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成纤维细胞生长因子受体3在脂多糖抑制成骨细胞分化中作用的初步研究

2012/05/30 12:49

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2012/05/30

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方案摘要：

本实验拟通过研究激活成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)信号通路时骨组织成骨细胞分化程度在内毒素血症中的变化，为进一步阐明骨组织在炎症反应中变化的机制奠定基础。方法 8周龄雄性C57小鼠和FGFR3功能持续增强的软骨发育不全(Ach)小鼠各6只，分为脂多糖(LPS)组和生理盐水对照组，每组3只。LPS 15mg/kg或等量生理盐水腹腔注射4小时后取右侧胫骨提取RNA，定量聚合酶链式反应(PCR)检测白细胞介素6(IL6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、骨钙素(OC)的变化。LPS、碱性成纤维生长因子(bFGF)处理前成骨细胞系MC3T3E1 4小时后定量PCR检测IL6、TNFα、OC水平，成骨诱导7天后检测碱性磷酸酶(ALP)活性。结果 LPS刺激后，骨组织和MC3T3E1的炎症递质基因IL6、TNFα的RNA水平显著增加(P<0.01)，成骨标志性基因OC表达下调(P<0.05)。且Ach小鼠相应基因变化幅度显著高于C57的变化幅度(P<0.05)。MC3T3E1同时用LPS与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)处理组的IL6、TNFα、OC水平表达水平位于单独用LPS或bFGF组之间。成骨诱导7天后LPS处理组细胞ALP活性显著低于未处理组(P<0.05)，bFGF处理组显著增高(P<0.01)。结论 LPS刺激骨组织发生炎症反应、抑制成骨细胞分化。在整体动物水平持续性激活FGFR3信号通路加重上述反应，在细胞水平低剂量bFGF激活FGFR3减轻上述反应。

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