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免疫荧光非特异性染色的消除方法

2010-03-16 10:26

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一、非特异性染色的主要因素   组织的非特异性染色的机理很复杂,其产生的原因主要可分为以下几点:   (1)一部分荧光素未与蛋白质结合,形成了聚合物和衍化物,而不能被透析除去。   (2)抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白,可与组织成分结合。   (3)除去检查的抗原以外,组织中还可能存在类属抗原(如Forssman氏抗原),可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。   (4)从组织中难于提纯抗原性物质,所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其他组织成分的抗体,以致容易混淆。   (5)抗体分子上标记的荧光素分子太多,这种过量标记的抗体分子带过多的阴离子,可吸附于正常组织上而呈现非特异性染色。   (6)荧光素不纯,标本固定不当等。

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