企业研发实验室做了一组样品对比实验。
 
实验目的
对比TL2010S中通量自动研磨仪与手工液氮法研磨后的新鲜组织样本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差异,评估自动研磨仪的适用性。
实验材料及试剂
1.  实验材料: 将 10 例 FT 样本分别用吸水纸吸干表面的水分后,称重后分装为2 管/例,20 mg±0.3 mg/管。
2.  实验试剂: 天根DP422 DNA/ RNA共提试剂盒
实验过程
1.  研磨
【自动研磨】向离心管内加入 300 μl 裂解液。将离心管放于液氮中,冷冻处理。
液氮冷冻处理后的离心管固定于自动研磨仪适配器中,向离心管中加入 2 粒 3
mm 磁珠。小心将适配器正确安装至自动研磨仪上,设置研磨参数: 5 轮循环数,60 s/轮,10 s 间隔。启动仪器,研磨组织。研磨后,再向离心管中加入 300 μl 裂解液(裂解液总使用量为 600 μl) 。
【手工研磨】 取样本放于研钵中,加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中,称重后向其中加入 600 μl 裂解液。
2.  核酸提取、检测及保存
将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本,使用 DNA RNA 共提试剂盒同
时提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度计测定 DNA、 RNA 的浓度及纯度。 DNA提取后于-20℃保存,RNA 于-80℃保存。
实验结果

实验结论
自动研磨仪处理与手工液氮研磨处理后提取 FT 的 DNA、RNA 在浓度、纯度上均无显著性差异(成对检验 P>0.05) 。但手工研磨有较大的样本损失率,对于DNA提取浓度较低的样品来说,自动研磨仪可以做到样品0损失,在DNA提取上有着明显的优势,且手工处理的过程复杂、易交叉污染,操作所用时间等方面均不及TL2010S自动研磨仪,因此自动研磨仪对于DNA提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。 
 
本文关键词:自动研磨仪,研磨仪,DNA提取
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