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ELISA试剂盒

2010-03-22 12:03

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ELISA实验标本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、培养细胞、组织标本。 1. 血清: 室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2-8度保存3天。-20度保存一个月。 2. 血浆: 应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2-8度保存3天。-20度保存一个月。 3. 尿液、胸腹水、脑脊液: 用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2-8度保存3天。-20度保存一个月。 4. 细胞培养上清: 检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。2-8度保存3天。-20度保存一个月。 5. 培养细胞 检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2-8度保存3天。-20度保存一个月。 6. 组织标本 切割标本后,称取重量。加入一定量的0.1mol/L的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,2-8度保存3天。-20度保存一个月。(一定的量通常实验室指1g重的组织加入5ml的0.1mol/L的PBS,PH7.4的缓冲液。 用手工或匀浆器将标本匀浆化标本的时间以彻底匀化标本为止,具体时间以实验的标来定。)

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