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NEPA21原位贴壁电转人原代脂肪前体细胞成功

华粤行

2013/03/29 15:00

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    人脂肪前体细胞(Human Preadipocytes,HPAd)来源于人脂肪组织,呈成纤维状,经诱导可分化为成熟的脂肪细胞(Human Adipocytes,HAd)。HPAd来源的HAd常被用来研究胰岛素诱导的葡萄糖转运、生长激素增强的脂类分解以及肥胖基因的表达等。HPAd和HAd可用于体外研究肥胖的原因和治疗、II型糖尿病以及心血管疾病的模型。有趣的是,源于人网膜脂肪组织的HPAd和HAd在脂类分解和leptin表达上与源于皮下脂肪组织的存在显著差异。
    众所周知,原代细胞的转染是不容易实现的,HPAd同样如此,普通的转染试剂,如脂质体等,基本转不进去,即使用病毒感染,效率也很低。电转染理论上可以作用于任何种类的细胞,但是由于技术的限制,电转染技术一直未能在动物细胞领域广泛应用。NEPA21采用全新设计的电转程序,特别适用于难转染细胞、离体组织或动物活体的转染。配合独有的电压衰减(Voltage Decay)设计,NEPA21可在获得高转染效率的同时,提高细胞存活率。(详见http://www.instrument.com.cn/netshow/C161480.htm
    2013年3月27日,华粤行细胞生物学团队在南京医科大学进行的人脂肪前体细胞进行的原位贴壁电转DEMO,尽管电转前细胞融汇度已经近乎100%,可是最佳转染程序组的转染效率仍能达到约35%,细胞存活率在95%以上。两个课题组的老师对电转染的效果给予了高度的评价。 

     3T3-L1(Mouse embryonic fibroblast - adipose like cell line)虽为脂肪前体细胞系,但是用普通的转染方法,同样不容易获得较高的转染效率。而电转实验结果的显示(如下图),NEPA21可以高效地转染该种细胞及其分化成熟的脂肪细胞。
 
Preadipocytes, Fibroblast like before differentiation(In Suspension)

 
Adipocyte-like after differentiation(In Adherence)

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