夹芯式垂直电泳槽使用方法

那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于夹芯式垂直电泳槽使用方法:

  夹芯式垂直电泳槽使用方法：

一、组成部件

(一)装有铂金丝的贮液槽一对，配有冷却装置及电泳缓冲液流出口。 

(二)凹型橡胶框，配有玻璃板，可分别制作厚度为lmm、1.5mm的凝胶板，操作时根据需要选择适当厚度的玻璃板及梳子配套使用。

(三)样品孔模具(梳子)用于电泳加样。 

(四)固定贮液槽的螺丝杆及螺母4对，28D、30型为5对。 

(五)橡胶管五根。两根长的用于连接冷却水的出入口；中等长度的两根用于连接电极缓；中液的流出口；*短的一根用于连接贮液槽间的冷却水。

(六)导线1付。

● 二、使用方法

(一)清洗部件

上述部件组装前要彻底清洗干净。尤其是玻璃板及凹形带槽橡胶框，必须用泡沫海绵沾少许肥皂粉或洗涤剂彻底清洗干净。清洗后的玻璃板应放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。

(二)组装电泳槽

A、1、将四只固定螺杆插到一只贮液框(半上槽)的相应孔洞中，然后将贮液框仰放在桌上。

2、左手拿凹型槽橡胶模框，右手的拇指与中指握住玻璃板的两侧边缘插到橡胶模框内 (注意手指不能接触灌胶面的玻璃板)。

3、将带有玻璃的橡胶模框子放在仰放的贮液槽框架上，其下缘必须对齐贮液槽框下缘。

4、双手拿另一只贮液槽框与仰放在桌上的贮液槽框相合，并使橡胶框上的凸出线位于贮液槽有机玻璃框中央。

5、装上四只螺母，拧紧螺丝。注意拧紧螺丝时用力应均匀，*好用双手按斜角位置双双逐渐拧紧。

6、将电泳槽垂直竖起，放在桌上，带短玻璃板的贮液槽称上槽(阴极端)，带长玻璃板的贮液槽称为下槽(阳极端)，在长玻璃板与橡胶框间有一缝隙。此缝隙可用已熔化的10％琼脂沿长玻璃板下端灌入，为防止留存气泡，可稍抬起一端即可赶去气泡。待琼脂完全凝固后才能灌胶。

B、也可将槽垂直竖起，将带有玻璃的橡胶模框直接放入槽中，对称拧紧螺丝后，用琼脂封底边。

(三)灌胶

1、先灌分离胶，待凝固后再灌浓缩胶。灌胶前接通冷却水，夹紧连接上下贮液槽的两根橡胶管。

2、用细头滴管吸取胶液，沿长、短玻璃板中间缝隙从一端加入胶液。为防止产生气泡，可稍拾起另一端(气泡往高处走)，不断加入胶液。若单层胶(分离胶)则加胶量约距离短玻璃板上端0.3厘米处，轻轻加少许水，双手轻轻将梳子插入，待胶凝后就可形成凹形加样孔。 

3、为防止漏胶，在上、下贮液槽中立即加入蒸馏水，但蒸馏水不能超过短玻璃板上缘。

4、胶凝固后即可看到样品槽梳子与凝胶板间有一层折

射率不同的亮区。

(四)加样

1、松开连接上、下贮液槽两根橡皮管上的夹子，放掉槽内的蒸馏水，待水流完后，再夹紧夹子。

2、双手轻轻取出样品梳子，即可看到界线清楚的加样孔，将孔中水分吸去(注意千万不要碰坏孔沿的字面)。

3、在上、下贮液槽中加入缓；中液，液体高度应超过上贮液槽短玻璃板上缘。

4、用微量注射器吸取一定量的样品加到长、短玻璃板间的凹型凝胶样品孔内(注意加样动作要轻，针头不能碰坏胶面)。

(五)电泳

一贮液槽导线与电泳仪的负极相连，下贮液槽导线与电泳仪的正极相连。检查线路无误，方可按照所要求的电压电流进行电泳。

(六)取出胶板

电泳结束，旋松螺母，取出胶框，剥出玻璃板，在两块玻璃板下角空隙内，用刀片背面轻轻撬动，即可将胶面与一块玻璃板分开，将有胶板的玻璃板平放在桌上，双手轻轻沿凝胶底将胶片托起，放在大培养皿中染色，胶板经漂洗、脱色后即可看到清晰的分离条带。

以上就是上海嘉鹏科技有限公司为大家整理总结关于夹芯式垂直电泳槽使用方法。

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