科研用碱性磷酸酶试剂盒 wi95730

产品名称： 科研用碱性磷酸酶试剂盒 
产品货号： wi95730
产    地： 国产

测定意义： AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。肝硬化、肝癌、肝炎、佝偻病、软骨病等均可引起AKP/ALP的升高，因此AKP/ALP常用于阻塞性黄疸、原发性肝癌等疾病的检查。测定原理：在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成游离酚和磷酸氢二钠，酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化生成红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收。需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。试剂组成和配制：试剂一：液体，50mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体，10ml×1瓶，4℃保存；试剂三：液体，10mL×1瓶，4℃避光保存；试剂四：液体，30mL×1瓶，4℃避光保存，未变成蓝绿色之前均可使用；标准品：液体，1mL×1支，1mg/ml酚标准液。临用前用双蒸水稀释5倍，即为0.2mg/ml标准液。粗酶液提取：准确称取约0.1g组织，加试剂一1ml充分研磨，4℃、10000rpm离心10min，取上清待测。血液可直接用于测定，如果浓度高的话，用试剂一稀释。测定步骤：按下表操作：（其中标准管和空白管只需做一次测定，测定管和对照管每个样均需做）充分混匀，用双蒸水调零，迅速于510nm处检测各管的吸光值。AKP/ALP活性计算：1、 组织中AKP/ALP活力计算AKP/ALP活力单位定义：每毫克蛋白每15min产生1mg酚定义为一个活力单位。AKP/ALP（U/mgprot）=0.2×（OD测定管-OD对照管）÷（OD标准管-OD空白管）÷蛋白浓度（mg/ml）2、 血液中AKP/ALP活力计算AKP/ALP活力单位定义：每100ml血液，每15min产生1mg酚定义为一个活力单位。AKP/ALP活力（U/100ml）= 0.2×（OD测定管-OD对照管）÷（OD标准管-OD空白管）×100= 20×（OD测定管-OD对照管）÷（OD标准管-OD空白管）注意事项：1、 试剂二、试剂三和试剂四均需避光保存；2、 试剂四变蓝绿色后不能再使用；3、 加完试剂四充分混匀后，可用酶标仪进行测定；4、 加入试剂四后必须立即混匀，否则显色不完全。 规格：50管48样 注：图片仅供参考