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【华粤行】胚胎干细胞(ESCs）高效转染的一个有利工具
NEPA21 简便高效 无需昂贵的试剂辅助 病毒? NO！
如何简便高效地将DNA、RNA导入（小鼠、人、猪等）胚胎干细胞（embryonic stem cell，ESCs）？一直是令众多干细胞研究人员头疼的难题。常用的脂质体法，对于原代细胞和干细胞的转染几乎难以奏效；而尽管病毒法提高了转染效率，但病毒载体的构建也不那么简单，需要花费大量的时间和成本，而且也不能不考虑安全隐患问题。
NEPA GENE推出的新一代全能型的NEPA21高效基因电转染系统，采用全新设计的电转程序，特别适用于胚胎干细胞、原代细胞等难转染细胞。
细胞：R1小鼠胚胎干细胞 悬浮电转后约48h（100X）
附：NEPA21悬浮电转Protocol （以R1小鼠胚胎干细胞为例）
1. ES细胞培养：正常有饲养层（MEF）培养 3天左右，细胞处于对数增长期，活力旺盛。
2. 收集细胞：胰酶消化收集细胞，吹散为单细胞悬液，Opti-MEM清洗去除血清和双抗。
3. 电转染：细胞与质粒DNA混匀于Opti-MEM中，分装到电极杯中，按照设计好的电转参数（电压、方波脉冲时间、脉冲次数等）执行电转。
4. 电转后，ES铺板于MEF
饲养层上正常培养。之后观察电转结果，后续检测或筛选稳定转染细胞株。
如您正面临原代细胞、干细胞、免疫细胞等难转染问题，如对您现在的转染实验不满意，请联系我们！
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